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雙染法檢測細(xì)胞凋亡-免費(fèi)閱讀

2025-10-02 01:02 上一頁面

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【正文】 今天用Annexin VEGFP/PI雙染法檢測樹突狀細(xì)胞的凋亡情況,存有下面幾個(gè)問題:
設(shè)定FL2 (或FL3)標(biāo)尺位置: 可以通過一定數(shù)據(jù)的雙陽性細(xì)胞來區(qū)分PI+和PI的細(xì)胞群體。3. 檢測Annexin VEGFP 單染的細(xì)胞并檢查FL1FL2(或FL3)散點(diǎn)圖,保證在左上和右上象限內(nèi)沒有顆粒。因?yàn)闊晒庋a(bǔ)償設(shè)置與PMT 的電壓直接相關(guān),所以不同儀器之間的補(bǔ)償不同。6. 在1 小時(shí)內(nèi)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測。樣品著色1. 離心收集懸浮細(xì)胞,微量離心機(jī)轉(zhuǎn)速2000RPM,離心時(shí)間5min,棄培養(yǎng)基。AnnexinV +依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS 高親和力特異性結(jié)合。這樣在編輯模板時(shí),應(yīng)該按照實(shí)際需要檢測的樣品管數(shù)進(jìn)行設(shè)置。C 避光條件下孵育15分鐘。 流式細(xì)胞儀激發(fā)光波長采用Ex.= 488nm雙波長激發(fā),Em.= 510 nm檢測EGFP熒光(FL1 channel)和575 nm的發(fā)射檢測PI。 根據(jù)未處理細(xì)胞空白對照和經(jīng)Annexin V、PI 分別細(xì)胞染色后的單染對照的分析設(shè)定十字門的位置。如果有
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