細(xì)胞周期調(diào)控ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 生長因子的信號通路主要有： ras途徑， cAMP途徑和磷脂酰肌醇途徑。 ATM編碼一個蛋白激酶，結(jié)合在損傷的 DNA上，能將某些蛋白磷酸化，中斷細(xì)胞周期。 CDK的激活還需要 Thr161的磷酸化，它是在 CDK激酶 (CDK activating kinase CAK)的作用下完成的。 SCDK觸發(fā) preRC的啟動，同時(shí)阻止了 DNA再次進(jìn)行復(fù)制，因?yàn)?SCDK將 CDC6磷酸化，使其脫離 ORC，磷酸化的 CDC6隨后被 SCF參與的泛素化途徑降解； SCDK還可以將某些MCM磷酸化，使其被輸出細(xì)胞核。 泛素由 76個氨基酸組成，高度保守，普遍存在于真核細(xì)胞，故名泛素。APC介導(dǎo)選擇性降解的靶蛋白與 Ubiquitin結(jié)合 (通過 泛素依賴性途徑降解 ) 各類周期蛋白均含有一段約 100個氨基酸的保守序列，稱為周期蛋白框 ，介導(dǎo)周期蛋白與CDK結(jié)合。 目前發(fā)現(xiàn)的 CDK在動物中有 7種。用海洋無脊椎動物和兩棲類的卵為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行這類實(shí)驗(yàn)，好處在于卵的量比較大，而且在胚胎發(fā)育的早期，細(xì)胞分裂是同步化的。如芽殖酵母的 cdc28基因，在G2/M轉(zhuǎn)換點(diǎn)發(fā)揮重要的功能。 不同形態(tài)的 PCC 不僅同類 M期細(xì)胞可以誘導(dǎo) PCC，不同類的 M期細(xì)胞也可以誘導(dǎo) PCC產(chǎn)生，如人和蟾蜍的細(xì)胞融合時(shí)同樣有這種效果，這就意味著 M期細(xì)胞具有某種促進(jìn)間期細(xì)胞進(jìn)行分裂的因子 ，即成熟促進(jìn)因子 (maturation promoting factor， MPF)。 植物細(xì)胞 不含中心體，但在細(xì)胞分裂時(shí)可以正常組裝紡錘體。 優(yōu)點(diǎn)是同步化程度高，適用于任何培養(yǎng)體系。其優(yōu)點(diǎn)是可用于任何懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞 , 省時(shí)，效率高，成本低 ，缺點(diǎn)是同步化程度較低。數(shù)量眾多的核處于同一細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)行同步化分裂，使細(xì)胞核達(dá) 108，體積達(dá) 5~6cm。 ③ 開始出現(xiàn)標(biāo)記 M期細(xì)胞時(shí)，表示處于 S期最后階段的細(xì) 胞，已渡過 G2期，所以從 PLM=0到出現(xiàn) PLM的時(shí)間間 隔為 TG2。它們合成具有特殊功能的 RNA 和蛋白質(zhì)，使細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生分化，但這類細(xì)胞并未喪失增殖能力，在一定條件下可以恢復(fù)其增殖狀態(tài)，但需要經(jīng)過較長的恢復(fù)時(shí)間，稱 G0期細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞、肝、腎細(xì)胞等。 第一節(jié)細(xì)胞周期概述 一、什么是細(xì)胞周期 細(xì)胞周期指由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程，所需的時(shí)間叫細(xì)胞周期時(shí)間。 ◆ 多細(xì)胞生物由一個單細(xì)胞 (受精卵 )分裂發(fā)育而來 ， 細(xì)胞增殖是多細(xì)胞生物繁殖基礎(chǔ) 。S+G2+M 的時(shí)間變化較小 ， 細(xì)胞周 期時(shí)間長短主要差別在 G1期 通常使用的是 3H或者 14C標(biāo)記的 TDR。 細(xì)胞周期各階段的時(shí)間與 PLM的關(guān)系 ◆ 流式細(xì)胞儀測定法 (Flow Cytometry) DNA的含量隨細(xì)胞周期 (G1， S， G2 ， M)的各個時(shí)期呈現(xiàn)出周期性的變化： G1期 ， 是細(xì)胞 RNA和蛋白質(zhì)的合成期 ，即 DNA合成前期 ,此時(shí)細(xì)胞核內(nèi) DNA含量保持二倍體；進(jìn)入 S期后 ， DNA開始合成 ， 即 DNA合成期 ,細(xì)胞核內(nèi)DNA的含量介于二倍體至四倍體之間；細(xì)胞進(jìn)入 G2期 ，即細(xì)胞分裂前期 ， DNA含量為四倍體 ,直到進(jìn)入 M期 ，即細(xì)胞分裂期 ,細(xì)胞分成兩個子細(xì)胞 , M期結(jié)束進(jìn)入下一個細(xì)胞周期 。有絲分裂細(xì)胞變圓隆起，與培養(yǎng)皿的附著性低，此時(shí)輕輕振蕩，M期細(xì)胞脫離器壁，懸浮于培養(yǎng)液中，收集培養(yǎng)液，再加入新鮮培養(yǎng)液，依法繼續(xù)收集，則可獲得一定數(shù)量的中期細(xì)胞。移去 TDR。 將與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)的條件依賴性突變株轉(zhuǎn)移到限定條件下培養(yǎng)，所有細(xì)胞便被同步化在細(xì)胞周期中某一特定時(shí)期。 G1期 PCC為單線狀，因 DNA未復(fù)制。 Masui和 Markert用孕酮誘導(dǎo)卵母細(xì)胞成熟，并用成熟卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)注射到卵母細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)可以促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟，繼續(xù)用該卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo)新的卵母細(xì)胞，仍然可以促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟。這也解釋了為何 cdc25和 wee1雙重突變的個體可以恢復(fù)野生型的表型。 2022年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎獲得者 二、 CDK CDC2與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合才具有激酶的活性，稱為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 (cyclindependent kinase， CDK)，因此CDC2又被稱為 CDK1，激活的 CDK1可將靶蛋白磷酸化而產(chǎn)生相應(yīng)的生理效應(yīng)，如將核纖層蛋白磷酸化導(dǎo)致核纖層解體、核膜消失，將 H1磷酸化導(dǎo)致染色體的凝縮等等。 ② Kip(Kinase inhibition protein)：包括P21cip1 (cyclin inhibition protein 1)、P27kip1(kinase inhibition protein 1)、P57kip2等，能抑制大多數(shù) CDK的激酶活性， P21cip1還能與 DNA聚合酶 δ的輔助因子 PCNA（ proliferating cell nuclear antigen）結(jié)合，直接抑制 DNA的合成 四、 Cyclin 周期蛋白不僅僅起激活 CDK的作用，還決定了 CDK何時(shí)、何處、將何種底物磷酸化，從而推動細(xì)胞周期的前進(jìn)。 在 G2M期， cyclinA、 cyclinB與 CDK1結(jié)合， CDK1使底物蛋白磷酸化、如將組蛋白 H1磷酸化導(dǎo)致染色體凝縮，核纖層蛋白磷酸化使核膜解體等下游細(xì)胞周期事件。 圖 1324 Cyclin B的降解途徑 分裂期周期蛋白 N端有一段序
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1