血清成分的生化分析-預(yù)覽頁
【正文】 雙縮脲試劑 酪蛋白 BaCl2溶液 離心機 燒杯 移液管 透析袋 三 、 原理 中性鹽類能破壞溶液中蛋白分子表面的雙電層和水膜 ， 從而使蛋白質(zhì)從溶液中凝聚沉淀析出 。 因此 ， 可根據(jù)所要分離的蛋白質(zhì) ， 選擇不同飽和度的硫酸銨溶液進行鹽析 。 將盛有待濃縮的大分子溶液的透析袋放入高濃度的吸水性強的蔗糖固體顆粒中 ， 袋內(nèi)溶液中的水被袋外的多聚物所吸收而有效地濃縮 。 目前已廣泛用于血清蛋白 ， 脂蛋白 ， 血紅蛋白 ， 糖蛋白和同工酶的分離及用在免疫電泳中 。 染色液： 300mL 含氨基黑 10B ， 甲醇 50mL， 冰醋酸 10mL，水 40mL〈 可重復(fù)使用 〉 。 電泳槽的準備 根據(jù)薄膜寬度剪裁合適的濾紙條 。 點樣 把膜條從緩沖液中取出 ， 夾在兩層粗濾紙中吸干多余的液體 ， 然后平鋪在玻璃板上（ 無光澤面朝上 ） 。 點樣后要在薄膜上形成具一定寬度 、 粗細均勻的直線 。 若電泳槽中同時安放幾張薄膜 ， 則薄膜間應(yīng)相隔幾mm） 。 染色 電泳完畢后 ， 將膜條取下并放在染色液中浸泡 5～ 10min。 實驗六 —— （三） 凝膠層析（練習(xí)實驗） 一 、 目的 掌握凝膠過濾層析的技術(shù)方法 二 、 凝膠柱層析原理 凝膠層析也稱凝膠過濾 ， 是一類利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠的層析技術(shù) 。 Sephandex ： 葡 聚 糖 凝 膠 。 根據(jù)需要選取適當(dāng)型號可分離高分子物質(zhì)或脫鹽等 。 洗脫 用生理鹽水洗脫液進行洗脫 。 實驗結(jié)果 例子 實際洗脫曲線 五、實驗結(jié)果 可通過凝膠過濾對樣品脫鹽 一、實驗原理 *鹽析分離所得之 γ 球蛋白，在進一步純化之前，先要將其中的硫酸銨除去。 二、操作方法 1．裝柱 *取層析柱 1根（ 20cm），垂直于固定架上，夾住流出口； *加 10ml磷酸鹽緩沖液（ mol/L， ）于柱中； *將溶脹好的 Sephadex G－ 25傾倒去水，加入磷酸鹽緩沖液（ ， ）并攪拌成懸浮液； *慢慢將凝膠裝入柱中，打開流出口； *繼續(xù)加入 SephadexG－ 25使自然沉降至 15cm高，關(guān)閉出口。
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