正交法測幾種因素對酶活力的影響-預(yù)覽頁
【正文】 理酶反應(yīng)受到多種因素的影響，如底物濃度、酶濃度、溫度、pH值、激活劑和抑制劑等都能影響酶反應(yīng)速度，并且各因素之間也相互影響（交互作用）。它從多因素試驗(yàn)的全部水平組合中挑選部分有代表性的水平組合進(jìn)行試驗(yàn)，通過對這部分試驗(yàn)結(jié)果的分析了解全面試驗(yàn)的情況，找出最優(yōu)水平組合。即按正交表挑選出來的各因素水平組合在全部水平組合中的分布式均衡的。本實(shí)驗(yàn)選取四個因素，即底物濃度[S]、酶濃度[E]、溫度、 pH 值，每個因素選三個水平，選擇L9正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下表：表 1因素水平1[S]/ml2[E]/ml3溫度/℃4pH137725083609本實(shí)驗(yàn)測定的是胰蛋白酶的活力，以血紅蛋白為底物，血紅蛋白水解后的產(chǎn)物多肽或氨基酸可用Folin酚顯色，在680nm下比色來得到產(chǎn)物濃度，從而通過一定時間內(nèi)生成產(chǎn)物的量來判斷酶反應(yīng)的速度。另取試管一支做非酶對照，即加2%，先加15%TCA2mL。為減少顯色反應(yīng)時間帶來的誤差，F(xiàn)olin試劑的加入順序和最后測定吸光度的順序應(yīng)保持一致，且間隔時間應(yīng)盡量相同。3） 對于因素3（溫度），水平一（37℃）為所比較三水平中的最適條件。同時，對因素1和因素2的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也符合底物濃度和酶濃度對酶反應(yīng)速率影響的理論。我認(rèn)為，在單獨(dú)重做6號管的顯色時應(yīng)當(dāng)重新做一個0號管作為相同條件下的比色基準(zhǔn)才較為合理。1. 若不給自己設(shè)限，則人生中就沒有限制你發(fā)揮的藩籬。有時候覺得自己像個神經(jīng)病。歲月是有情的，假如你奉獻(xiàn)給她的是一些色彩，它奉獻(xiàn)給你的也是一些色彩
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