雙染法檢測細胞凋亡-免費閱讀
【正文】 今天用Annexin VEGFP/PI雙染法檢測樹突狀細胞的凋亡情況，存有下面幾個問題：
設(shè)定FL2 （或FL3）標尺位置: 可以通過一定數(shù)據(jù)的雙陽性細胞來區(qū)分PI+和PI的細胞群體。3. 檢測Annexin VEGFP 單染的細胞并檢查FL1FL2（或FL3）散點圖，保證在左上和右上象限內(nèi)沒有顆粒。因為熒光補償設(shè)置與PMT 的電壓直接相關(guān)，所以不同儀器之間的補償不同。6. 在1 小時內(nèi)用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。樣品著色1. 離心收集懸浮細胞，微量離心機轉(zhuǎn)速2000RPM，離心時間5min，棄培養(yǎng)基。AnnexinV +依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS 高親和力特異性結(jié)合。這樣在編輯模板時，應該按照實際需要檢測的樣品管數(shù)進行設(shè)置。C 避光條件下孵育15分鐘。 流式細胞儀激發(fā)光波長采用Ex.= 488nm雙波長激發(fā)，Em.= 510 nm檢測EGFP熒光(FL1 channel)和575 nm的發(fā)射檢測PI。 根據(jù)未處理細胞空白對照和經(jīng)Annexin V、PI 分別細胞染色后的單染對照的分析設(shè)定十字門的位置。如果有
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