靈芝多糖拮抗前列腺素e2對小鼠脾細胞ifn-γ和tnf-α-預(yù)覽頁
【正文】 100 mg/L showed partial antagonistic effect against the inhibition of IFNγ by PGE2 at the fixed concentration of 20 μmol/L. Further studies indicated that PGE2 (20 μmol/L) impaired the expression of TNFα mRNA after an 8hour incubation and Ganoderma polysaccharides above 100 mg/L could partially antagonize this effect. Conclusion Ganoderma polysaccharides can partially antagonize PGE2induced suppression of murine splenocKey words: Ganoderma polysaccharide。關(guān)鍵詞：靈芝多糖；前列腺素E2；干擾素γ；腫瘤壞死因子α；mRNA中圖分類號：； 結(jié)果 PGE2連續(xù)作用4 h后，脾細胞IFNγ mRNA的表達與對照組比較受到不同程度的抑制，當(dāng)PGE2濃度在10 μmol/L以上時具有統(tǒng)計學(xué)意義(P)。廣州方法 混合淋巴細胞培養(yǎng)反應(yīng)作為實驗?zāi)Ｐ?，半定量RTPCR方法檢測IFNγ和TNFα mRNA的表達水平。結(jié)論 靈芝多糖可部分拮抗PGE2對小鼠脾細胞IFNγ和TNFα mRNA表達的抑制作用。 tumor necrosis factor α?；瘜W(xué)分析表明靈芝含有多種生物活性成分，如多糖類、核苷類、多肽類、三萜類等。本研究的目的是觀察靈芝多糖能否拮抗PGE 2對小鼠脾細胞干擾素γ(IFNγ)和腫瘤壞死因子α(TNFα)mRNA表達的抑制作用，探討靈芝多糖在免疫方面的抗腫瘤機理。RPMI 1640培養(yǎng)基(GIBCO公司產(chǎn)品)，新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司產(chǎn)品)，HEPES(MDBio，分裝)。oligo d(T)18(TaKaRa產(chǎn)品)，瓊脂糖(Biowest Agarose，上海YITO生物器材企業(yè)有限公司分銷)，溴化乙錠(EB，上海博彩生物工程公司產(chǎn)品)。細胞培養(yǎng)于37設(shè)4個PGE2濃度組，分別為40 μmol/L，對照組加等體積的培養(yǎng)液，得半效抑制濃度約為20 μmol/L?？俁NA提取先將DEPC處理水配制的oligo dT18(10 nmol/L)與DEPC處理水配制的總RNA( mg/L)按體積比1∶1混合于Eppendorf管中，70 ℃孵育5 min，4 ℃冷卻2 min。小鼠IFNγ上游引物：539。PCR擴增產(chǎn)物為388 bp。gca cct cag gga aga gtc tg339。下游引物：539。反應(yīng)參數(shù)如下： 94 ℃ min，然后進入以下28個循環(huán)：94 ℃變性45 s，57 ℃退火1 min，72 ℃ min。半定量分析結(jié)果表示為：(被檢測基因擴增產(chǎn)物熒光強度值247。統(tǒng)計學(xué)處理組間顯著性差異采用配對資料的t檢驗。當(dāng)靈芝多糖為100和 200 mg/L時可部分對抗PGE2(20 μmol/L)對IFNγ mRNA表達的抑制作用(P，P，n=5，圖2)。 4: PGE2 (20 μmol/L)。 2: GLB (200 mg/L)。 **P vs control, ΔP, ΔΔP vs group PGE2。在同樣條件下，在實驗體系中同時加入靈芝多糖(100或200 mg/L)和PGE2(20 μmol/L)，TNFα mRNA表達水平比單獨使用PGE要高(P，n=5)，但不能達到空白對照組的水平，表明靈芝多糖可部分對抗PGE2對TNFα mRNA表達的抑制作用(圖3)。 2: GLB (200 mg/L)。 *P vs control。IFNγ是重要的Th1型細胞因子，通過調(diào)節(jié)數(shù)百種不同基因的表達而發(fā)揮其效應(yīng)[8]。另外，靈芝多糖可部分拮抗PGE2對MLR中脾細胞IFNγ mRNA表達的抑制作用。本研究顯示，靈芝多糖可部分拮抗PGE2對MLR中脾細胞TNFα mRNA表達的抑制作用，提示這一作用可能是靈芝多糖抗腫瘤作用的另一機制。慶, 雷林生, 楊淑琴, 等. 大棗中性多糖對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響[J]. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報, 2001, 21(6): 4268.Zhang Q, Lei LS, Yang SQ, et al. Effects of neutral jujube date polysaccharide on the proliferation of mouse splenocytes[J].燁, 鄭160
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