臨床基因擴增檢驗的質量保證ppt97-質量檢驗-免費閱讀
【正文】 ? 相對評分 則是將參評實驗室質評得分與所有參評實驗室的平均分進行比較，觀察其得分在全部參評實驗室中所處的位置。 來自 影響臨床基因擴增檢驗結果的 最關鍵因素 ?產物 “ 污染 ” （ Carryover) ?測定人員的操作： 標本混淆；貼錯標簽、核酸提取等 ?試劑 來自 避免基因擴增檢驗假陽性結果的措施 ? 嚴格的實驗室分區(qū)； ? 使用帶 “ 濾心 ” 的吸頭； ? 設立 “ 陰性 ” 質控（與標本同時處理）； ? 使用防 “ 污染 ” （含 UNG）的 PCR試劑； ? 臨床 “ 假陽性 ” 問題：病原微生物如結核桿菌經藥物治療后已死亡，但 PCR仍可為陽性，故治療結束后至少兩周內不宜做 PCR檢測。如核酸提取中的丟失、有機溶劑的去除不徹底、標本中擴增抑制物的殘留等。 來自 質控結果的判斷 ? SI上限 和 SI下限 值均 表 7中 n2s對應的值時 ， 說明測定質控測定值的變化在 2s之內 ， 是可以接受的 。 ? 確定 起動累積和計算的閾值（ k）和質控限（ h） 。 來自 累積和 (CUSUM) 質控方法 ?累積和 (CUSUM) 質控方法于1977年由 Westgard等提出 ,對系統(tǒng)誤差有較好的測出能力。 來自 LeveyJennings質控圖方法的特點 ?優(yōu)點是簡單明了； ?缺點： 以 177。 ? 10X 十個連續(xù)的質控測定值同時處于均值 （ ） 的同一側 。 ? 22S 兩個連續(xù)的質控測定值同時超出 +2s或－ 2s控制限 。 3s，其確切的含義為：在質控測定值中，如果有一個測定值超出均值 177。以上為 批間變異 。 來自 僅含擴增反應混合液的管 的功能 ? 監(jiān)測擴增試劑是否發(fā)生污染，具有較強的污染鑒別性。 來自 對臨床標本中可能存在的 抑制 /干擾物的質控措施 ?質控措施： 采用內質控（ internal control, IC）（通常稱為內標）的方法 ?內標有兩種 ,即競爭性的和非競爭性的內標。 來自 擴增儀孔間溫度的重復性和均一性的 檢測方法 ? 第二種方法并非直接測定孔內溫度，而是通過擴增功能來間接獲知孔間的均一性，即將加有一已知的含一定濃度的陽性質控樣本的擴增反應管置于擴增儀各孔中按常規(guī)進行擴增檢測，觀察結果的一致性程度，如果有某一個或幾個孔結果有問題，則應確定這一個或幾個孔是否會重復性地得到假陰性結果，如果是，則表明相應孔的熱傳導有損壞。 來自 臨床基因擴增檢驗的室內質量控制 ?測定前的質量控制 ?核酸樣本的制備及其質量控制 ?統(tǒng)計學質量控制 ?質量控制的評價 來自 測定前質量控制 ?實驗室設施、儀器設備及管理 ?理想的試劑和操作方法 ?人員培訓 來自 實驗室設施、儀器設備及管理 ?臨床基因擴增檢驗實驗室應有充分合理的空間、良好的照明和空調設備 ； ?實驗室儀器設備應保養(yǎng)良好，實驗用品要達到相應的要求。 ?使用 GITC作為穩(wěn)定劑保存標本，標本可在室溫下穩(wěn)定約 7天。 來自 標本的類型和采集量 ? 標本的類型和采集量應根據所測病原體而定。 ? 均值（ Mean） ? 標準差（ Standard deviation, SD或 s） ? 變異系數(shù)（ Coefficient of variation, CV） 來自 定 義 ? 正態(tài)分布 (Gaussian distribution) 當一質控物用同一方法在不同的時間重復多次測定，當測定數(shù)據足夠多時，如以橫軸表示測定值，縱軸表示在大量測定中相應測定值的個數(shù)，則可得到一個兩頭低，中間高，中為所有測定值的均值，左右對稱的“鐘形”曲線，亦即正態(tài)分布，又稱高斯分布 。 準確度不能直接以數(shù)值表示，通常以不準確度來間接衡量。臨床基因擴增檢驗的 質量保證 來自 定 義 ? 質量保證 (Quality Assurance,QA) 為一產品或服務滿足特定質量要求提供充分可信性所必要的有計劃的和系統(tǒng)的措施 。對一分析物重復多次測定，所得均值與其真值或參考靶值之間的差異亦即偏差即為測定的不準確度。 來自 定 義 ? 正態(tài)分布的基本統(tǒng)計學含義可用均數(shù)（）、標準差（ s）和概率來說明。一般來說，如果標本的量對病原體培養(yǎng)夠用的話，則其量亦足以用于核酸提取及其后的擴增檢測。 來自 標本保存 ? 臨床體液標本長期保存應在 70℃ 下。 加樣器的校準？帶濾塞吸頭的使用及質檢？離心機？熱循環(huán)儀？水浴箱和 /或恒溫干浴儀？酶標儀和洗板機？ 來自 基因擴增儀器設備的質控 儀器設備 質控方法 頻 度 失控標準擴增儀 儀器校驗實驗 當儀器移動時 實驗失敗熱電偶監(jiān)測溫度擴增功能檢測每月一次每 4 個月一次 如靶溫度或溫度差異超出允許范圍待測孔未出現(xiàn)擴增，檢測溫度程序打印 每次測定時 打印程序不對加樣器 校準 每年 2 次 不符合要求水浴箱 溫度檢測 每次實驗 不符合要求酶標儀 預防性維護及校準每年 2 次 不符合要求來自 帶濾塞吸頭的使用及質檢 ?首先制備一個含 1～ 2%甘油及色素（如甲基橙）的水溶液，如果吸頭的最大體積為 100μl，則將加樣器吸取體積調至 110～ 120μl，再套上吸頭后吸取上述有色液體。 來自 實驗室的日常工作管理 工 作 項 目 核 查 點 水浴箱 、 微量恒溫器 （ 加熱模塊 ） □ 校準及記錄 溫度 10%次氯酸鈉溶液 □ 新鮮配制 生物安全柜 □ 先起動運行 30分鐘后再開始工作 室內質控 弱陽性質控 （ 定性 ） □ 有 低 、 中 、 高濃度質控 （ 定量 ） □ 有 陰性質控：原樣本 □ 有
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