免疫組織化學(xué)技術(shù)-免疫組織化學(xué)方法-預(yù)覽頁
【正文】 原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（單克隆或多克隆）檢測組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形成抗原 — 抗體復(fù)合物；此復(fù)合物上帶有事先標(biāo)記的標(biāo)記物，通過與標(biāo)記物相對應(yīng)的檢測系統(tǒng)，如酶底物顯色反應(yīng)可使之呈現(xiàn)某種顏色，從而可檢測組織細(xì)胞內(nèi)的抗原，以達(dá)到診斷、鑒別診斷和研究的目的。防止組織細(xì)胞的 死后變化，防止自溶和腐敗，以保持組織細(xì)胞的固有形態(tài)。 （ 6） 經(jīng)過固定的組織能對染料產(chǎn)生不同的親和力而著色清晰，便 于辨認(rèn)。 (8)Kanovsky S液 (9)Methacarn固定液，對核內(nèi)抗原的保存效果較好。 組織石蠟包埋 切 片 ? 載玻片的清潔： 市售載玻片需經(jīng)清潔液泡 24h，流水沖洗，系列乙醇浸泡，涼干涂膠，如需開展原位雜交，還需將玻片 240℃ 烤 2h。 (2)52－ 60℃ 烤片 18h。 ? 待細(xì)胞生長達(dá)到 60％以上后取出玻片。 ? 吸取 30－ 50ul（可根據(jù)細(xì)胞量調(diào)整）滴至處理過的載玻片上，然后涂抹均勻。 ? 顯微鏡觀察拍照 ? IPP軟件分析光密度 抗原修復(fù)方法 ? 真空負(fù)壓抗原修復(fù)法： ①切片脫蠟至水。 ⑤待修復(fù)注降至室溫的一， PBS洗 3次，隨后按選好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。 ④ （ ），于微波爐內(nèi)微波輻射 10分鐘，如檢測 Er和 Pr則需要 20輻射分鐘左右。 ③自來水洗，蒸餾水洗。 ? 隔水熱抗原修復(fù)法： ①切片脫蠟至水。即開始計時，持續(xù) 40分鐘。 ③自來水洗，蒸餾水洗。 ② %H2O2甲醇處理切片 10分鐘。 ⑥ PBS沖洗 3次， 2分鐘 /次。 ③自來水洗，蒸餾水洗。 ⑦后按選好的免疫組化染色方法進(jìn)行染色。 二、出現(xiàn)假陽性的原因 組織切片質(zhì)量不佳，造成假象，如 刀痕裂縫邊緣的組織著色過深，不能作 為判斷陽性的依據(jù)。 固定液不合適或濃度不對，導(dǎo)致固定不佳。 緩沖液 pH值不正確。 , February 10, 2023 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 :23:1311:23:13February 10, 2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 上午 11時 23分 13秒 上午 11時 23分 11:23: 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 11:23:1311:23:1311:23Friday, February 10, 2023 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 2023年 2月 10日星期五 11時 23分 13秒 11:23:1310 February 2023 1空山新雨后，天氣晚來秋。 :23:1311:23Feb2310Feb23 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。 2023年 2月 10日星期五 上午 11時 23分 13秒 11:23: 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升
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