基因工程7克隆基因的表達概述-預覽頁
【正文】 真核生物與原核生物的基因結構和轉錄轉譯過程均有明顯差異 ， 大腸桿菌的 RNA聚合酶不能識別動物啟動子順序 ， 真核細胞的啟動子在原核細胞中功能很差 ， 所以要得到真核細胞蛋白的有效表達 ， 應將真核基因放在原核細胞的強啟動子控制之下 。 trp啟動子被色氨酸抑制 ， 但易被 ?吲哚丙烯酸誘導 ， 也可用色氨酸饑餓誘導 ， 所合成的蛋白質產量高于 PLac表達載體系統 。 目前市售的 Ptac有兩類 （ PtacI和 PtacII） 。 (2) 臨近環(huán)端的假柄區(qū)段 （ 有時完全在柄內 ） 的G+C堿基含量豐富 。 協助 RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子(蛋白質 )稱為 終止因子 (termination factors)。 轉譯 （ 翻譯 ） mRNA ? 蛋白的過程 。 細菌的起始密碼子 （ initiation codon, initiator） 通常是 AUG， 它轉譯為 n甲酰基甲硫氨酸；少數情況下是 GUG， 轉譯為纈氨酸 。這個 SD序列與 16s核糖體 RNA的 3’末端堿基AUUCCUCCACUAG（ 反 SD序列 ） 互補 ， 控制轉譯的起始 。 (4) 連接在 SD序列后面的 4個堿基的改變 ， 會對轉譯效率發(fā)生很大的影響 ， 如果這個區(qū)域由 4個 A組成 ， 其轉譯作用最為有效；而當其被 4個 C或 G替代 ， 則轉譯效率僅為最高值的25~50%。 在真核細胞中 ， 有時需將前體蛋白降解為功能蛋白 ， 有時需要發(fā)生某種修飾 ， 如進行糖基化變?yōu)樘堑鞍椎?。 所謂 融合蛋白 是指它的氨基端是原核細胞序列 ， 羧基端是真核細胞序列 ， 這種融合蛋白仍具有真核細胞的抗原性 ， 可用作抗原 。 融合蛋白的有用性質： (1) 許多融合蛋白在細菌中較為穩(wěn)定 ， 可保護基因產物不被降解； (2) 有些融合蛋白用化學方法處理后可以釋放出有生物活性的真核肽 ， 如人體胰島素等； (3) 有些融合蛋白可以用作抗原 ， 如制備口蹄疫疫苗等 。 pUR278~292這些 LacZ融合載體在 LacZ基因的 3’端有適應所有三種讀框的克隆位點：BamH I、 Sal I、 Pst I、 Xba I、 Hind III和 Cla I。 而影響 mRNA分子合成速率的因素有兩種： (1) 啟動子強度； (2) 基因的拷貝數 。 由缺陷性分配引起的質粒丟失現象 ， 叫做質粒分離的不穩(wěn)定性 。 通過對細胞群體保持抗菌素的選擇壓力 ，就可以避免出現這種情況 。 phoA：堿性磷酸酶啟動子 SS ： 信號肽序列 ? 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 2023/4/12023/4/12023/4/1Saturday, April 1, 2023 ? 1乍見翻疑夢，相悲各問年。 2023/4/12023/4/1April 1, 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 2023/4/12023/4/12023/4/1Apr231Apr23 ? 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 2023年 4月 2023/4/12023/4/12023/4/14/1/2023 ? 1少年十五二十時，步行奪得胡馬騎。 2023/4/12023/4/12023/4/14/1/2023 8:19:09 PM ? 1越是沒有本領的就越加自命不凡。 2023/4/12023/4/12023/4/12023/4/14/1/2023 ? 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023/4/12023/4/12023/4/12023/4/1 MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看 專家告訴
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