肌肉蛋白質(zhì)來(lái)識(shí)別肉的種類以及加熱肉品終點(diǎn)溫度的確定(ppt58)-食品飲料-免費(fèi)閱讀
【正文】 十分希望采用新出現(xiàn)的生物技術(shù) ，如 CDNA資料庫(kù)和抗體連接技術(shù) ， 有效的應(yīng)用到單克隆抗體中使 結(jié)果更準(zhǔn)確并 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? 可以得到期望的特性 。 可以確認(rèn)在不同加熱條件下特定肉樣的足夠加熱溫度 。我們應(yīng)用 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? ELISA技術(shù)分別使用單克隆抗體 2f8和單克隆抗體 5d2來(lái)研究不同內(nèi)部加熱溫度的牛肉和雞肉 。 Callins等認(rèn)為乳酸脫氫酶 在豬肉和牛肉加熱終點(diǎn)溫度確定中可作為分析檢測(cè)指標(biāo)，因?yàn)槊傅幕钚酝訜嶂薪K點(diǎn)溫度和攙雜肉的加熱終點(diǎn)溫度呈反比例的關(guān)系。對(duì)于恢復(fù)多種類的抗原有很多影響因素，例如 PH值，鹽含量，加熱方法，而且為了獲得準(zhǔn)確的定量結(jié)果也應(yīng)對(duì)基質(zhì)進(jìn)行仔細(xì)的研究。 采用了我們的分析程序，這些分析方法對(duì)于摻雜 種類含量的檢測(cè)能力在 － 1 ﹪ 之間 ,可以同大多的已報(bào)道的用于肉種 類確認(rèn)的 ELISA方法相比。對(duì)于定量分析來(lái)講抗原均勻的分布在不同動(dòng)物的半天肌肉組織中是十分 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? 重要的，所以抗原的量決定于同樣品中一定目標(biāo)肌肉組織的分析反應(yīng)，而不用考慮肌肉切面的位置。 3E12同禽肉 反應(yīng)，5D2主要用于雞和火雞的鑒別中。 ? 2）瘦肉混于 ，沸水加熱并且離心 .上層液 121℃ 30分鐘高溫滅菌過(guò)濾，用 90﹪ 乙醇進(jìn)行萃取，沉淀，干燥物溶于鹽溶液中備用。用于加熱處理肉類蛋白鑒別的單克隆抗體技術(shù)也可用于原料肉的鑒 別 中，因?yàn)樵跍?zhǔn)備檢測(cè)樣品時(shí)這些原料肉可以十分容易的被加熱處理。 對(duì)于加熱的肉類的確認(rèn)也應(yīng)用熱穩(wěn)定蛋白。因?yàn)檠宓鞍椎拇嬖诳赡苁潜仨毜?，肌肉組織中殘余的血漿成分會(huì)發(fā)生變化，那么便意味著肌肉組織的存在，進(jìn)而可以得出結(jié)論：用這些多克隆技術(shù)來(lái)定量的估計(jì)攙雜物的量是不可靠的。因此可以十分容易的觀測(cè)到血清和相關(guān)種類抗原的交叉反應(yīng)。夾 心 ELISA使 用 固體相上 的抗體作為結(jié)合抗體。 USDAFSIS肉類檢查員對(duì)這種技術(shù)做了一定的修繕，使用標(biāo)定的試劑紙片和提前準(zhǔn)備的瓊脂平板使此種 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? 技術(shù)在檢測(cè)原料肉的種類時(shí)更加便利 .由于瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)靈敏性易變化，培養(yǎng)的時(shí)間長(zhǎng)，并且非肉的成分干擾大，所以限制了它在完整鮮肉分析中的應(yīng)用。綿羊和山羊 肉類的區(qū)分是使用直接連續(xù)技術(shù)來(lái)對(duì)比 核苷酸的次序而實(shí)現(xiàn)的， 同時(shí)也分析了限制核苷酸內(nèi)切酶聚合酶鏈反應(yīng)的產(chǎn)物， 由于費(fèi)用高和操作的復(fù)雜性，這些基于 DNA 水平的技術(shù)未被常規(guī)分析方法所采納。 等 吸附技術(shù)基于蛋白質(zhì)不同的等電點(diǎn)可以把 蛋白質(zhì)依據(jù)不同種類而分開， 這種技術(shù)被廣泛用于確認(rèn) 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? 魚肉的種類，也可以用于區(qū)分不同種類的原料肉。 來(lái)自 料庫(kù)下載 最理想的方法具有特定， 反 應(yīng) 靈敏，快速，經(jīng) 濟(jì)性，高 檢測(cè)率的特點(diǎn)，并 且能夠提供量性的結(jié)果。 來(lái)自 料庫(kù)下載 肉類應(yīng)被煮制足夠的時(shí)間 ， 有 利于人類的消化吸收 ， 也可以確保消滅其中的病原微生物 。聯(lián)邦法律要 求肉制品必須貼上標(biāo)簽以證明包含肉的種類。在作用于加熱處理過(guò)的肌肉蛋白質(zhì)的過(guò)程中， 單抗體技術(shù)已經(jīng)得到發(fā)展 .隨著加熱終點(diǎn)溫度的增 ELISA反應(yīng)的程度也隨之增加，可以用 MABS 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? (單克隆抗體技術(shù) ) 來(lái)檢測(cè)肉品中特定的肉種類。美國(guó)農(nóng)業(yè)部食品安全和檢測(cè)服務(wù)局（ USDFAFSIS）的管理?xiàng)l例中對(duì)使用機(jī)械分割肉做了如下的規(guī)定：只要求使用一類肉的肉制品中不要包含任何別的種類的機(jī)械分割肉。 鮮豬肉加熱時(shí)內(nèi)部溫度應(yīng)達(dá)到℃ ， 而且殺死旋毛蟲溫度應(yīng)至 少 比 此溫 度再高 17℃ 。在全部加熱處理過(guò)的肉品混合物中 MABS可以對(duì)目標(biāo)品 種的含量就行定量檢測(cè)， 而且可以決定預(yù)煮肉的最大中心加熱溫度。 DNA 雜交技術(shù)已被用于多中肉類品種的 確認(rèn) ,下一步準(zhǔn)備也進(jìn)行基因組 DNA或克 隆 DNA同目標(biāo)DNA的雜交，同時(shí)用顏色或自行 x射線照相技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)工作。血凝抑制實(shí)驗(yàn)是基于阻止抗原血 清 和 它的同類抗原之間積極的反應(yīng)，而此同種類抗原被同種外來(lái)羊的紅血細(xì)胞所包裹。間 接ELISA,先把抗原吸入一個(gè)微量平板上，之后相反動(dòng)物的抗體與抗原結(jié)合吸附在固體層上，通過(guò)二者與隨后加入的反免疫球蛋白的結(jié)合，通過(guò)外來(lái)添加酶而形成的顏色 .它可以檢測(cè)到抗原與抗體的結(jié)合物 。 來(lái)自 料庫(kù)下載 抗體的來(lái)源 ? 在使用酶免疫測(cè)定來(lái)確認(rèn)肉的種類成功的發(fā)展的過(guò)程中，最重要的是特定種類的抗體，不同種動(dòng)物需要不同的免疫試劑。經(jīng)過(guò)仔細(xì)的鏡檢和亞克隆后，可以挑選出穩(wěn)定的雜交細(xì)胞鏈，它可以分泌出針對(duì)某一特定抗原的抗體，而且產(chǎn)生抗體十分頻繁。然而不溶性蛋白的 提取需要特殊的步驟。這些抗體已應(yīng)用于夾心 ELISA中用于鑒別加熱和罐裝肉類食物中 。在加熱之后，純的肉類蛋白質(zhì)顯著減少，這樣在提取物中只有熱穩(wěn)定性或熱抗性的部分蛋白質(zhì)仍保持可溶性。 SDSPAGE和 免疫點(diǎn)技術(shù)用于確 認(rèn) 每種單克 隆肉類浸提物種抗原的成分。 來(lái)自 料庫(kù)下載 ? 所有的單克隆抗體也發(fā)展成對(duì)骨骼肌具有特定的反應(yīng)。 表 6所展示的是使用間接和競(jìng)爭(zhēng) ELISA應(yīng)用單克隆抗體 5D2來(lái)定量檢測(cè)豬肉中雞肉含量的藥劑反應(yīng)水平曲線 ,應(yīng)用間
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