【正文】 ...................................................................................................... 68 耐藥分析............................................................................................................. 69 6 質(zhì)量保證與質(zhì)量控制 ................................................................................................. 70 室內(nèi)質(zhì)控............................................................................................................. 70 外部質(zhì)控............................................................................................................. 71 第八章 CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測 ....................................................................... 72 1 范圍 .............................................................................................................................. 72 2 規(guī)范性文件引用 .......................................................................................................... 72 3 CD4+ 和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測的意義 ....................................................................... 73 HIV感染臨床分期.............................................................................................. 73 HIV感染兒童免疫抑制分級和治療輔助指標(biāo).................................................. 73 疾病進展監(jiān)測..................................................................................................... 73 機會性感染的風(fēng)險評估..................................................................................... 73 抗病毒治療適應(yīng)癥選擇及療效評價................................................................. 73 CD8+T淋巴細(xì)胞為抑制性/細(xì)胞毒性T細(xì)胞.................................................... 74 4 CD4+ 和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測實驗室要求 ............................................................... 74 人員..................................................................................................................... 74 功能分區(qū)............................................................................................................. 74 設(shè)施和設(shè)備......................................................................................................... 74 5 常規(guī)CD4+ 和CD8+T淋巴細(xì)胞檢測的方法和程序 .................................................. 75 樣品采集、運輸和接收..................................................................................... 75 方法..................................................................................................................... 76 試劑..................................................................................................................... 78 實驗資料的記錄................................................................................................. 78 結(jié)果報告............................................................................................................. 78 6 質(zhì)量控制 ..................................................................................................................... 79 第九章 HIV1的分離培養(yǎng) ....................................................................................... 81 1 范圍 ............................................................................................................................. 81 4 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 2 規(guī)范性文件引用 ......................................................................................................... 81 3 HIV1分離的意義 ...................................................................................................... 81 HIV抗體不確定或HIV1陽性母親所生嬰兒的鑒別診斷及診斷.................. 81 HIV表型耐藥檢測及其他HIV生物學(xué)特征的研究。 2 規(guī)范性文件引用 《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS 293有效版本。 Consolidated Guidelines on HIV Testing Services. WHO July 2015. 《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》，衛(wèi)生部第45號令,2006年2月1日。 血漿、DBS可用于HIV1病毒載量、基因型、耐藥檢測。采集血液樣本宜選擇合適的室內(nèi)（外）采血空間，受檢者坐（臥）于合適的位置，準(zhǔn)備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質(zhì)廢棄物容器等。要將標(biāo)簽貼在 7 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 試管的側(cè)面，推薦使用預(yù)先印制好的、專門用于冷凍儲存的耐低溫標(biāo)簽。 應(yīng)使用專門的樣品記錄本或登記表記錄樣品，同時錄入電腦保存。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。 淋巴細(xì)胞富集液：將采集的抗凝全血1500～3000r/min離心15分鐘，吸取血漿層下的淋巴細(xì)胞富集液，置于合適的容器中，備用。 采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于放置尖銳危險品容器內(nèi)，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。 根據(jù)需要，連續(xù)在數(shù)個印圈上滴加樣品。尿液樣品可采集隨機尿，女性經(jīng)期應(yīng)取中段尿。 樣品的保存 用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣品，短期（1周）內(nèi)進行檢測的可存放于2～8℃，一周以上應(yīng)存放于20℃以下。 尿液樣品，使用專用采尿管，室溫下可保存2周，一年之內(nèi)存放宜在2～8℃。 篩查陽性樣品應(yīng)及時進行補充試驗，篩查陰性樣品，可根據(jù)具體需要決定保存時間，建議至少保存1個月。 血液樣品運送時應(yīng)采用三層容器對樣品進行包裝，隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。外面要貼上醒目的標(biāo)簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓”等字樣，還應(yīng)易于消毒。 運送樣品必須有記錄。 檢查樣品的狀況，記錄血液樣品有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。 12 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 第二章 HIV抗體檢測 1 范圍 本章規(guī)定了HIV抗體的檢測方法、結(jié)果報告及質(zhì)量控制。 Consolidated Guidelines on HIV Testing Services. WHO July 2015 Statement from the Surveillance and Survey Working Group and the Laboratory Working Group to the Office of the Global AIDS . Guidelines for using HIV testing technologies in surveillance. UNAIDS/. 《艾滋病病毒抗體快速檢測技術(shù)手冊》（中國疾病預(yù)防控制中心，2011年版。 以診斷為目的的檢測是為了確定個體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。 嚴(yán)格遵守實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）。補充試驗包括抗體確證試驗（免疫印跡試驗，條帶/線性免疫試驗，特定條件*下的替代檢測，免疫層析或免疫滲濾試驗）和核酸試驗（核酸定性和核酸定量試驗）。 5 常規(guī)HIV抗體檢測方法 試劑和樣品 必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局注冊批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。HIV抗原抗體聯(lián)合檢測試劑可同時檢測血液中HIV1P24抗原和HIV1/2抗體。HIV抗原/抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標(biāo)記的HIV抗原/抗體，加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果。 明膠顆粒凝集試驗（PA）：是HIV抗體檢測的一種簡便方法。有效試驗的陰性和陽性對照質(zhì)控，需符合試劑盒的規(guī)定。有效試驗的質(zhì)控點必須顯色。 抗體確證試驗 免疫印跡試驗（WB） WB可使用血清、血漿和濾紙干血斑。待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，加至硝酸纖維素膜上，恒溫震蕩，使其充分接觸反應(yīng)，血清中若含有HIV抗體，就會與膜條上抗原帶相結(jié)合。.3 其他方法： 可用于確證的特定條件下的三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗或酶聯(lián)加快速試驗，免疫層析和免疫滲濾試驗。 確證報告 WB及 RIBA/LIA報告 HIV抗體WB及 RIBA/LIA試驗結(jié)果報告使用附表2（HIV抗體確證檢測報告）。如疑似“窗口期”感染，建議進一步做HIV核酸檢測或24周后隨訪，盡早明確診斷。見附表4。如內(nèi)部對照結(jié)果無效，必須重新試驗。室內(nèi)質(zhì)控品可以購買或?qū)嶒炇易孕兄苽洹? （1）算術(shù)平均值（x）：代表一組質(zhì)控品測定S/CO值的均值。 （3）變異系數(shù)（cv）：是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的一個指標(biāo)，可以用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。目前有許多質(zhì)控規(guī)則，常用的是12S和13S規(guī)則。 質(zhì)控圖的分析及失控處理 實驗室應(yīng)建立質(zhì)控圖分析及失控情況處理的程序。 20 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 計算x和s。lt。 （3）當(dāng)SI 屬“失控”。如實驗完成后未呈現(xiàn)紅色質(zhì)控帶，說明試劑盒內(nèi)質(zhì)控?zé)o效，該試驗結(jié)果無效，樣品須重檢。下列情況需做質(zhì)量控制：更換試劑批號；更換檢測人員；更換包裝；更換試劑廠家。 n3s值時說明該值已在3s范圍之外， 22 全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范 紙破