分子細胞遺傳學技術(shù)與產(chǎn)前診斷-免費閱讀
【正文】 ? 應(yīng)用于已知遺傳性疾病家族的目前表型正常的個體。而色譜溫度的選定與野生型 DNA融解溫度（ Tm）有關(guān)。 條件：電泳緩沖液 ?TBE， 電壓 70v, 4?C環(huán)境下電泳過夜 （ %硝酸銀染色 ） 。 ? 雜交分析是否存在突變 ： SNP位點的檢測 Microarraybased method for genotyping of functional single nucleotide polymorphisms using dualcolor fluorescence hybridization. Mutat Res. 2022。 （ 2） 錯義突變 （ missense mutation） ：堿基替換 ， 密碼子發(fā)生改變后 ， 編碼氨基酸亦發(fā)生改變 ， 編碼另一個氨基酸 。 ? 無需進行染色體培養(yǎng)，對于不易制備良好分裂相的實體瘤尤為適用。 11q13) 細胞遺傳學研究中染色體技術(shù)的應(yīng)用 — FISH技術(shù)檢出 t(2。在基因制圖方面的努力，越來越多的這方面探針可以使用 ? 著絲粒重復(fù)序列探針 ：這些特異性的探針可在中期染色體和間期細胞核中產(chǎn)生強烈信號，可以鑒別特異性染色體。 應(yīng)用 15號染色體一基因特異性探針（紅色）雜交確定其是否缺失；綠色探針鑒定 15號染色體著絲粒。 ? 這一技術(shù)已廣泛 應(yīng)用于腫瘤基因組不平衡的檢測 。 ? 穩(wěn)定突變 ：傳遞中不改變原有的突變 。 各種類型病理性突變的比例 1. 無義突變和移碼突變： 60％ 2. 稀有的錯義突變： 20％ 3. DNA大片段缺失或重復(fù) : 20％ 另外：可能和疾病風險評估有關(guān)的大量的多態(tài)位點 微小突變 （二） 目前常用的對 已知 點突變的分析技術(shù) ? 限制性片段長度多態(tài)性（ RFLP） ? 等位基因特異性（ PCR）擴增（ ASA） ? 等位基因特異性寡核苷酸雜交（ ASO） ? DNA芯片 （ RFLP）分析 ? 當突變影響到某一限制性內(nèi)切酶位點時，可通過酶切 PCR產(chǎn)物，電泳分析 :限制性片段長度多態(tài)性（ RFLP） （ PCR）擴增（ ASA） ? 通過設(shè)計兩個 5’端引物，一個與正常 DNA互補，一個與突變 DNA互補。 即使只有一個堿基的不同 ， 也會形成不同的二級結(jié)構(gòu)并可引起非變性條件下的電泳遷移率的差異 。其原理是在接近 DNA融解溫度條件下進行離子對反相高效液相色譜分析 。 7. Multiplex Ligationdependent Probe Amplifcation — MLPA ? Denatured genomic DNA is hybridized with a mixture of more than 40 probes. ? Each MLPA probe consists of two oligonucleotides, one synthetic and one M13derived. ? The two part of hybridized probes are ligated. ? All probe ligat
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