【正文】 液（或1：10）時，應(yīng)以培養(yǎng)基稀釋法測定，按測定結(jié)果報告菌數(shù)。 大腸菌群： 檢樣稀釋及培養(yǎng)① 以無菌操作，將檢樣25g（ml）放于含有225ml 滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠），經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10 的均勻稀釋液。如此每次遞增稀釋一次，即換用一支1ml 滅菌吸管。1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24177。 證實試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1~2 個進(jìn)行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置36177。 報告：根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN 檢索表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN 值。 各類制劑檢出控制菌或其他致病菌時，按第一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，不再抽樣復(fù)試，即應(yīng)判該供試品不符合規(guī)定。控制菌可用常規(guī)法檢查。培養(yǎng)基稀釋法康腹止瀉片是由木餾油、老鸛草粉、黃柏干浸膏等藥材經(jīng)加工而成的中成藥片劑。為此，根據(jù)《中國藥典》2010年版的有關(guān)規(guī)定[4]，對康腹止瀉片微生物限度檢查方法進(jìn)行驗證，以確定其是否適用于本品的微生物限度檢查，從而準(zhǔn)確有效地檢出樣品中污染的微生物[5]。黑曲霉(ATCC16404)購自廣東省微生物研究所。%無菌氯化鈉溶液制成每1 mL含菌數(shù)為50～100 cfu的菌懸液。然后，用適宜的方法吸出胞子懸液至無菌試管內(nèi)，%(體積分?jǐn)?shù))%(體積分?jǐn)?shù))無菌氯化鈉溶液制成每l mL含孢子數(shù)50～100 cfu的孢子懸液。菌落特征：血瓊脂平板：菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。 驗證試驗驗證實驗所用培養(yǎng)基均按《中國藥典》2010年版附錄“微生物限度檢查法”要求，進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查，且均符合規(guī)定。供試品對照組:各取1∶10供試液 mL，按試驗組操作，不加菌液，測定樣品本底菌。 mL因此本品的細(xì)菌計數(shù)、真菌及酵母菌計數(shù)均可用培養(yǎng)基稀釋法檢查: mL 大腸埃希菌檢查法的驗證 取1∶10供試液10 mL及大腸埃希菌菌液1 mL加入100、200 mL的BL增菌培養(yǎng)基中，按大腸埃希菌的檢查法進(jìn)行檢驗。藥典收載的除去供試品抑菌作用的方法有培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法、離心沉淀法等，或幾法聯(lián)用。表2 控制菌驗證結(jié)果作者：朱文娟，林鐵豪，鐘燕飛，林麗英【參考文獻(xiàn)】[1] 金晴昊，崔京浩，[J].時珍國醫(yī)國藥，2005，16(9)：840841.[2] 金建玲，欒永娜，[J].中醫(yī)藥學(xué)報，2005，33(5):1921.[3] 許華玉，杜鵑，[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2005,6(4):262,4647.[4] :2010年版一部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄79.[5] 林麗英,湛文青,[J].中藥材,2006,29(3):：制藥101班：陳妙珊、曾潔茹、郭慧芳第三篇：2010版與2005版藥典微生物限度檢查法對比2010版與2005版藥典微生物限度檢查法對比引子：新版藥典即將實施，在這里列出微生物限度檢查法的改動。三、采集方法i．被檢人洗手或手消毒后，在接觸患者前或進(jìn)行診療活動前采樣。4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積約30cm2)，并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭予；按同樣方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。3．再加入已熔化的4548℃的營養(yǎng)瓊脂15．18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固。1)℃溫箱培養(yǎng)2448h。六、注意事項1．結(jié)果判定：衛(wèi)生手消毒后細(xì)菌總數(shù)應(yīng)≤10cfu／cm2；外科手消毒細(xì)菌總數(shù)應(yīng)≤5cfu／cm2。5．當(dāng)懷疑醫(yī)院感染暴發(fā)或流行與手傳播有關(guān)時目標(biāo)微生物的監(jiān)測只能定性不能定量。四、基本試劑1．PBS緩沖液(無水磷酸氫二鈉2．85g，磷酸二氫鉀1．36g，蒸餾水1000m1)。2．再用無菌吸管分別吸取上述lml的待檢樣本，置于2個直徑為90mm的滅菌平皿內(nèi)。1)℃溫箱培養(yǎng)72h，記數(shù)菌落數(shù)，必要時做致病菌(金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌等)的檢測。六、注意事項1消毒液染菌量結(jié)果應(yīng)≤100cfu／ml，不得檢出致病菌。暖箱和藍(lán)光箱應(yīng)當(dāng)每日大晚班濕式清潔恒溫罩內(nèi)外表面，特殊感染患兒(包括多重耐藥菌)還應(yīng)消毒，一人用后一消毒。推薦有效期為2周，2周內(nèi)使用，可僅擦拭恒溫罩內(nèi)外表面。取下恒溫罩上輸氧孔的塑料套、輸液軟墊，清洗、擦拭消毒。暖箱若為箱外加水式，則逆時針擰下箱體外面的加水杯或用螺絲刀卸掉，用棉簽刷洗加水杯內(nèi)壁，然后清洗、消毒后沖凈，晾干備用。1更換手套，將所有浸泡消毒的物品取出、沖洗、擦干。1消毒用500mg／L含氯消毒液。病室和病室入口處設(shè)置手衛(wèi)生設(shè)施，每個新生兒床單元放置快速手消毒劑。醫(yī)護(hù)人員在進(jìn)行診治過程中應(yīng)當(dāng)實施標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防，并嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生規(guī)范和無菌操作技術(shù)。對有感染高危因素的新生兒進(jìn)行相關(guān)病原學(xué)檢測，采取針對性措施，避免造成醫(yī)院感染。四、監(jiān)測新生兒室按醫(yī)院規(guī)定進(jìn)行醫(yī)院感染監(jiān)控和報告，開展新生兒醫(yī)院感染目標(biāo)性監(jiān)測。臺面、地酶曰濕式擦拭、清掃，遇感染物質(zhì)時即刻用500mg／1。藍(lán)光箱和暖箱應(yīng)當(dāng)每日清潔并更換濕化液，～人用后一消毒?；純菏褂玫哪叹邎?zhí)行《新生兒奶具清洗消毒SOP》?；純撼鲈汉蟠矄卧M(jìn)行終末消毒。非手觸式水龍頭。速干手消毒劑。2在下列情況下，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)根據(jù)l的原則選擇洗手或使用速干手消毒劑：a)直接接觸每個患者前后，從同一患者身體的污染部位移動到清潔部位時。f)處理藥物或配餐前。5醫(yī)務(wù)人員衛(wèi)生手消毒應(yīng)遵循以下方法：a)取適量的速干手消毒劑于掌心。仔細(xì)檢查無菌導(dǎo)尿包，如過期、外包裝破損、潮濕，不應(yīng)使用。女性：首次消毒順序由外向內(nèi)，自上而下：陰阜、大陰唇、兩側(cè)小陰唇、尿道口；再次消毒順序由內(nèi)向外，自上而下：尿道口、兩側(cè)小陰唇、尿道口；最后會陰、肛門。懸垂集尿袋，不可高于膀胱水平，并及時清空袋中尿液。保持尿道口清潔日常用溫水保持清潔即可但大便失禁的患者清潔以后還需消毒。疑似出現(xiàn)尿路感染而需要抗菌藥物治療前，應(yīng)先更換導(dǎo)尿管。如無禁忌證，將床頭抬高3045176。對于使用呼吸機(jī)的患者，建立預(yù)防VAP集體治療措施。(3)呼吸機(jī)螺紋管使用一次性，有明顯污染物時則及時更換；每周更換萬向延長管；濕化罐添加滅菌注射用水，每天更換；螺紋管冷凝水使用500g/L做菌消毒劑處理后傾倒污水池，不可直接傾倒在室內(nèi)地面，不可使冷凝水流向患者氣道。(6)不宜常規(guī)采用選擇性消化道脫污染(SDD)來預(yù)防HAP／VAP。（9）加強(qiáng)營養(yǎng)，檢測血脂。，一般供試品檢驗量為 或 ；膜劑為 ；、的檢驗量可以酌減。從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為 代。若需要沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為。，注入培養(yǎng)基的平皿應(yīng)放置 分鐘。（），無需過濾，可以直接使用。（）、酵母菌，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長有細(xì)菌，則應(yīng)分別點計菌落數(shù)，合并計算后報告菌數(shù)。（）三、簡答題（25=10分）