20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—離子液體雙水相體系萃取分離牛血清白蛋白-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 25 mL甲苯中,然后向其中滴加溴代正丁烷,加熱溫和回流2~3h后,加水分層除去大部分溶劑,再經(jīng)過(guò)減壓蒸餾除去殘留的溶劑和未反應(yīng)的原料,得紅棕色粘稠狀物體?？捡R斯亮藍(lán)G250溶液、BrittonRobinson(BR)緩沖溶液,常規(guī)方法配制。3 結(jié)果與討論 鹽對(duì)體系成相及BSA萃取率的影響實(shí)驗(yàn)中分別用了NaCl、無(wú)水Na2SONa2COMgSOCaCl(NH4)2SO4,NH4Cl、NH4NO醋酸銨、硫酸亞鐵、ZnSOH3BO檸檬酸、酒石酸、酒石酸氫鉀、苯二甲酸氫鉀、KH2PO檸檬酸鉀、四丁基溴化銨等無(wú)機(jī)有機(jī)鹽(酸),只有磷酸鹽,檸檬酸鉀可以與[Bmim]BF4形成雙水相,其中KH2PO4效果較好,用量少,溶解快,故實(shí)驗(yàn)中選用KH2PO4作為成相鹽。鹽濃度大于120 g/L時(shí)則其溶解不完全,實(shí)驗(yàn)中KH2PO4的濃度保持為80 g/L,此時(shí)體系的pH值為6。圖1 KH2PO4濃度對(duì)萃取率的影響圖2 BSA濃度對(duì)萃取率的影響圖3 溶液pH對(duì)萃取率的影響Fig. 1 Effect ofKH2PO4concentration on extraction efficiencyFig. 2 Effect of bovine serum albumin (BSA) concentration on extraction efficiencyFig. 3 Effect of solution pH on extraction efficiency3. 2 離子液加入量對(duì)體系成相及BSA萃取率的影響結(jié)果表明,隨著離子液加入量的增大,上下相比先是減小。3. 3 蛋白質(zhì)的量對(duì)成相和萃取率的影響按實(shí)驗(yàn)方法,固定其它條件。3. 4 溶液酸度對(duì)成相和BSA萃取率的影響在其它條件固定不變的情況下,體系中加入2. 00 。其原因可能是蛋白質(zhì)與離子液之間主要有靜電作用和氫鍵作用。結(jié)果表明,當(dāng)BSA濃度為40 mg/L時(shí),以下離子對(duì)相比和萃取率沒(méi)有影響(Er≤5% ): 100 mg/L的Na+、NH+Mg2+、Zn2+、Cl、CO32。陽(yáng)離子和陰離子表面活性劑的加入則萃取率有所降低。3. 6 離子液回收實(shí)驗(yàn)將實(shí)驗(yàn)過(guò)的富含離子液[Bmim]BF4的上相溶液,用CH2Cl2反復(fù)萃取減壓蒸餾,用考馬斯亮藍(lán)檢驗(yàn)無(wú)蛋白質(zhì)存在時(shí),真空干燥過(guò)夜后按實(shí)驗(yàn)方法重新實(shí)驗(yàn),BSA的萃取率仍在95%以上,說(shuō)明離子液體經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理后可以重復(fù)使用。離子液體經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單處理可以重復(fù)使
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