【正文】
點(diǎn)。四、誰有權(quán)從研究切片、組織或組織碎片中獲益隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)和病理學(xué)的快速發(fā)展,對病理組織、切片進(jìn)行研究可能會(huì)與商業(yè)利益聯(lián)系起來,這時(shí)勢必涉及利益的分配問題。在國外,目前也只有很少法律、法規(guī)明確了病人具有其組織的所有權(quán).如美國喬治亞州明確規(guī)定基因信息是個(gè)人的財(cái)產(chǎn)。這個(gè)問題上,分析moore對加利福尼亞大學(xué)董事的訴訟這一典型案例對病理學(xué)家及其實(shí)驗(yàn)室以后的實(shí)際操作有重要的示范和指導(dǎo)作用。而研究者,moore的醫(yī)生、加利福尼亞董事與一生物技術(shù)公司簽定了股份合同.并且從來自moore的組織的研發(fā)產(chǎn)品中獲益 在法庭上,moore辯稱他的組織以及由其組織產(chǎn)生的細(xì)胞系是他的財(cái)產(chǎn),因此他有權(quán)從研究產(chǎn)品中獲益。高等法院主要從3個(gè)領(lǐng)域駁回初審法院財(cái)產(chǎn)權(quán)的裁決 第一,高等法院認(rèn)為,缺乏條例或案例來支持moore對人類異常的組織成分的財(cái)產(chǎn)權(quán)的申訴。當(dāng)然,發(fā)展自moore組織的細(xì)胞系和方法的專利是“人類創(chuàng)造性”的產(chǎn)品。它認(rèn)為moore和其他潛在的原告應(yīng)該經(jīng)由其他法理為這種違法類型尋求法律援助,例如,違背信用職責(zé)(應(yīng)訴欺詐行為)和知情同意權(quán)法律(應(yīng)訴①(美)45 code of federal regulations~164.501—514.②(美)45 code of federal regulations~164.506(a)and 45 c f r~164.520(c)(2)(ii)③(美)45 code of federal regulations~164.501—514.因此,在該案例中,加利福尼亞高高等法院認(rèn)為病人無權(quán)從用于研究的組織應(yīng)用中獲益。盡管這些案例引發(fā)了法律討論,他們還沒有直接應(yīng)用到最近的涉及病理學(xué)家的問題上.即關(guān)于擁有組織、切片和組織塊的權(quán)利和從研究它們而獲益的權(quán)利。(2)在利益被實(shí)現(xiàn)成生物源性材料的產(chǎn)品之前,具潛在商業(yè)價(jià)值的應(yīng)用必須對病人公開。美國病理學(xué)學(xué)會(huì)關(guān)于《使用人類組織用于研究、教育和質(zhì)量控制》的法規(guī)也強(qiáng)調(diào)知情同意權(quán)的重要性,[81他們尤其建議承諾的形式應(yīng)該是書面的而非空白的承諾,以便病人明確地表示接受或拒絕捐獻(xiàn)其組織用于教育或研究目的。(2)組織標(biāo)本是獨(dú)特的(也就是moore似的組織標(biāo)本),還是普通的(也就是做常規(guī)檢查的組織標(biāo)本)。醫(yī)生可能會(huì)在利益的驅(qū)使下加入病人放棄所有關(guān)于他們組織離體以后的權(quán)利的條款,這樣的解決方案應(yīng)當(dāng)避免,因?yàn)槿绻艞壍臈l款太寬廣(即病人放棄太多權(quán)利),法庭可能會(huì)認(rèn)為他們是不能執(zhí)行的條款。(3)病人已被告知在其研究中可能的任何商業(yè)利益。在處理實(shí)際工作中謹(jǐn)慎行事,以免為自己帶來不必要的麻煩。andrews lb:my body,my property[j].hastings center pep,1986,16:28moore v regents of univerity of california,793 p.2d 479(cal 1990)mohapatra s,kalogjera l:who owns these slides?overview of legalissues facing pathologists an d laboratories when saving and sengingout tissues,slides,and tissue blocks[j].pstholo~case reviews.20038(3):90~97ama current opinions of the council on ethical and judicial affairs167。為了解決上述的問題,減少患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),為患者蠃來保貴的治療時(shí)間,超聲波快速石蠟制片法可勝任此項(xiàng)工作。應(yīng)用超聲波快速石蠟制片機(jī),一般可以在6小時(shí)工作時(shí)間內(nèi)發(fā)出常規(guī)病理診斷報(bào)告(上午11點(diǎn)前送檢標(biāo)本,當(dāng)天下午5點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告;下午4點(diǎn)前送檢標(biāo)本,次日上午12點(diǎn)前發(fā)出報(bào)告)。如送檢標(biāo)本為少見疑難病例,需要進(jìn)一步做免疫組化檢查,在6小時(shí)內(nèi)發(fā)出初檢報(bào)告,免疫組化報(bào)告3工作日內(nèi)發(fā)出。計(jì)劃首先開放科室:胃腸鏡活檢,耳鼻喉活檢,宮頸活檢,子宮內(nèi)膜刮出組織。(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來回銼動(dòng)??v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,如長管狀器官以橫切為好。2.固定(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法,從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。(2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。(8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。在取材中還應(yīng)十分注意組織內(nèi)是否有縫線或骨組織,如碰到不可避免的鈣化組織,應(yīng)與技術(shù)室講明,在切取纖維組織、肌肉、組織、胃腸道時(shí),應(yīng)注意纖維及肌肉的走向,取材時(shí)盡可能按與纖維平行走向切取為佳。另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態(tài),增加組織 韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。筆者認(rèn)為,10%福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時(shí)的揮發(fā)和取材時(shí)帶入的水分影響,濃度被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。所以, 盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用,但酸性福爾馬林對絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用,所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE用12~15%酸性福爾馬林也可以(每100毫升12~15%福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸)。對需做免疫組織化學(xué)的組織,更不應(yīng)當(dāng)忽視。一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系,其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力,比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水,組織如果在低濃度酒精里充分脫水,在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,因此,僅需短時(shí)間就可完成,如果這時(shí)不縮短純酒精的時(shí)間,便會(huì)引起組織發(fā)脆;如果脫水時(shí)加溫,使用丙酮,還可引起組織收縮,并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。所以本人認(rèn)為,大小標(biāo)本最好分開脫水,一般情況下,大標(biāo)本脫水時(shí)間(室溫18℃)以80%酒精2小時(shí)、95%酒精(2道)各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)、純酒精(3道)各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí),二甲苯(2道)各3060分鐘為宜;小標(biāo)本脫水時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。更換試劑,應(yīng)以量為基礎(chǔ),定量更換,不能等到切片不好時(shí)再去更換。用其他浸透劑(如火棉膠、明膠等)滲入組織內(nèi)部的過程可稱為浸透或透入。有條件的可以每天打開第一道石蠟的蓋子,讓二甲苯揮發(fā)。包埋的關(guān)鍵一是平整,二是方位。修去兩邊的余蠟(所謂的兩邊,指切片時(shí)與切片刀垂直的兩側(cè))。蠟的熔點(diǎn)應(yīng)在56~58℃之間選擇,不提倡在冬天使用軟蠟。磨刀的手法各人不同,但都要求用力均勻,使刀口和磨刀石全面接觸,兩手的用力點(diǎn)應(yīng)在刀口上,而不是在刀背上。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),真正的鋒刃很難用機(jī)器磨出來。切片的第一步必需粗切。過快會(huì)導(dǎo)致切片厚薄不均,機(jī)器磨損;過慢會(huì)使切片增厚。在切片放蠟塊時(shí),應(yīng)注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行,較難切的部分應(yīng)放在上面,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。切片厚度一般為4~6微米,有人認(rèn)為:只要切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個(gè)微米,切出來的片子就是幾個(gè)微米。(3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。補(bǔ)救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(nèi)(80℃),30~60分鐘,再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片,也許會(huì)好一點(diǎn)。如酒精濃度過高,容易引起切片破碎,出現(xiàn)裂隙,像脂肪之類細(xì)胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會(huì)散開,故不能用此法。當(dāng)室溫低于18℃時(shí),必須將切片從溫箱拿出后立即放入二甲苯中脫蠟,或?qū)⒍妆椒湃霚叵鋬?nèi)預(yù)熱(37℃左右)脫蠟,最高不得超過60℃。分化水洗后,可用溫水或 自來水藍(lán)化,并充分水洗(流水沖洗5分鐘以上),以防鹽酸殘留導(dǎo)致切片褪色。其關(guān)鍵的步驟在于蘇木素染好后的分化及藍(lán)化過程,在藍(lán)化結(jié)束后,應(yīng)在顯微鏡下觀察細(xì)胞核著色是否合適,核結(jié)構(gòu)是否清晰,胞漿內(nèi)是否有殘留的蘇木素等等。為增加酒精與二甲苯的相融性,可在二甲苯前面增加一道正丁醇;石碳酸-二甲苯液也有此效,但用石碳酸時(shí)如不洗凈,可引起切片退色,不利于切片久存,故不作推薦。在南方冬春、霉雨季節(jié),封片時(shí)要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片;在天氣較潮濕的日子里,不宜一次將多張切片取出待封,以免切片“還潮”,形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。要將組織全部覆蓋,也不能有氣泡。(2)組織塊的大?。?,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,~,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間, ~,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu),決定其切面的走向。為此可將組織展平,以盡可能維持原形。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。23.脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。同時(shí)能夠注意辦案過程中的各類問題。盡快樹立此類案件的執(zhí)法理念以應(yīng)對具體辦案過程的各種問題。二,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件的特點(diǎn)首先,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件具有組織嚴(yán)密的特點(diǎn)。第三,管理規(guī)范,制度健全,運(yùn)行機(jī)制流暢。第三,賣淫活動(dòng)分地、分時(shí)間進(jìn)行,流動(dòng)性較大。該類案件一般會(huì)牽連出強(qiáng)奸、非法拘禁、傳播淫穢物品、涉黑案件、故意殺人、故意傷害等案件。很多賣淫嫖娼的組織和活動(dòng)都還未發(fā)現(xiàn)。同時(shí),注重群眾的舉報(bào),實(shí)地調(diào)查發(fā)現(xiàn)。(二)認(rèn)真受案受案記錄要清晰,關(guān)于案件的要素盡可能問全、問細(xì)。還要注意案件的管轄,此類案件歸案件發(fā)生地管轄。包括任務(wù)、時(shí)間、地點(diǎn)、參加人員、取證工具、經(jīng)費(fèi)預(yù)算等。(4)暗訪后及時(shí)形成暗訪報(bào)告、反饋意見。2,明查(擴(kuò)大初查戰(zhàn)果)(1)制定預(yù)案,行動(dòng)方案。一定要保障高效暢通。(5)隨身攜帶的武器要鎖好保險(xiǎn),防止發(fā)生意外。要亮明身份、不許異性搜身。重點(diǎn)的位置包括服務(wù)臺(tái)客房內(nèi)的“暗門”和“暗鈴”。3,證據(jù)的收集。犯罪嫌疑人的口供。堅(jiān)決禁止任何方式的刑訊逼供。4,偵查終結(jié)。其次,證據(jù)確實(shí)充分。區(qū)分好此罪彼罪,這樣偵查部門對案件作出的處理才能具有實(shí)體法的依據(jù)。首先,對案件的處理。對能夠證明犯罪事實(shí)的物品,淫穢器具、收入賬目等書證、視聽資料等,應(yīng)當(dāng)移送檢察機(jī)關(guān)。四,組織、強(qiáng)迫、引誘、容留、介紹賣淫案件偵辦中應(yīng)該注意的問題(一)在賣淫案件中,要注意組織他人賣淫,情節(jié)嚴(yán)重;強(qiáng)迫不滿十四周歲的幼女賣淫;強(qiáng)迫多人賣淫或者多次強(qiáng)迫他人賣淫;強(qiáng)奸后迫使賣淫;造成被強(qiáng)迫賣淫的人重傷、死亡或者其他嚴(yán)重后果。以配合、呼應(yīng)、協(xié)助組織賣淫者的組織、策劃、指揮活動(dòng)。(五)在傳播性病案件中,經(jīng)查是賣淫嫖娼的再進(jìn)行性病檢查。三是通過其他方法能夠證明犯罪嫌疑人是明知的。都呈現(xiàn)出規(guī)模大,隱蔽強(qiáng),管理企業(yè)化,經(jīng)營產(chǎn)業(yè)化,有高官充當(dāng)保護(hù)傘的特點(diǎn)。對此類犯罪行為預(yù)防