抗原或抗體檢測-免費閱讀
【正文】 一個抗體分子可偶聯(lián)90個生物素分子，通過生物素又可連接多個親合素。（2）夾心法（sandwich assay）:將已知的特異抗體包裝在固相載體（塑料板凹孔或紙片上），加入待檢標本，標本中的抗原即可與載體上的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的材料后加入該抗原的酶標記抗體，洗去未結(jié)合的酶標抗體，加底物顯色，用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度，可定量測定抗原。它們與抗體結(jié)合不影響抗體活性。非標記抗原含量與標記抗原抗體復(fù)合物的量呈一定的函數(shù)關(guān)系。由于熒光顏色不同標記兩種不同的抗體，對同一細胞進行雙標記染色。本法的缺點是檢查多種抗原，就需分別制備相應(yīng)的多種標記抗體。試驗時試管中先加入檢測系統(tǒng)和補體，混合經(jīng)37℃30分鐘使抗原、抗體、補體形成復(fù)合物，再加入指示系統(tǒng)，如出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，說明檢測系統(tǒng)中沒有相對應(yīng)的抗原抗體，補體是游離的指示系統(tǒng)的SRBC和抗體結(jié)合而出現(xiàn)溶血，即為反應(yīng)陰性。溶血反應(yīng)也是用于抗體分泌細胞即空斑形成細胞（PFC）檢測的原理。故凝集反應(yīng)即可測定抗原，也可測抗體，方法簡便、敏感。在洗去未沉淀的抗原和抗體后，在膜上加標記的抗人免疫球蛋白的抗體，此抗體可以和病毒抗原與人抗體形成的免疫復(fù)合物發(fā)生反應(yīng)，最后加入顯色底物（如果抗人Ig是用酶標記的）或做放射自顯影（抗人Ig用125Ⅰ標記）以顯示結(jié)果（圖4）。先將樣品加入瓊脂中電泳，將抗原各成分依電泳速度不同而分散開。免疫比濁法（immunonephelomytry）就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經(jīng)過一段時間，用光散射濁度計（nephelometry）測量反應(yīng)液體的濁度，來推算樣品中的抗原含量。最廣泛應(yīng)用方法有下述幾種：（一）沉淀反應(yīng)可溶性抗原與抗體結(jié)合，在兩者比例合適時，可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物。（2）生物體內(nèi)各種大分子物質(zhì)：包括各種血清蛋白（如各類免疫球蛋白、補體的各種成分）、可溶性血型物質(zhì)、多肽類激素、細胞因子及癌胚抗原等均可做為抗原進行檢測。在實際工作中，把濃度低的反應(yīng)成分（抗原或抗體）的濃度固定，把濃度高的另一種反應(yīng)成分作一系列稀釋。若無預(yù)期的現(xiàn)象發(fā)生，則說明樣品中無相應(yīng)的抗原存在。1．抗原與抗體的親和力(affinity)抗原抗體的結(jié)合就像酶與底物的結(jié)合，激素與其受體的結(jié)合一樣不是化學(xué)的反應(yīng)，而是非共價鍵的可逆的結(jié)合。高親合力的抗體與抗原的結(jié)合力強，即使抗原濃度很低時也有較多的抗體結(jié)合抗原形成免疫復(fù)合物?？捎脤嶒炐詷藴是€推算出樣品中抗原（或抗體）的含量?？贵w用于臨床治療或?qū)嶒炑芯繒r也需做純度分析和定量測定。用其免疫動物，制備出各種半抗原的抗體，應(yīng)用于各種半抗原物質(zhì)的檢測，例如對某些病人在服用藥物后進行血中藥物濃度的監(jiān)測。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當位置打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內(nèi)，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復(fù)合物。將瓊脂板放入電泳槽內(nèi)，使瓊脂板的兩孔沿著電場的方向，于負極側(cè)的孔內(nèi)加入抗原，于正極側(cè)的孔內(nèi)加入抗體，通電后，抗原帶負電荷向正極泳動，抗體分子雖也帶負電荷，但因分子量大，向正極的位移小，而受瓊脂中電滲作用向負極移動，抗原和抗體能較快地集中在兩孔之間的瓊脂中形成免疫復(fù)合物的沉淀線。第一步，為電泳分離HIV抗原，在電場中根據(jù)分子量大小不同病毒抗原各成分散開。2．間接凝集 間接凝集（indirect agglutination）是用可溶性抗原包被在乳膠顆?；蚣t細胞表面，與相應(yīng)抗體混合出現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。也就是經(jīng)抗Ig的作用提高凝集反應(yīng)的靈敏度。本法包括兩個抗原抗體系統(tǒng)。本方法可用于定性、定量或定位檢測。除微生物學(xué)方面的應(yīng)用外，還可利用單克隆抗體鑒定淋巴細胞的亞類。放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種：（1）液相法：將待檢標本（
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