【正文】 酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的 ____________來表示。應(yīng)如何解決？________________________________________________________________________。 提醒 (1)花藥培養(yǎng)的第一步成功的標(biāo)志是接種的花藥長出愈傷組織或釋放胚狀體。 2．材料的消毒 通常將選取的材料先用 ________________________浸泡約 ________ s，在無菌水中清洗，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 ________________溶液消毒 2～ 4 min，最后用無菌水沖洗 ________次。 (2)單倍體育種的過程 ① 在花藥培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，用 ____________繼續(xù)處理單倍體幼苗，染色體加倍，重新恢復(fù)為二倍數(shù)。 (3)組織培養(yǎng)過程中還需要維持一定的外界條件，一是要有適宜的 ________，二是 ________。若試管苗不萎蔫、有新生長的趨勢，便可 將試管苗取出，小心洗凈粘在根上的培養(yǎng)基，植入盛有 ________________________等材料的花盆中，澆足水分，罩上帶孔的塑料薄膜，將花盆放置在 20～ 25℃ 的陰涼處 3～ 5 d。每瓶接種 6～ 8塊嫩莖。利用母液配制菊花組織培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)基，菊花的組織培養(yǎng)比較容易，因此可以不加激素，而如果是其他植物的組織培養(yǎng)，則要配制成三種培養(yǎng)基，即 ____________、 ________________和 ________________。因此菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇 ________________的莖 ________部 ________的側(cè)枝。 (2)細(xì)胞分化：在植物的 ________過程中，細(xì)胞在 ________、 ________和 ____________上都會出現(xiàn) ________的差異，形成這些差異的過程叫做細(xì)胞分化。利用甘蔗生產(chǎn)燃料酒精的一般工藝流程為：甘蔗 →榨汁 (蔗糖 )→酵母發(fā)酵 →蒸餾 →成品 (燃料酒精 )。 KH2PO4 g Na2HPO4 g MgSO4 4．實(shí)驗(yàn)時要對 ________做好標(biāo)記。 6．細(xì)菌的計數(shù) 當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在 ________的平板 進(jìn)行計數(shù)。 2．制備培養(yǎng)基： ① 制備 ________________培養(yǎng)基作為對照組，尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基作為 ________，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否具有 ____________。 (2)顯微 鏡直接計數(shù)法 ① 原理：此法利用特定的 ____________或 ______________，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量，但不能區(qū)分細(xì)菌的死活。 ③ 土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈凅w內(nèi)能合成 ________，將尿素分解的反應(yīng)式是________________________________________________________。對于頻繁使用的菌種， 我們可以采用 ________________法；對于需要長期保存的菌種，可以采用 ________________法。 ③ 吸管要在酒精燈火焰周圍使用。 b．取不超過 mL 的 ________，滴加到培養(yǎng)基表面。 ⑧ 將 ____________，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 ③ 將試管口通過酒精燈的 ________。例如，在谷氨酸生產(chǎn)中，當(dāng)培養(yǎng)基中的碳源與氮源的 比為 4∶ 1 時，菌體大量繁殖，而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳源與氮源的比為 3∶ 1 時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸合成量大增。芽孢的休眠能力十分驚人，可保持幾年到幾十年的生活力。 ③ 為避免周圍環(huán)境中 微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 ________________進(jìn)行。 4．下列關(guān)于亞硝酸鹽的敘述，錯誤的是 ( ) A．亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水 B．亞硝酸鹽分布廣泛，其中蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為 4 mg/kg C．咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在 7 mg/kg 以上，所以盡量少吃咸菜 D．亞硝酸鹽不會危害人體健康，并且還具有防腐作用，所以在食品中應(yīng)多加些以延長食品的保質(zhì)期 9 專題 2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 第 1 課時 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 一、培養(yǎng)基與無菌技術(shù) 1．培養(yǎng)基 (1) 概 念 ：人 們按 照微 生物 對 ________________ 的 不同 需求 ，配 制出 供其 ________________ 的________________。 (4)試討論制作泡菜的過程中應(yīng)注意的問題及原因。 ②發(fā)酵中期：由于硝酸鹽還原菌受抑制；同時形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽 ________________。 (3)危害：膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但是，當(dāng)人體攝入的亞硝酸鹽總量達(dá)到 ________ g時，會引起中毒；當(dāng)攝入總量達(dá)到 ________ g 時會引起死亡。 6．泡菜腌制過程中乳酸菌和乳酸的變化 泡菜發(fā)酵可分為三個階段： (1)發(fā)酵初期：以不產(chǎn)酸的 ____________和 ________活動為主，同時還有一部分 ________________活動。 3．實(shí)驗(yàn)流程 4．操作步驟 (1)將新鮮蔬菜預(yù)先處理成 ____________。 (3)加鹽腌制的過程中，要注意的是 _____________________________________________ ________________________________________________________________________。溫度過低或過高會影響毛霉的 ________和 ____________，從而影響發(fā)酵的進(jìn)程和發(fā)酵質(zhì)量；時間過短，發(fā)酵不充分；時間過長，豆腐會軟化不易成形，從而影響 ______________。 3．影響腐乳品質(zhì)的因素 (1)鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味 鹵湯是由 ________和 ____________配制而成的。 (2)加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著層數(shù)的加高而 ________，近瓶口的表層要____________。 ③ 作用： ，形成 ____________。 (6)在酒精發(fā)酵時瓶內(nèi)溫度一般應(yīng)控制為 ____________。 (6)若酵母菌分解葡萄汁中的葡萄糖 36 g，則可生成酒精 ________mol。 知識點(diǎn)一 果酒和果醋制作的原理 1．請根據(jù)某同學(xué)嘗試使用罐頭瓶在常溫 (21177。 ③ 榨汁 將葡萄放入榨汁機(jī)中榨取葡萄汁，避免將果核壓破；若葡萄未充分成熟，葡萄汁內(nèi)可加糖。 ② 排氣口：排出果酒發(fā)酵時產(chǎn)生的二氧化碳。 ③ 代謝類型： ____________。 ③ 代謝類型：異養(yǎng)兼性厭氧微生物。 (2)制作原理 ① 在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行 ____________，大量 ________，反應(yīng)式為： C6H12O6＋ 6O2―→6CO2 ＋ 6H2O ② 在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行 ________________，反應(yīng)式為： C6H12O6―→2C2H5OH ＋ 2CO2 (3)影響酒精發(fā)酵的環(huán)境條件有 ________________。 (2)果醋制作的原理 ① 在氧氣充足時，能分別把 ________________兩種反應(yīng)物轉(zhuǎn)化為 ________。 ③ 排氣口和一個長而彎曲的膠 管連接：防止空氣中的雜菌進(jìn)入。 ④ 發(fā)酵 a． 裝置：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，留大約 ________的空間。3℃) 下制作果酒的過程，回答下列問題： (1)開 始 時 向 消 過 毒 的 罐 頭 瓶 中 加 入 了 新 鮮 的 葡 萄 汁 和 酵 母 菌 ， 添 加 酵 母 菌 的 目 的 是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________， 添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供 __________。 2．下列產(chǎn)醋最多的措施是 ( ) A．在果酒中加入食醋，并通氣 B．在果酒中加入變酸的酒表面的菌膜，并通氣 C．將果酒暴露在空氣中 D．在果酒中加入沖洗葡萄的水，并通氣 知識點(diǎn)二 果酒與果醋的制作過程 3．如圖是果 酒和果醋制作的實(shí)驗(yàn)流程和某同學(xué)設(shè)計的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。醋酸發(fā)酵時溫度一般應(yīng)控制為 ________。 ________為主的各種酶，有利于將豆腐所含有的蛋白質(zhì)水解為小分子的 ________________。加鹽的目的是使 ________________，利于后期制作時成形；同時鹽也能 ________________的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含 量一般控制在 ________。 知識點(diǎn)一 腐乳的制作原理 1．腐乳是通過微生物發(fā)酵制成的食品，其制作流程如下，請回答有關(guān)問題： 讓豆腐上長出毛霉 ―→ 加鹽腌制 ―→ 加鹵湯裝瓶 ―→ 密封腌制 (1)民間制作腐乳時，豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子，現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種直接接種在豆腐上，這樣做的目的是什么？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)配制鹵湯時加酒的作用是 _________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)泡菜鹽水按清水和鹽的質(zhì)量比為 ________的比例配制， ____________備用。該時期利用了氧氣，產(chǎn)生了缺氧環(huán)境，乳酸菌才開始活動。 (4)在人體內(nèi)的代謝特點(diǎn)：正常情況下亞硝酸鹽可以 ____________；只有在特定條件下 (適宜的 ________、__________和 ________________作用 )，才會轉(zhuǎn)變?yōu)橹掳┪?—— ________。③ 發(fā)酵后期，硝酸鹽還原菌完全受抑制因而亞硝酸鹽含量 ________________。 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)成分：一般含有 ______、 ________、 ________、 ________，此外還要滿足微生物對 __________________(即生長因子 )、 ________以及氧氣的需求。 ④ 實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)避免已 ________處理的材料用具與周圍的物品相接觸。 孢子是微生物產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的細(xì)胞。 2．配制方法 (以制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基為例 ) (1)培養(yǎng)異養(yǎng)菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成 培養(yǎng)基組分 提供的主要營養(yǎng)物質(zhì) 牛肉膏 g 碳源、磷酸鹽和維生素 蛋白胨 g 氮源和維生素 NaCl g 無機(jī)鹽 H2O 定容至 1 000 mL 氫元素、氧元素 (2)實(shí)驗(yàn)流程 12 提醒 合格的培養(yǎng)基必須滅菌效果 好。 ④ 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中， ________一環(huán)菌液。 (2)________________則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。 c．將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻 8～ 10 s。 3．微生物分離純化培養(yǎng)的結(jié)果作出分析與評價 (1)培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對照，若有菌落形成，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是________________________，但時間長了菌種還是要老化的，因此對臨時保存的菌種 ________個月后需重新接種。 Taq 細(xì)菌能忍受 93℃ 左右的高溫，是在美國黃石國家公園的一個熱泉中發(fā)現(xiàn)的，這說明，在尋找目的菌株時，要根據(jù) ____________________________________________。計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積 1 mm2 和高 mm 的計數(shù)室，在 1 mm2 的面積里又被劃分成 25 個 (或 16 個 )中格，每個中格進(jìn)一步劃分成 16 個 (或 25 個 )小格，計數(shù)室由 ________個小格組成。 15 ② 放寬稀釋范圍，如稀釋倍數(shù)為 103～ 107 范圍內(nèi)的要分別涂布，而每個稀釋度下需要 ______個選擇培養(yǎng)基、 ________個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此需要 15 個選擇培養(yǎng)基和 5 個牛 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。在同一稀釋度下，至少對 3 個平板進(jìn)行重復(fù)計數(shù)，然后求出 ____________，并根據(jù)平板所對應(yīng)的稀釋度計算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。注明 ______________________________