第五章體內(nèi)藥物分析-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 上清液即為血漿。 血清的制備： 采集的靜脈血液置試管中，于 37℃ 或室溫放置 30min?1h。 ? 若血漿中含有的抗凝劑對(duì)藥物濃度測(cè)定有影響時(shí)，則應(yīng)使用血清樣品 。 成人一日排尿量為 1?5L。 尿液中藥物濃度的改變不能直接反映血藥濃度，即與血藥濃度相關(guān)性較差、尿液量較大不易保存等。 唾液由腮腺、頜下腺和舌下腺三個(gè)主要的唾液腺分泌匯集而成前兩者分泌量占總量 90%。刺激后采集的為混合唾液。 頭發(fā)樣品的處理： 直接甲醇提取、酸水解、堿水解、酶水解（葡萄糖醛酸酶） 三、體內(nèi)樣品的貯存與處理 （一）冷藏與冷凍 ? 血漿和血清需采集后及時(shí)分離，一般最遲不超過 2h，分離后再置冰箱或冷凍柜中保存（ 20~80℃ ） 。 分析方法與樣品處理步驟的選擇 第二節(jié)、體內(nèi)樣品的的前處理 一、體內(nèi)樣品預(yù)處理的目的 使藥物從綴合物及結(jié)合物中釋放出來，以測(cè)定藥物的總濃度。 加入可與水混溶的有機(jī)溶劑 （ 體積比、 pH值） 破壞蛋白質(zhì)分子內(nèi)及分子間的氫鍵。 熱凝固法 加熱至 90℃ 蛋白熱變性后離心或過濾除去 （二）分離、純化與濃集 當(dāng)藥物濃度較低或分析方法的特異性或靈敏度不夠高時(shí)，生物樣品需分離、純化與濃集。 生物樣品宜在堿性或近中性提取，生物基質(zhì)中內(nèi)源性物質(zhì)多為酸性，在堿性下不易被萃取出來。適合各種液體檢材如血、尿、洗胃液、現(xiàn)場(chǎng)水、飲料等，對(duì)于肝、腎、胃以及其他固體檢材，均需制成水液方可進(jìn)行固相萃取。 自動(dòng)化固相萃取 柱切換高效液相色譜法 3. 超濾法 ? 膜分離技術(shù)，可用于測(cè)定生物樣品中游離藥物濃度 ? 按照分子截留量的大小，可分離 30?1000kD的可溶性生物大分子物質(zhì)。 色譜條件的優(yōu)化： 在進(jìn)行分離條件篩選時(shí) ， 應(yīng)考察生物基質(zhì)中的內(nèi)源性物質(zhì)及代謝產(chǎn)物對(duì)分離與檢測(cè)的干擾 ， 步驟如下： 空白溶劑試驗(yàn) —— 溶劑 (方法特異性 ) 空白生物基質(zhì)試驗(yàn) —— 內(nèi)源性物質(zhì)干擾 (方法特異性 ) 模擬生物樣品試驗(yàn) —— 方法驗(yàn)證 （ 效能指標(biāo) ） 實(shí)際生物樣品測(cè)試 二、分析方法的驗(yàn)證 1． 特異性 —— 避免干擾 2． 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍 3． 定量限 —— 靈敏度 4． 精密度與準(zhǔn) 確度 —— 結(jié)果可重現(xiàn) 5． 樣品穩(wěn) 定性 6． 提取回收 率 7． 分析過程的質(zhì)量控制 準(zhǔn)確度 精密度 專屬性 檢測(cè)限 定量限 線性 范圍 耐用性 體外藥物分析 （一）、方法特異性 (專屬性或選擇性 ) 方法的特異性 (specificity) —— 又稱專屬性或?qū)Ｒ恍?， 通常與選擇性 (selectivity)互用 —— 系指當(dāng)有內(nèi)源性物質(zhì)存在時(shí) ， 方法準(zhǔn)確測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的能力 專屬性 —— 表示所檢測(cè)的 信號(hào) (響應(yīng) )系屬于 待測(cè)藥物所特有 的 選擇性 —— 系指將待測(cè)物質(zhì)與其代謝物及同服的其它藥物加以 區(qū)分 (分離 )的能力 考察一個(gè)分析方法是否具有特異性 ， 應(yīng)著重考慮以下幾點(diǎn)： 1. 內(nèi)源性物質(zhì)的干擾 比較 —— 待測(cè)藥物或其活性代謝產(chǎn)物 檢測(cè)信號(hào)； 2. 代謝產(chǎn)物的干擾 比較 —— 模擬生物樣品和用藥后的實(shí)際生物樣品的 檢測(cè)信號(hào)； 3. 伍用藥物的干擾 還要考慮患者可能同時(shí)服用藥物 (通常為數(shù)有限 )的干擾 。 15%以內(nèi) 。 限度要求 在藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究中 對(duì) ?g/ml級(jí)水平的 RSD一般應(yīng) ≤10% ng/ml級(jí)水平的 RSD一般應(yīng) ≤15% 在 LOQ 附近 RSD應(yīng) ≤20%。 （八）、未知生物樣品濃度超出定量范圍的處理 濃度高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限：分取部分樣品用相應(yīng)的空白生物介質(zhì)稀釋至方法可測(cè)濃度范圍后重新
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