血紅蛋白的提取和分離》-預覽頁
【正文】 2）分離方法： （ 3）分離過程： 瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等 。 （ 4）純度鑒定：通過聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定。 透析： 裝入透析袋并置于磷酸緩沖液中（ PH為）透析。 血漿 血細胞 紅細胞 血紅蛋白 2條 α 肽鏈 2條 β 肽鏈 亞鐵血紅素 返回 滌 紅 細 胞 閱讀思考：洗滌的目的是什么？ 洗滌過程： 血液 100mL 3g檸檬酸鈉 低速離心 2 min 紅細胞 血 漿 吸出血漿 紅細胞 5倍體積生理鹽水 攪拌 10min 重復洗滌 3次，直至上清液沒有黃色 采集得到雞血 初次離心后的結果 3次洗滌后的結果 返回 閱讀思考： 1. 釋放血紅蛋白過程中，在洗滌好的紅細胞加入了哪些物質？ 2. 為了加速釋放過程，采取了什么措施？ ① 目的分析： ②蒸餾水的作用是 ______________________________。 磁力攪拌器 返回 分離過程 紅細胞 混合液 高速離心 10min 離心管 濾紙 過濾 脂類物質 燒杯 (3)分離血紅蛋白溶液： ① 過程： 將攪拌好混合液轉移到離心管內，以2022r/min的速度離心 10 min。 ②底塞的制作： 打孔 → 挖出凹穴 → 安裝移液管頭部 →覆蓋尼龍網(wǎng)，再用 100目尼龍紗包好，插到玻璃管的 一端 。 ⑤安裝其他附屬結構。 ② 凝膠的前處理： 配制凝膠懸浮液：計算并稱取一定量的凝膠浸泡于蒸餾水或洗脫液中充分溶脹后，配成凝膠懸浮液。 裝填凝膠柱時不得有氣泡存在： 因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果 。 返回 ① 調節(jié)緩沖液面： 打開下端出口，使柱內緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊，關閉出口。 ⑤收集： 待紅色的蛋白質接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每 5ml收集一試管，連續(xù)收集 。 注意： 正確的加樣操作是： 不要觸及并破壞凝膠面。 2. 凝膠的預處理： 沸水浴法時間短，還能除去微生物和氣泡 3. 色譜柱的裝填： 裝填盡量緊密，降低顆粒間隙；無氣泡；洗脫液不能斷流。 三、實驗結果分析與評價 你是否完成了對血液樣品的處理？你能描述處理后的樣品發(fā)生了哪些變化嗎？ 你裝填的凝膠色譜柱是否有氣泡產生？你的色譜柱裝填得成功嗎？你是如何判斷的？ 由于凝膠是一種半透明的介質，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。 如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出； 如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關。 A相同 B相反 C相對 D相向 4. 哺乳動物和人的成熟的紅細胞中的（ ）與氧氣的運輸
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