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基因表達設計ppt課件-免費閱讀

2025-05-28 22:05 上一頁面

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【正文】 ? ( 6)使用低拷貝的質(zhì)粒 遺傳密碼 原核表達系統(tǒng)和真核表達系統(tǒng) ? 一、原核表達的優(yōu)缺點: ? 表達量大,成本低,操作簡單。 ? pET系列:融合 6 his Taq, 用鎳柱親和純化,用 Xa因子酶切除去親和 Taq。 三、 SD序列及其后面堿基的成分; 四、轉(zhuǎn)錄終止區(qū); 五、質(zhì)??截悢?shù)及穩(wěn)定性 ( 1) Par區(qū)---類似染色體的著絲粒;起分配功能; ( 2)無 Par區(qū),通過抗性篩選,保持質(zhì)粒穩(wěn)定存在。 六、起動子與克隆基因間的距離。 M C I GSTP9 FactorXa P9 97 66 43 31 14 20 kDa 表達載體的其它特點 ? 每個載體一般都有 3個緊臨的移碼的 stop code, 無論用 MCS中的任意酶切位點插入都能終止。 ? 不能進行修飾,可能有些蛋白沒有生物活性。 ? 表達蛋白的穩(wěn)定性: ? ( 1)使用蛋白酶缺失的工程菌:( Ion蛋白酶缺失的工程菌) ? ( 2)使用融合蛋白 ? 防止產(chǎn)生包涵體: ? ( 1)使用融合蛋白,幫助正確折疊; ? ( 2)使用輔助質(zhì)粒,產(chǎn)生分子伴侶,幫助正
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