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分子生物學總結-免費閱讀

2025-05-01 03:16 上一頁面

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【正文】 是狼就要練好牙,是羊就要練好腿。②正調(diào)控系統(tǒng):調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是激活蛋白,當其處于活化狀態(tài)時與啟動子結合以及和RNA聚合酶的相互作用幫助結構基因的轉(zhuǎn)錄起始。真核生物1真核生物基因表達調(diào)控的特點:①、細胞具有全能性。1大腸桿菌乳糖操縱子中有三種結構基因,分別是lacZ、lacY、lacA?;虮磉_的特點:時間特異性和空間特異性。這一類蛋白質(zhì)在游離核糖體內(nèi)合成,最終的去向是線粒體、葉綠體、細胞核以及過氧化物酶體;②共翻譯轉(zhuǎn)運(前導肽起作用)。(3)非功能肽端的切除;1蛋白質(zhì)前體的共價修飾:①、肽鏈末端的修飾:N端fMet或Met的切除②、信號序列的切除 ③、二硫鍵的形成 ④、部分肽段的切除 ⑤、個別氨基酸的修飾⑥、糖基側鏈的添加 ⑦、輔基的加入1蛋白質(zhì)高級結構的形成:①.構象的形成:在分子內(nèi)伴侶、輔助酶及分子伴侶的協(xié)助下,形成特定的空間構象。1肽鏈的終止機制:①識別:RF識別終止密碼,進入核糖體的受位。1肽鏈合成的延長:肽鏈合成的延長是根據(jù)mRNA密碼序列的指導,依次添加氨基酸從N端向C端延伸肽鏈,直到合成終止的過程。 (2)具有轉(zhuǎn)肽酶活性:將給位上的肽?;D(zhuǎn)移給受位上的氨基酰tRNA,形成肽鍵。氨基酸活化時需消耗2分子高能磷酸鍵,肽鍵形成時又消耗2分子高能磷酸鍵,故縮合一分子氨基酸殘基需消耗4分子高能磷酸鍵。 (6)、變偶性(擺動性):密碼子的前兩個堿基相同,決定了其專一性,而第三個堿基可以發(fā)生變化。 已發(fā)現(xiàn)的核酶有兩種:①剪接型核酶:RNA分子被酶切斷磷酸二酯鍵后有新的磷酸二酯鍵生成 ②剪切型核酶:只剪不接。(3)mRNA的保護作用,提高mRNA在細胞質(zhì)中的穩(wěn)定性。②3’端形成一段多聚核苷酸(Poly A尾巴);首先由核酸外切酶切去339。 啟動子:是RNA聚合酶是識別、結合和啟動轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。(2) 復合轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座酶的活性主要是識別靶部位和轉(zhuǎn)座子的末端并引起轉(zhuǎn)座。常見的如:烷化劑。 常見的DNA的損傷包括堿基脫落、堿基修飾、交聯(lián),鏈的斷裂,重組等。②岡崎片段長約200bp。復制方式: θ形復制、滾環(huán)式復制、D環(huán)式復制。1完整的基因結構包括:前導區(qū)、尾部區(qū)、內(nèi)含子和外顯子 前導區(qū):位于編碼區(qū)的前面,相當于mRNA起始密碼5’端的序列;尾部區(qū):位于編碼區(qū)之后,指mRNA3’端終止密碼子后面的非翻譯序列;1細菌基因組和真核生物基因組的特點比較:細菌基因組的特點真核生物基因組的特點①基因組通常由一條環(huán)形或線形雙鏈DNA分子組成;②只有一個復制起點;③有操縱子結構;④編碼蛋白質(zhì)的基因為單拷貝,但rRNA基因一般是多拷貝;⑤非編碼DNA所占比例很少;⑥基因組DNA具有多種調(diào)控區(qū),如:復制起始區(qū)、復制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動子、轉(zhuǎn)錄終止區(qū)。 ⑤復等位基因:一個座位上的基因,因突變而產(chǎn)生兩種以上的等位基因,他們都影響同一性狀的狀態(tài)和性質(zhì),這個座位上的一系列等位基因總稱為復等位基因。3. 基因為斷裂基因:基因不連續(xù)性,基因內(nèi)部有間隔區(qū)(內(nèi)含子)。最小的重組單位也可以只是一個bp。復性:將變性DNA經(jīng)退火處理,使其重新形成雙螺旋結構的過程,稱為DNA的復性。(2)離子強度(3)DNA濃度。 1DNA變性后性質(zhì)的改變:①增色效應:對260nm紫外光的光吸收度增加的現(xiàn)象;② 旋光性下降;③ 粘度降低;④ 生物學功能喪失或改變。其中,16S的rRNA參與構成核蛋白體的小亞基,而5S和23S的rRNA參與構成核蛋白體大亞基。2) tRNA是保守性最強的RNA。染色質(zhì)的高級結構:1) 染色質(zhì)的一級結構——核小體 2)染色質(zhì)的二級結構——螺線體 3)染色質(zhì)的三級結構——超螺線體 4)染色質(zhì)的四級結構——染色單體 主要的RNA種類有rRNA(核糖體RNA)、mRNA(信使RNA)、tRNA(轉(zhuǎn)移RNA)、HnRNA(核不均一RNA)、SnRNA(核內(nèi)小RNA)、SnoRNA(核仁小分子RNA)、ScRNA(細胞質(zhì)RNA)等。端粒酶:是一種自身攜帶模板RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶,催化端粒DNA的合成,能夠在缺少DNA模板的情況下延伸端粒內(nèi)3’端的寡聚核苷酸片段,包含兩個活性位點,即逆轉(zhuǎn)錄酶活性和核酸內(nèi)切酶活性。分子生物學的概念:分子生物學是研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結構與功能,并從分子水平上闡明蛋白質(zhì)與核酸、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用的關系及其基因表達調(diào)控機理的學科。核心組蛋白,包括H2A、H2B、HH4和H1組蛋白。②3′端多數(shù)帶有多聚A(Poly A)的尾巴③分子中可能有修飾堿基,主要是甲基化④分子中有編碼區(qū)與非編碼區(qū)。1rRNA的結構與功能①rRNA是細胞中含量最多的RNA,占總量的80%?!竞怂岬淖冃?、復性和分子雜交】1DNA的變性:在理化因素作用下,DNA雙螺旋的兩條互補鏈松散而分開成為單鏈,從而導致DNA的理化性質(zhì)及生物學性質(zhì)發(fā)生改變,這種現(xiàn)象稱為DNA的變性。1將變性DNA經(jīng)退火處理,使其重新形成雙螺旋結構的過程,稱為DNA的復性。 常用的核酸分子雜交技術有:原位雜交、斑點雜交、Southern雜交、Northern雜交、Wester印跡法等【名詞解釋】:探針:將已知順序的核酸片段用放射性同位素或生物素進行標記。 ①突變單位(突變子)發(fā)生突變的最小單位。原核、真核生物基因的結構特點比較:原核生物真核生物1. 功能相關基因高度集中,多順反子形式存在;2. 編碼蛋白質(zhì)的基因通常以單拷貝的形式存在;3. RNA基因常是多拷貝的;4. 細菌中的結構基因沒有居間序列,故它們的基因是連續(xù)的;5. 細菌中DNA大部分是用于編碼蛋白質(zhì)(90%),只有很少不編碼 的DNA序列(10%);6. 細菌的結構基因重復序列少;7. 單個染色體呈環(huán)狀,染色體DNA不和蛋白質(zhì)固定地結合。 ③斷裂基因:指基因的編碼序列在DNA分子上是不連續(xù)排列的,而是被不編碼的序列所隔開?;蚪MDNA的C值定理:將真核生物單倍體基因組所包含的全部DNA含量稱為該物種的的C值基因組DNA的C值悖理:C值悖理是指真核生物中DNA含量的反?,F(xiàn)象。 復制子:基因組內(nèi)能獨立進行復制的單位稱為復制子或復制單位。引發(fā)體:參與引物合成的蛋白質(zhì)復合體稱為引物體。⑦RPA:真核生物的單鏈結合蛋白;RNaseH1和MF1切除RNA引物,DNA聚合酶ε填補缺口。②錯義突變:基因編碼序列中堿基的置換如果發(fā)生在密碼子的第1或第2位堿基上,導致某密碼子改變,并編碼另一種氨基酸,則是錯義突變。兩個親本DNA分子間造成一大段異源雙鏈DNA( Holliday結構)F:E和F相同;G:繞交聯(lián)橋旋轉(zhuǎn)1800;J:形成Holliday異構體;I、通過兩種方式之一切斷DNA單鏈,若左右切,則形成非重組體,若上下切則形成重組體Holliday模型的產(chǎn)物有兩種:片段重組體、拼接重組體RecA的兩個功能:a、促進DNA單鏈與同源雙鏈發(fā)生鏈交換,使重組中DNA配對、Holliday中間體形成、分支移動等步驟得以進行;b、誘發(fā)SOS反應轉(zhuǎn)座子:可以從基因組的一個位置轉(zhuǎn)移到新位置的DNA序列。d、有特定的起始和終止位點;e、依賴于RNA聚合酶合成的RNA中,如只含一個基因的遺傳信息,稱為單順反子(真核生物);如含有幾個基因的遺傳信息,則稱為多順反子(原核生物)RNA轉(zhuǎn)
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