【正文】 2. 應(yīng)如何檢查 1977年2. 張寧芳: 中草藥通訊1977(1):385. Shigenobu Okuda : Chem Pharm Bull 13:槐花米系豆科植物，Sophora japonica的花蕾，自古作為止血藥。2． 掌握黃酮類成分的主要性質(zhì)及黃酮苷，甙元和糖部分的鑒定方法?；被字刑J丁的含量可高達(dá)20％，另含少量的皂苷，皂苷水解后，可得到樺皮醇（Betulin C30H50O2）及槐二醇（Sophoradiol，C30H50O2）。冷乙醇（1：300），難溶于乙酸乙 酯，丙酮，不溶于苯，氯仿，乙醚，及石油醚等溶劑。可溶于冰醋酸，吡啶，乙酸乙酯，丙酮等溶劑。 三．自槐花米中提取蘆?。?． 提取方法：方 法1 ：取槐花米40克（完整），置于100毫升燒杯中，用冷水快速清洗去泥沙等雜質(zhì)瀝干水，％硼砂水沸熔液400毫升,直火加熱微沸,即時側(cè)PH值, 當(dāng)PH數(shù)值改變成微酸性時,以石灰乳調(diào)至PH8,繼續(xù)加熱微沸30分鐘,隨時補(bǔ)充水份,同時保持PH8,靜置約5~10分鐘,傾出上清液,用尼龍布過濾, 重復(fù)提取一次,合并濾液,將濾液用鹽酸調(diào)至PH3左右,再加泥泊金,放置過夜,抽濾用水洗3~4次,空氣自然干燥得粗蘆丁.方法2：取槐花米20 克,置于500毫升圓底燒瓶中,加乙醇150毫升,加熱回流1小時,稍冷后抽濾,濾渣再加乙醇100毫升回流1小時,合并乙醇提取液,放冷,析出絮狀沉 ,濾液濃縮至50毫升,放置過夜,析出結(jié)晶,濾去母液繼續(xù)濃縮一半,用乙醚30~50毫升分次洗去脂溶性成分(油脂, 葉綠素等),再用丙酮10毫升洗滌一次,得粗蘆丁.2． 重結(jié)晶方法方法一：取粗蘆丁2克，加乙醇50～60毫升加熱溶解，呈熱抽濾，將濾液濃縮至20～30毫升，放置，析出結(jié)晶，母液再濃縮一半，又析出結(jié)晶。得精制蘆丁。思考題：蘆丁水解不完全時將產(chǎn)生什么結(jié)果？記錄：蘆丁的水解產(chǎn)物是什么？主要產(chǎn)物得率？溶點？四．蘆丁，？皮素，糖及？皮素衍生物的鑒定：1． 紙層析：新華一號層析濾紙樣品：自制蘆丁，？皮素對照品：蘆丁，？皮素展開劑：（1）正丁醇－醋酸－水（4：1：5上層或4：1：1）（2）25％醋酸水溶液（3）85％醋酸水溶液顯色： （1）可見光下觀察，再在紫外燈下觀察 （3）噴三氯化鋁試劑后再觀察2． 蘆丁和？皮素的聚酰胺薄層鑒定：樣品：同紙層析展開劑：乙醇－水（7：3）顯色：同紙層析3． 糖的檢出——紙層析法取上述濾出？皮素時保留的水解濾液200毫升，加Ba(OH)2細(xì)粉（）中和至PH7,濾除生成的BaSO4沉淀(可用滑石粉助濾),濾液濃縮至1毫升,供紙層析法點樣用.展開劑：正丁醇－醋酸－水（4：1：5上層或4：1：1）對照品：葡萄糖，鼠李糖水溶液顯色劑：苯氨鄰苯二甲酸試劑噴后，105℃烘10分鐘，顯棕色或棕紅色斑點。展開劑：氯仿－丙酮－醋酸（8：2：）顯色劑：三氯化鐵試劑思考題：（1） 蘆丁和？皮素用不同展開劑系統(tǒng)展開層將出現(xiàn)什么結(jié)果？為什么？（2） 蘆丁和？皮素聚酰胺薄層將出現(xiàn)什么結(jié)果？為什么？（3） 試比較？皮素紅外光譜圖和五酰基？皮素紅外光譜圖的差異。 利用紫外吸收光譜，測定黃酮化合物在加入各種電解質(zhì)或絡(luò)合劑后吸收峰的位移，根據(jù)位移的情況，以判斷該化合物烴基的額位置。依照上述方法制備的貯備液可放置6個月。 (三)．測定方法：１． 酮烴基位置的測定：　精密稱取黃酮樣品（？皮素），用無水甲醇溶解，在稀釋至100毫升。放置5分鐘后，在進(jìn)行測定。測定后，加入3滴鹽酸溶液（濃鹽酸：水＝1：1），再進(jìn)行測定。 3，4‘－OHMeONa 3 記錄：（1） 位移測定結(jié)果（2） 測定克分子吸收系數(shù)皂吸收峰前后20nm波長范圍內(nèi)，依次測定波長和吸收值，用方格紙作圖，精確的測出吸收峰的波長和吸收值，記錄測定結(jié)果。 (3).蘆丁甲醇溶液(4)甘草次酸乙醇液(5)原兒茶酸乙醇液(6)小檗堿乙醇液 取硅膠CMCNa薄層板1~2塊,用軟鉛筆按下圖劃線,構(gòu)成方格,將各樣品先滴加于相應(yīng)的格子中,再將各試劑分別自空白其5逐點點加試劑,. (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7)由結(jié)果判斷何種展開劑最適合分離薄荷油？例二． (4) 顯色劑3．硝酸銀－硅膠薄層（1） 硝酸銀硅膠懸浮漿的制備（％AgNO3制硅膠薄層）：用20克硅膠G和55毫升水中含5g硝酸銀（8％）的溶液調(diào)制成，阿波常法捕薄層板（4＊7cm，約30塊）。 3，牛龍牛兒醇（3） 展開劑：10％的硫酸乙醇液 本法使直接在薄層板上進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)，又稱原位反應(yīng)薄層。應(yīng)用這些特殊反應(yīng)只消耗未 知物極微量的樣品卻提供了有關(guān)結(jié)構(gòu)鑒別的信息，操作簡便。兩者Rf值不同的理由 是：？（2） 取原兒茶醛乙醇，在同一薄層上點加兩個相同的樣點，其中一分樣點的原點上，在點加酸酐－吡啶（3：1），待試劑揮散后，在重復(fù)點加試劑數(shù)次，用氯仿－丙酮（8：2）展層。在紅棕色斑點下，再噴以三氯化鐵試劑，又出現(xiàn)紫藍(lán)色斑點。并繪制出薄層層析圖譜。 4 化合物純度的檢測：（1） 化合物純度的檢查，可采用的方法測溶點，對純品而言，溶點距1～2℃之間（2） HPLC法顯示一個主降 紙層析的應(yīng)用鑒別天然產(chǎn)物中的糖類,氨基酸等極性化學(xué)成分常被采用.多緩沖溶液和堿性紙層析法的應(yīng)用(原理屬分配分離)一. 混合單糖的PC 鼠李糖混合溶液 葡萄糖Rf：（2） 樣品：阿膠酸水解液，豬阿膠酸水解液（3） 展開劑：正丁醇：甲醇：水（15：3：2）（4） 顯色劑：％茚三酮乙醇液記錄：貼PC濾紙條比較二種阿膠所含氨基酸是否一樣 大黃酸（Rhein）的氯仿溶液。［附］ PH緩沖液的配置：： NaCO3 NaHCO3 5毫升配成。： Na2HPO4 。易溶于水 乙醇 乙醚 丙酮 醋酸乙酯 ，難溶于苯 氯仿。（3） 洗脫劑：石油醚／醋酸乙酯（4：6）。 樣品＋試劑 樣品＋試劑當(dāng)正反應(yīng)時應(yīng)使銀－氨絡(luò)離子的溶液中的銀離子被原兒茶酸的鄰二酚烴基還原成金屬銀呈黑色斑點反應(yīng)。展開劑：記錄各流份的點滴反應(yīng)，薄層層析的結(jié)果（繪出圖譜），寫出所得單體的熔點數(shù)據(jù)。新穿心蓮內(nèi)酯（Neoandrographolide C26H40O8 穿心蓮丙素 穿心蓮新甙） 無色柱狀結(jié)晶，熔點168～169度。首用洗脫劑要保留柱頂）。然后每份點樣于硅膠CMCNa板上，并用對照品（穿心蓮內(nèi)酯，新穿心蓮內(nèi)酯）對照，展開顯色條 件：硅膠CMCNa板，氯仿／甲醇（10：1）展開，Kedde試劑（3，5～二硝基苯甲酸堿性試液）噴霧，加熱后顯紫紅色斑點，從TLC結(jié)果檢查樣品 究竟含有幾個穿心蓮二萜內(nèi)酯類化合物？記錄TLC圖譜結(jié)果。 層析柱 15只 量筒 玻棒 1只255～257度，能升華。大黃酚（Chrysophanol），金黃色六角形片狀結(jié)晶（丙酮結(jié)晶）或針狀結(jié)晶（乙醇）溶出？？？mp。大黃素－6－甲醚（Physion），橙黃色針晶。（2） 樣品：總蒽醌粗品約5mg,加少量丙酮恰溶解后，在取少量硅膠拌合均勻，在紅外線燈下紅干，上柱。（5） 壓力：N2 大黃酚 顯色：可見光下顯亮黃色斑點。217～218 度。247度，》》＋（CHCL3）， 碘化二甲酸粉防己甲素（漢肌松，）無色鱗片狀結(jié)晶，mp。（2） 粉防己乙素 ：＋275度（C其苦味酸鹽溴化二甲基粉防己乙素（漢松敏，C39H46O6N2Br2）無色針狀結(jié)晶相似，極性較粉防己甲素稍高，故在苯中的溶解度小于甲素，而在乙醇中的 溶解度大于甲素，借此可以相互分離。（3） 洗脫劑：氯仿／甲醇（9：1），（8：2），（7：3），（6：4）—————》甲醇。 粉防己乙素乙醇液（9） 記錄：TLC結(jié)果，附圖譜，檢出每組分樣品的純度。 mp。（2） ／醋酸乙酯（6：1）中，溶液加樣。（5） 各段分別置于適當(dāng)?shù)膶游鲋鶅?nèi)，以醋酸乙酯洗脫，分別濃縮。 大黃酚的分離丹參色素的分離：一．利用離心薄層層析法分離大黃酚，大黃素－6－甲醚大 黃酚 大黃素－6－甲醚二化合物極性相近，相互分離較為困難，有人曾采用磷酸鈣柱層析，以石油醚展來，下層黃色帶洗脫后以甲醇重結(jié)晶可得大黃酚，上層黃色帶洗脫 后以甲醇重結(jié)晶可得大黃素－6－甲醚。（2） 將制備好的轉(zhuǎn)子裝于LBC3型離子薄層層析儀上，裝樣前，薄層轉(zhuǎn)子先用洗脫劑預(yù)洗使洗脫劑達(dá)到飽和并除去硅膠中的雜質(zhì)。 可見光下顯黃色斑點紫外線下顯亮黃色斑點氨熏，顯紅色。操作步驟：（1） 硅膠CMCNa離心薄層板（1mm厚）、（2） 總丹參醌混合物20毫克溶于2毫升氯仿，用注射器進(jìn)樣，使在轉(zhuǎn)子內(nèi)源形成均勻窄帶圖。用延胡索乙素為主要藥物制成的藥物制劑有“元胡止痛片”等。再中國華南一帶的防己科 天仙藤（Fibraurea recisa Paerre）的根莖即為一種巴馬汀含量較多的植物。1．掌葉防己堿（巴馬汀，Palmatine）本品是季銨原小檗堿型生物堿，溶于水 乙醇，幾乎不溶于氯仿 乙醚 苯等溶劑。3．小檗堿（黃連素，Berberine）本 品是季銨原小檗堿型生物堿，其游離堿為黃色長針結(jié)晶， 1／2H2O，在100度干燥，失去結(jié)晶水而轉(zhuǎn)成棕黃色，小檗堿能緩緩溶于水（1：20），乙醇（1：100），較易溶于熱水，熱乙醇， 熱甲醇，微溶于丙酮，氯仿，苯，幾乎不溶于石油醚中，小檗堿與氯仿 丙酮 苯均能形成加合物。左旋四氫巴馬汀即為顱痛定（Rotundine）~142度6．各種原小檗堿型生物堿的紫外譜圖特征如下所示：