【正文】 數(shù)據(jù)獲取途徑 ① 將中藥色譜指紋圖通過(guò)掃描儀等設(shè)備，即可將圖形 /圖像轉(zhuǎn)化成 ASCII數(shù)據(jù)。 指紋圖譜相似性的評(píng)價(jià)從兩個(gè)方面考慮： （ 1） 色譜的整體 “面貌 ”，即有指紋意義的峰的數(shù)目、峰的位置和順序、各峰之間的大致比例（薄層色譜還有斑點(diǎn)的顏色）等是否相似，以判斷樣品的真實(shí)性。 增加 /減少的色譜峰對(duì)指紋圖譜整體相似的貢獻(xiàn)，不是單純性的降低，有可能出現(xiàn)相互消長(zhǎng)的現(xiàn)象。在對(duì)照指紋圖譜建立及與中藥指紋圖譜評(píng)價(jià)過(guò)程中須綜合考慮以下原則。 4. 1 對(duì)照指紋圖譜的建立與指紋圖譜評(píng)價(jià) 目前對(duì)中藥材、中間體及成品（主要為注射劑）的指紋圖譜研究大多采用圖譜法，經(jīng)分析檢測(cè)得到了大量的色譜數(shù)據(jù)。 指紋特征選擇 指紋圖譜一量建立，按照《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求》（暫行）規(guī)定，除提供指紋圖譜外，還應(yīng)說(shuō)明相應(yīng)的技術(shù)參數(shù)。指紋圖譜一般選用5~10μmC18填料柱，以 4。 柱溫 柱溫的選擇與恒定是影響指紋圖譜技術(shù)穩(wěn)定的主要因素之一。 流動(dòng)相 可用作流動(dòng)相的溶劑有：乙腈、甲醇、乙醇、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、正已烷等。 原藥材的供試品制備最為復(fù)雜。 近年由于藥材量需求增大，藥材資源破壞嚴(yán)重，藥材內(nèi)在質(zhì)量下降，炮制加工的粗放造成有效成分的流失，人為因素造成了藥材質(zhì)量不穩(wěn)定，不利于色譜指紋圖譜的研究與應(yīng)用。 一個(gè)中藥制劑指紋圖譜應(yīng)可以同時(shí)采用兩種或更多種方法進(jìn)行研究。因此 最好選用二極管陣列檢測(cè)器。 （ 3） 熒光檢測(cè)器 （ 4） 電化學(xué)檢測(cè)器 （ 5） 二極管陣列檢測(cè)器 光束通過(guò)流通池、分光系統(tǒng)后，使所有波長(zhǎng)在二級(jí)管陣列檢測(cè)器同時(shí)檢測(cè)器，可得三維的時(shí)間 色譜信號(hào) 吸收光譜圖。 （ 4） 建議 ：中藥指紋圖譜研究過(guò)程中，由于對(duì)樣品的進(jìn)樣量精確度要求不高，因此對(duì)進(jìn)樣器的選擇可結(jié)合研究者的實(shí)際情況，建議選擇 六通閥手動(dòng)進(jìn)樣裝置 。 低壓梯度是在常壓下將多元溶劑輸至混合器中。 常用的脫氣方法有 離線式脫氣 和 在線式脫氣 。 （ 3） 主要廠家及儀器型號(hào) 日本島津 CS系列；美國(guó) Schoeffel SD3000等。 特點(diǎn)：靈敏度高、分離度好、分析速度快，定量分析的精密度優(yōu)于 1% ，但分析范圍只局限于低沸點(diǎn)成分是其主要不足。 2023版《中國(guó)藥典》，采用薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別，列于【鑒別】項(xiàng)下；采用薄層掃描法進(jìn)行含量測(cè)定，列于【含量測(cè)定】項(xiàng)下。在中藥指紋圖譜研究過(guò)程中不建議采用X射線衍射法及核磁共振法。 國(guó)外植物藥指紋圖譜的應(yīng)用 美國(guó) FDA：允許草藥保健品申報(bào)資料可以提供色譜指紋圖； WHO ： 1996年草藥評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則中規(guī)定，如果草藥的活性成分不明，可以提供色譜指紋圖譜以證明產(chǎn)品質(zhì)量的一致。系統(tǒng)性 ： “系統(tǒng)性 “是指指紋圖譜所反映的化學(xué)成分應(yīng)包括中藥有效部位所含大部分成妥的種類(lèi)，或指標(biāo)成分的全部。因此，中藥指紋圖譜是對(duì)現(xiàn)行中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)近控制方法的提高。 分析比較的結(jié)果，是對(duì)供試品與對(duì)照品之間的差異或一致性作出評(píng)價(jià)。 現(xiàn)代分析技術(shù) ：包括光譜、波譜、色譜、核磁共振、 X射線衍射及各種技術(shù)的聯(lián)用。根據(jù)薄層板上的斑點(diǎn)的位置、斑點(diǎn)大小、斑點(diǎn)顏色、斑點(diǎn)數(shù)目的多少進(jìn)行定性鑒別，這種薄層鑒別方法具備了指紋圖譜的特征。 20世紀(jì) 70年代及 80年代，出現(xiàn)薄層掃描儀，日本和我國(guó)部分學(xué)者用薄層掃描儀得到復(fù)方成藥掃描圖作為色譜指紋圖嘗試應(yīng)用于藥材及成藥分析。 中藥化學(xué)信息 ：植物藥（包括來(lái)源于植物的中藥材）的提取物（包括中藥的湯藥）與化學(xué)合成藥最根本的區(qū)別是，它（即使是單味藥材）是多種化學(xué)成分的混合體。 、有效、穩(wěn)定和可控的關(guān)系 藥物研究的主要內(nèi)容包括藥物安全性、有效性、穩(wěn)定性和可控性，四者缺一不可。 （ 2） 控制中間體、成品的一致性，減少批間差異 中藥生產(chǎn)的原材料，因土壤、氣候等環(huán)境因素及采收加工的不同，實(shí)際使用時(shí)不能保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定，經(jīng)加工提取得到的中間體，每個(gè)批次在成分含量、成分組成及各成分比例方面都不能保持一致。 如：中藥人參中所含的有效成分多為皂苷類(lèi)化合物，則其指紋圖譜應(yīng)盡可能多地反映其中的皂苷成分；銀杏葉中的有效成分是黃酮和銀杏內(nèi)酯類(lèi)，則其指紋圖譜可采用兩種方法針對(duì)這兩類(lèi)成分，分別分析，以達(dá)到系統(tǒng)、全面的目的。 歐共體：在草藥質(zhì)量指南中稱(chēng)，單靠測(cè)定某有效成分考察質(zhì)量的穩(wěn)定性是不夠的，因?yàn)椴菟幖捌渲苿┦且哉w為活性物質(zhì)。 （ 2） 紫外可見(jiàn)分光光度法和紅外光譜法 這兩種方法能夠給出藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的結(jié)構(gòu)信息，但所給出的信息是所有化學(xué)物質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)信息的加和，不具備指紋特征，但可作為中藥指紋圖譜研究的輔助方法。 優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、分析速度快、一次分析樣品數(shù)量多。為中藥指紋圖譜研究的主要方法之一。 高效液相色譜儀2 氣相色譜儀 指紋圖譜研究對(duì)高效液相色譜儀的要求 柱外效應(yīng) 應(yīng)特別注意 “柱外效應(yīng) ”對(duì)分析結(jié)果的影響。離線式脫氣 ：吹氦脫氣法、加熱回流法、抽真空脫氣法、超聲波脫氣法等。優(yōu)點(diǎn)是： ① 僅需要使用一個(gè)高壓輸液泵； ② 減小了溶劑可壓縮性的影響，并能完全消除由于溶劑混合引起的熱力學(xué)體積變化帶來(lái)的誤差。 色譜柱 柱溫 不同柱溫下同一成分在的保留時(shí)間往往發(fā)生遷移，有時(shí)還影響成分之間的分離效果。 特點(diǎn)：可進(jìn)行全波長(zhǎng)檢測(cè)，一次進(jìn)樣可以檢測(cè)到樣品中不同波長(zhǎng)下的所有組分；光譜分辨率高，可以檢測(cè)色譜峰的純度；靈敏度高，線性范圍寬，基線噪聲小。第三章 中藥色譜指紋圖譜研究過(guò)程中的關(guān)鍵問(wèn)題 指紋圖譜技術(shù)在植物藥領(lǐng)域已應(yīng)用十余年，研究方法與研究思路相對(duì)成熟，已形成共識(shí)，普遍采用HPLC、 TLC、 GC或 NIR（近紅外技術(shù)），對(duì)植物藥有效組分進(jìn)行全成分質(zhì)量控制，即指紋圖譜技術(shù)。 指紋圖譜研究方法應(yīng)根據(jù)研究對(duì)象的物理化學(xué)性質(zhì)來(lái)選擇，大多數(shù)方法可采用 HPLC法。 我國(guó)藥材 GAP工程已起步，將有利于中藥注射劑及其它制劑的質(zhì)量控制。原藥材所含的多種組分混雜在一起，樣品制備時(shí)，應(yīng)根據(jù)所含成分和物理化學(xué)性質(zhì)，通過(guò)萃取、沉淀、吸附或通過(guò)化學(xué)反應(yīng)，分離富集樣品。反相高效液相，以乙腈 水系統(tǒng)比較適合梯度洗脫。適宜的柱溫不僅影響色譜峰的分離效果，而且柱溫發(fā)生變化將導(dǎo)致色譜峰保留時(shí)間的遷移，技術(shù)參數(shù)的設(shè)置就失去了意義，因此，柱溫必須限定。 6mm*250mm較適宜，其它