【正文】 物。 （ 3）現(xiàn)代生物技術(shù)階段的技術(shù)特征是 DNA重組技術(shù)。隨著基因技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用前景會(huì)更廣闊。 反轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈反應(yīng)法 和合成法。 和 固定化培養(yǎng) ； ，理論上的最高值可達(dá) 200g DCW/L 。 10. ，合成的 DNA 5’ 末端是 磷酸酯鍵， 3’ 末端是 OH 選擇題 凝膠過(guò)濾法是依賴(lài)（ A ）來(lái)分離蛋白組分。 簡(jiǎn)答題 （ 1）利用基因工程技 術(shù)可大量生產(chǎn)過(guò)去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用建立有效的保障； （ 2）可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便更深入的進(jìn)行研究，從而擴(kuò)大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍； （ 3）可以挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)； （ 4）可對(duì)內(nèi)源性生理活性物質(zhì)的不足之處進(jìn)行改造； （ 5）可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物篩選來(lái)源。 10. 影響高密度發(fā)酵的因素有那些？ （ 1）培養(yǎng)基 為滿(mǎn)足菌體生長(zhǎng)和外源蛋白表達(dá)的需求，常需投入幾倍于生物量的基質(zhì)，為了達(dá)到理想的效果，需要對(duì)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比進(jìn)行優(yōu)化。 （ 4）溫度 溫度是影響細(xì)菌生長(zhǎng)和調(diào)控細(xì)胞代謝的重要因素。 ，一般優(yōu)良菌種的選育方法主要有 自然選育 、 誘變育種 和 原生質(zhì)體融合 。 。 簡(jiǎn)答題 1. 發(fā)酵工程發(fā)展大體上可分為四個(gè)階段，簡(jiǎn)述各階段的技術(shù)內(nèi)容，代表人物和主要產(chǎn)品 第一階段： 20世紀(jì)以前時(shí)期，人類(lèi)利用傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵技術(shù)來(lái)生產(chǎn)葡萄酒、酒、醋，醬、奶酪等 ，生產(chǎn)規(guī)模小，主要憑經(jīng)驗(yàn)控制生產(chǎn)過(guò)程。 第三階段，發(fā)酵工業(yè)大發(fā)展時(shí)期。現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展是人們加深了對(duì)微生物代謝產(chǎn)物合成的遺傳學(xué)與調(diào)節(jié)機(jī)制的了解，為更好的應(yīng)用提供了前提條件。 微生物的生長(zhǎng)需要較多供給有機(jī)碳架的碳源，構(gòu)成含氮物質(zhì)的氮源，還有無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，微量元素和水分等。 水是必需的物質(zhì)，它既是構(gòu)成菌體細(xì)胞的主要成分，又是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)傳遞的介質(zhì)，對(duì)微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成有很重要的作用。在生長(zhǎng)階段，應(yīng)選擇最適生長(zhǎng)溫度；在產(chǎn)物分泌階段，應(yīng)選擇最適生產(chǎn)溫度。對(duì)決大多數(shù)發(fā)酵來(lái)說(shuō)，供氧不足會(huì)造成代謝異常，降低產(chǎn)物產(chǎn)量。在供氧方面主要是設(shè)法提高氧傳遞的推動(dòng)力和液相體積氧傳遞系數(shù)的值，如可調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速或通氣速率來(lái)控制供氧；發(fā)酵液的需氧量受菌體濃度的影響最為明顯，發(fā)酵液的攝氧率隨菌濃增加而按一定比例增加，但是氧的傳遞速率隨菌濃的增加呈對(duì)數(shù)減少。 在了解發(fā)酵過(guò)程中的最適 PH的要求后，就要采取各種方法來(lái)控制。 想的發(fā)酵罐應(yīng)該具有那些特點(diǎn)？ （ 1）制造發(fā)酵罐的材料穩(wěn)定性好，對(duì)微生物無(wú)毒性 （ 2）密封性良好 （ 3）良好的傳質(zhì)傳熱和混合性能 （ 4）轉(zhuǎn)化 以及 工程 細(xì)胞系。 選擇題 1．人胚成纖維細(xì)胞約可以培養(yǎng)（ C ）代。 A 95% B 97% C 98% D 99% ( D )。 分批式操作將細(xì)胞和培養(yǎng)基一次性加入反應(yīng)器細(xì)胞工程 組織培養(yǎng)： 將組織或細(xì)胞從機(jī)體取出，在體外模擬機(jī)體體內(nèi)的生理?xiàng)l件進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存和生長(zhǎng)。 （ 3）當(dāng)控制微囊膜的孔徑后，可使產(chǎn)品濃縮在微囊中，從而有利于下游產(chǎn)品的純化。 2．單克隆抗體制備時(shí)對(duì)動(dòng)物的免疫方法分為 體。 A 淋巴細(xì)胞 B肝細(xì)胞 C脾細(xì)胞 D骨髓瘤細(xì)胞 3. 生物藥物檢驗(yàn)要求（ D ）。 多克隆抗體 病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì)，因此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物，故稱(chēng)多克隆抗體。用鼠源單抗的 CDR序列替換人 Ig 分子中 CDR序列，則可使人的 Ig 分子具有鼠源單抗的抗原結(jié)合特異性。 3．植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)物的生長(zhǎng)主要取決于 生長(zhǎng)素和 分裂素 的比例。 解釋 次級(jí)代謝作用 由特異蛋白質(zhì)調(diào)控產(chǎn)生的 除了核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白質(zhì)及糖 類(lèi)以外，具有如下特征的成分成為次級(jí)代謝產(chǎn)物：有明顯的分類(lèi)學(xué)區(qū)域界限；其合成需在一定的條件下才能發(fā)生；缺乏明確的生理功能；是生命的多余成分。 簡(jiǎn)答 1． 影響植物次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的主要因素有哪些？ 影響次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的因素主要有： （ 1）、生物條件：外植體、季節(jié)、休眠、分化等； （ 2）、物理?xiàng)l件：溫度、光（光照時(shí)間、光強(qiáng)、光質(zhì)）、通氣（氧氣）、酸度和滲透壓； （ 3）、化學(xué)條件：無(wú)機(jī)鹽、碳源、物質(zhì)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質(zhì)和前體等； （ 4）、工業(yè)培養(yǎng)條件：培養(yǎng)罐類(lèi)型、通氣、攪拌和培養(yǎng)方式。 （ 1）無(wú)機(jī)鹽 有大量元素和微量元素， 30毫克每升為界限，大量有氮、硫、磷、鉀、鎂、鈣、氯、鈉。 （ 3）植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 常見(jiàn)的植物激素有生長(zhǎng)素、分裂素、赤霉素、脫落酸、乙烯。 3．目前工業(yè)常的酶一般是以 微生物 為主要來(lái)源。 6．在固定化細(xì)胞中應(yīng)用最多，最有效的方法是 包埋法 。 10．固定化酶的偶聯(lián)率 小于 1 ，擴(kuò)散限制對(duì)酶活力有影響；偶聯(lián)率 大于1 ，有細(xì)胞分裂或從載體排除抑制劑等原因。 酶化學(xué)修飾 通過(guò)主鏈有切割、剪切和側(cè)鏈基團(tuán)有化學(xué)修飾對(duì)酶蛋白進(jìn)行分子改造，以改變其理化性質(zhì)和生物活性。 選擇 1．作為一個(gè)優(yōu)良的產(chǎn)酶菌種，下列 描述不正確的是？（ A ） A. 繁殖快、產(chǎn)酶高，最好是產(chǎn)生胞 ） A. 酶經(jīng)固定化后，酶活性中心的主要氨基酸與載體發(fā)生了部分結(jié)合 B. 酶經(jīng)固定化后，酶活力一般都升高 C. 酶經(jīng)固定化后，酶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化 D. 酶經(jīng)固定化后，酶與底物結(jié)合時(shí)存在空間位阻效應(yīng) 3．酶經(jīng)固定化后，其最適 pH值一般都（ D ）。 A. 物理吸附法 B. 離子結(jié)合法 C. 共價(jià)結(jié)合法 D. 交聯(lián)法 7．核酶是具有催化活性的（ C ）。 (4) 所需原料穩(wěn)定，來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉。 缺點(diǎn)：結(jié)合力弱，對(duì) pH、離子強(qiáng)度、溫度等因素敏感，酶易脫落。 主要優(yōu)點(diǎn)如下： ① 可多次使用 ② 反應(yīng)后，酶底物產(chǎn)物易分開(kāi)，產(chǎn)物中無(wú)殘留酶，易純化，產(chǎn)品質(zhì)量高。 4，為什么要對(duì)酶進(jìn)行化學(xué)修飾？ （ 1）提高生物活性； （ 2）增強(qiáng)在不良環(huán)境中的穩(wěn)定性； （ 3）針對(duì)異