rna轉(zhuǎn)錄ppt課件-免費(fèi)閱讀
【正文】 要求： ?至少含有 3 個(gè)莖 （ RNA分子內(nèi)配對(duì)形成的局部雙鏈） ?1至 3個(gè)環(huán) （ RNA分子局部雙鏈鼓出的單鏈） ?至少有 13個(gè)一致性的堿基位點(diǎn) 。 雞卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修飾 hnRNA剪接 成熟的 mRNA 雞卵清蛋白基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾 2022/5/25 75 ?內(nèi)含子的分類： 根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子分為 4類： I ： 主要存在于線粒體 、 葉綠體及某些低等真核生物的 rRNA基因； II： 發(fā)現(xiàn)于線粒體 、 葉綠體 ， 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是 mRNA； III： 是常見的形成套索結(jié)構(gòu)后剪接 ， 大多數(shù) mRNA基因有此類內(nèi)含子； IV： 是 tRNA基因及其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子 ， 剪接過程需酶及 ATP。 ? snRNA（ small nuclear RNA, snRNA） 核內(nèi)的小型 RNA。 2022/5/25 67 （二）前體 mRNA在 3’端特異位點(diǎn)斷裂并加上多聚腺苷酸尾 ? 尾部修飾是和轉(zhuǎn)錄終止同時(shí)進(jìn)行的過程 。 2022/5/25 63 ? mRNA的帽子結(jié)構(gòu)（ m7GpppG—） 是在5’ 端形成的。 ?真核生物 mRNA有聚腺苷酸 (poly A)尾巴結(jié)構(gòu) ，是轉(zhuǎn)錄后才加進(jìn)去的 。 ?形成 PIC的順序如下： TATA PIC TF II D TF II A TF II B TF II E RNApol II/TF II D TATA 由 RNAPol Ⅱ 催化轉(zhuǎn)錄的 PIC形成 Ⅱ A Ⅱ B POLⅡ TFⅡ F Ⅱ H Ⅱ E TBP TAF TFⅡ DⅡ AⅡ BDNA復(fù)合物 POLⅡ TFⅡ F Ⅱ A Ⅱ B TBP TAF TATA Ⅱ H Ⅱ E CTD P PIC組裝完成， TFⅡ H使 CTD磷酸化 2022/5/25 54 ?PIC的形成與轉(zhuǎn)錄 2022/5/25 55 （四）少數(shù)幾個(gè)反式作用因子的搭配啟動(dòng)特定基因的轉(zhuǎn)錄 （拼板理論） ? 為了保證轉(zhuǎn)錄的準(zhǔn)確性 ， 不同基因需不同轉(zhuǎn)錄因子 。 ? 增強(qiáng)子 是能夠結(jié)合特異基因調(diào)節(jié)蛋白 ， 促進(jìn)鄰近或遠(yuǎn)隔特定基因表達(dá)的 DNA序列 。 CTD對(duì)于維持細(xì)胞的活性是必需的 。 寡聚 U有利于RNA不再依附 DNA模板鏈而脫出。 這種形狀說明： 2022/5/25 31 ? 依賴 Rho 因子的轉(zhuǎn)錄終止 ? 非依賴 Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止 三、原核生物轉(zhuǎn)錄終止分為依賴 ρ(Rho)因子與非依賴 ρ因子兩大類 轉(zhuǎn)錄終止 指 RNA聚合酶在 DNA模板上停頓下來不再前進(jìn) ， 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來 。 2. DNA雙鏈局部解開 ， 形成 開放轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(open transcription plex) ； 1. RNA聚合酶全酶 (?2????)與模板結(jié)合 ， 形成 閉合轉(zhuǎn)錄復(fù)合體 (closed transcription plex) ； 3. 在 RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng) ， 形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物： RNApol (?2????) DNA pppGpN OH 3? 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物 : 5?pppG OH + NTP ? 5?pppGpN OH 3? + ppi ? 轉(zhuǎn)錄起始過程： 2022/5/25 24 ? 第一個(gè)磷酸二酯鍵生成后 ， σ亞基即從轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物上脫落 ， 核心酶連同四磷酸二核苷酸 ， 繼續(xù)結(jié)合于 DNA模板上， 酶沿 DNA鏈前移 ， 進(jìn)入延長(zhǎng)階段 。 中心部位在 –35bp處 ,該序列的堿基富含 TTGACA。 操縱子包括若干個(gè)結(jié)構(gòu)基因及其上游 (upstream)的調(diào)控序列 。 兩重含義： 一是指雙鏈 DNA只有 一股單鏈 用作模板。 Val GCAGTACATGTC 轉(zhuǎn)錄 RNA DNA 2022/5/25 3 RNA的合成方式 ? 在生物界， RNA合成有兩種方式：一是 DNA指導(dǎo)的 RNA合成，此為生物體內(nèi)的主要合成方式。 Enzymes in Prokaryotic Transcription 2022/5/25 7 模板鏈與編碼鏈 5′Ala 2022/5/25 12 （二） RNA聚合酶由多個(gè)亞基組成 ? 36512 決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄? 150618 催化功能?? 155613 結(jié)合 DN A 模板? 70263 辨認(rèn)起始點(diǎn)亞 基 分 子 量 功 能?大腸桿菌（ ） RNA 聚合酶： 4種亞基 ?、 ?、?’、 ?組成的 五聚體蛋白質(zhì) ，分子量 480 kD。 ? 啟動(dòng)子序列按功能的不同可分為 三個(gè)部位 ，即 起始部位 、 結(jié)合部位 、 識(shí)別部位 。 2022/5/25 22 一、轉(zhuǎn)錄起始需要 RNA聚合酶全酶 ? 轉(zhuǎn)錄起始 不需引物 ，兩個(gè)與模板配對(duì)的相鄰核苷酸，在 RNApol催化下生成磷酸二酯鍵直接連接起來。 ? 第一個(gè)磷酸二酯鍵生成后， ?亞基從轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物上脫落，形成轉(zhuǎn)錄空泡。 2022/5/25 35 ρ因子 DNA RNA RNA聚合酶 2022/5/25 36 （二） 非依賴 Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止 DNA模板上靠近終止處，有些特殊的堿基序列，轉(zhuǎn)錄出 RNA后， RNA產(chǎn)物形成特殊的結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。二者的轉(zhuǎn)錄起始過程有較大區(qū)別，轉(zhuǎn)錄終止也不相同。 通常認(rèn)為這就是 啟動(dòng)子的核心序列 。 – 因子和因子之間互相辨認(rèn) 、 結(jié)合 ， 以準(zhǔn)確地控制基因是否轉(zhuǎn)錄 、 何時(shí)轉(zhuǎn)錄 。 ?RNApol前移處處都遇上 核小體 。 ? 加工主要在細(xì)胞核中進(jìn)行 。 2022/5/25 64 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鳥苷酸轉(zhuǎn)移酶 5? m7GpppGp… 甲基轉(zhuǎn)移酶 SAM ? 帽子結(jié)構(gòu)的生成過程： 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 2022/5/25 65 ? 帽子結(jié)構(gòu)： 2022/5/25 66 ? 帽子結(jié)構(gòu)的意義： ? 可以使 mRNA免遭核酸酶的攻擊 。 ? 加工過程先由核酸外切酶切去 3’ 末端一些過剩的核苷酸，然后由多聚腺苷酸酶催化，以 ATP為底物，在 mRNA
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