第十二章免疫檢測原理及方法-預覽頁
【正文】 跡法 (WesterbBlot) (3)斑點免疫結合試驗 (DotELISA) 3. 放射免疫測定法 原理是待測抗原和標記抗原與定量的相應抗體發(fā)生競爭性結合 。 第二節(jié) 免疫細胞的檢測 參與免疫應答的細胞有多種 ， 如負責體液免疫的 B細胞 ， 執(zhí)行細胞免疫的 T細胞和溝通體液免疫和細胞免疫的其他細胞等 。 從外周血分離出富含的單個核細胞制合成適當數量的細胞懸液 ， 分放在 3個小試管中 ，分別用抗 CD CD4和 CD8的單克隆抗體作為第一抗體進行結合 ， 再用 FITC標記的兔小鼠 IgG抗體作為第二抗體進行間接免疫熒光染色 。 溶血空斑試驗是體外檢測抗體形成細胞的一種方法 ，即將經紅細胞 (RBC)免疫過的家兔淋巴結或小鼠脾臟制成細胞懸液 ， 與一定量的 RBC結合 ， 于 37℃ 作用下 ， 免疫活性淋巴細胞釋放出溶血素 ， 在補體的參與下 ， 使抗體形成細胞周圍的 RBC溶解 ， 從而在每一個抗體形成細胞周圍形成肉眼可見的溶血空斑 。 這種轉化也可在體外的 T細胞的培養(yǎng)過程中加入適當的刺激原而出現 ， 并表現出形態(tài)上的變化 。 (2)51Cr釋放法：用鉻酸鈉 (Na51CrO4)標記的靶細胞與致敏淋巴細胞一起培養(yǎng) ， 靶細胞被 CTL殺滅后 ， 51Cr即釋放到培養(yǎng)液中 ， 測定釋放到培養(yǎng)液中 51Cr的脈沖數 (cpm)即反映出 CTL殺靶細胞的程度 。 ,包括免疫斑點法 、 ELISA、 RIA和免疫印跡法等 ， 優(yōu)點是特異性和重復性較好 ， 快速
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