血紅蛋白的提取和分離(2)-預(yù)覽頁
【正文】 血紅蛋白提取和分離的基本原理 分配色譜法 相對分子質(zhì)量的大小 多孔球體 通道 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 ② 當(dāng) 不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，相對分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程 ，移動速度 ，而相對分子質(zhì)量 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 移動，路程 ，移動速度 ，從而使相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以 。 (2)原理 在一定的 下 ， 多肽 、 核酸等生物大分子的可解離基團(tuán)會帶上 或 ， 在電場的作用下 ， 這些帶電分子會向著 的電極移動 。 帶電性質(zhì) 大小 形狀 遷移速度 各種分子的分離 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 [思維激活 1] 凝 膠色譜法和電泳法在實(shí)現(xiàn)分子分離的原理方面有何不同 ？ 提示 凝膠色譜法分離分子是依據(jù)分子質(zhì)量大小 ， 利用凝膠色譜柱使大分子優(yōu)先洗脫出來 ， 而小分子后分離出來 。 ② 原理：一些生物大分子具有可解離的基團(tuán) ， 在一定 pH下 ， 會帶上正電或負(fù)電 ， 在電場的作用下 ， 這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 【 鞏固 1】 凝 膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理依據(jù)是 ( )。 2． 樣品處理 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 采集血樣 ， ， 吸取血漿后加 洗滌 ，再低速短時(shí)間離心 ， 如此重復(fù)洗滌三次 ， 直至上清液中沒有黃色 。 使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開 ， 便于下一步對血紅蛋白的純化 。 (3)樣品的 。 洗滌次數(shù) 離心速度 離心時(shí)間 血漿蛋白 過高 過長 白細(xì)胞 洗脫液 用沸水浴加熱 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 (3)凝膠色譜柱的裝填 在裝填凝膠柱時(shí) ， 不得有 存在 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 1． 樣品的處理 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 ① 目的：去除雜蛋白 。 ② 將液體用濾紙過濾 ， 除去脂溶性沉淀層 ， 于分液漏斗中靜置片刻后 ， 分出下層的紅色透明液體 。 ③ 目的： ； b． 用于更換樣品的緩沖液 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 【 鞏固 2】 在 血紅蛋白的整個(gè)提取過程中 ， 不斷用磷酸緩沖液處理的目的是 ( )。 根據(jù)分子篩效應(yīng)可知 ， 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子通過的路程較短 ， 移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子通過的路程較長 ， 移動速度較慢 。 圖乙裝置表示通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過程 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 因此，樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出，從而使各種相對分子質(zhì)量不同的分子得以分離。 答案 凝 膠色譜法也稱為分配色譜法，它是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。此外，凝膠本身具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，相對分子質(zhì)量大的分子通過這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空隙時(shí)阻力大，而相對分子質(zhì)量小的分子通過時(shí)阻力小，因此不同相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離。 在生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)過程都是在精確的 pH下進(jìn)行的 ， 受到氫離子濃度的嚴(yán)格調(diào)控 。 答案 電 泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程 。 答案 血 紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步：樣品處理 、粗分離 、 純化和純度鑒定 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 課堂互動探究 教科書問題解答 活頁規(guī)范訓(xùn)練 單擊此處進(jìn)入 活頁規(guī)范訓(xùn)練
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