hxj血清清、球蛋白分離新-預覽頁
【正文】 2022年秋季學期 3 實驗?zāi)康? 1. 掌握鹽析法分離蛋白質(zhì)的原理和基本方法 2. 掌握凝膠層析法分離蛋白質(zhì)的原理和基本方法 3. 掌握離子交換層析法分離蛋白質(zhì)的原理和基本方法 4. 掌握醋酸纖維素薄膜電泳法的原理和基本方法 5. 了解柱層析技術(shù) 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 4 實驗原理 ?蛋白質(zhì)的 分離和純化 是研究蛋白質(zhì)化學及其生物學功能的重要手段。 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 5 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)與常用的分離純化方法 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) 常用的純化方法 分子質(zhì)量 透析、超濾 凝膠層析★ 離心 溶解度 調(diào)整 pH 調(diào)整離子強度★ 降低介電常數(shù) 電荷 電泳★ 等電聚焦 離子交換層析★ 特異結(jié)合部位 親和層析 其他性質(zhì) 吸附層析 液相層析 氣相層析 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 6 球 蛋 白 ?1 ?2 ? g 等電點 ~ 相對分子量（ 104） 20 30 9~15 ~30 含量（％） 57~67 2~5 4~9 ~12 12~20 血清蛋白的等電點、平均分子量及正常含量 清蛋白 A 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 7 1. 粗提（鹽析法） ?由于血清中各種蛋白質(zhì)分子的 顆粒大小、所帶電荷的多少 和 親水程度 不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣。 ? 凝膠層析法主要是根據(jù)混合物中各種物質(zhì) 分子大小的不同 而將其分離的技術(shù)。流洗平衡時亦應(yīng)如此。它們在 ，在電場中向正極移動。 生物化學與分子生物學實驗教學中心 2022年秋季學期 23 3. 染色和漂洗 電泳完畢后，關(guān)閉電源，將膜取出，直接浸于染色液中 5min
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