高二生物多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段-預(yù)覽頁
【正文】 板 DNA經(jīng)加熱至 900C以上。在 DNA聚合酶的作用下將引物部位換上 DNA，此時(shí)的 DNA片斷稱為岡崎片斷 ⑤ DNA片斷的連接 在 DNA連接酶的作用下將岡崎片斷連接起來。任意兩個(gè)不互補(bǔ)的堿基之和恒等，占堿基總數(shù)的50%。多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DNA片斷 一、基礎(chǔ)知識 （一） DNA分子的結(jié)構(gòu) C、 H、 O、 N、 P 組成元素 脫氧核苷酸 基本單位 脫氧核苷酸結(jié)構(gòu) 脫氧核苷酸 脫氧核苷 磷酸 脫氧核糖 含氮堿基 嘌呤 嘧啶 腺嘌呤（ A） 鳥嘌呤（ G） 胞嘧啶（ C） 胸腺嘧啶（ T） 一個(gè)核苷酸上的 磷酸基團(tuán)上的 “ － OH”和 另一個(gè)核苷酸分子的第三位碳原子上的羥基 之間失去一分子水，形成 磷酸二脂鍵， 即在 相鄰的 兩個(gè)脫氧核苷酸的 3’和 5’碳原子 之間形成磷酸二脂鍵。堿基對的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定與胸腺嘧啶配對，鳥嘌呤一定同胞嘧啶配對 利用堿基互補(bǔ)配對規(guī)律的計(jì)算 規(guī)律一： DNA雙鏈中的兩條互補(bǔ)鏈的堿基相等，任意兩個(gè)互補(bǔ)的堿基之和相等即 A=T， G=C。 ④ 切掉引物生成岡崎片斷 在核酸酶的作用下切掉引物。 C的溫度范圍內(nèi)， DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)將解體，雙鏈分開，這個(gè)過程稱為變性 ② 當(dāng)溫度緩慢降低后，兩條彼此分離的 DNA鏈又會重新結(jié)合成雙鏈 ③ PCR利用了 DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，現(xiàn)在使用的 PCR儀實(shí)質(zhì)上也是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器 高溫解決了打開雙鏈的問題，但是，又導(dǎo)致DNA聚合酶失活的問題，耐高溫的 Taq DNA聚合酶解決了高溫導(dǎo)致 DNA聚合酶失活的問題，促成了 PCR技術(shù)的自動化 Taq DNA聚合酶的應(yīng)用 緩沖液需要為 PCR反應(yīng)提供的物質(zhì) DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，耐熱的 DNA聚合酶，同時(shí)通過控制溫度使 DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行 PCR技術(shù)是 80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、 快速、 簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出特點(diǎn) 五、實(shí)驗(yàn)小結(jié) PCR儀加熱使 （ ） 變性 , 復(fù)性使引物與模板DNA（ ） ,延伸需將反應(yīng)溫度升至中溫 ( ),在 （ ） 的作用下 ,以 （ ）為原料 ,以 （ ） 為復(fù)制的起點(diǎn) ,合成新
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