【正文】 雜志， 202020（ 10）：5356． [5] 汪珍，馮健，王曉華等．三葉青提取物對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞系 RKO 細(xì)胞凋亡的影響 [Ｊ ]．浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào) ， 2020， 32（ 3）： 321324． [6]楊學(xué)樓，羅經(jīng)，孫松柏，等．三葉青抗病毒作用的研究［ J］．湖北中醫(yī)雜志， 1989 ( 4) : 40. [7]鐘曉明，毛慶秋，黃真，等．三葉青提取物對(duì)燙傷大鼠腸道局部和全身免疫功能的影響 ［ J］．中藥材，2020， 29( 9) : 953. [8]]劉東，楊峻山 .中國特有植物三葉青化學(xué)成分的研究 .中國中藥雜志， 1999， 24(10):611 612. [9] 魏克民，丁剛強(qiáng) .中草藥三葉青抗腫瘤作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用 .醫(yī)學(xué)研究雜志， (11):41 一 43. [10]馮正權(quán)，倪克鋒，何煜，等．三葉青黃酮誘導(dǎo) SGC 7901 胃癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究 ［ J］．中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)， 2020， 11 ( 6): 669. [11]毛一亮，張佳佳，丁萍月，等．正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化三葉 青中總黃酮的提取工藝［ J］．西北 藥學(xué)雜志， 2020，12(28) : 369. [12] 倪克鋒 , 金波 , 蔣福升 , 等 . 三葉青黃酮對(duì) H22 荷瘤小鼠 TIMP 2mRNA 表達(dá)的影響 [J].中國中醫(yī)藥科技 , 2020,163 :195196. [13] 徐彩菊 , 白寧寧 , 孟佳 , 等 . 三葉青提取物體內(nèi)抑瘤作用及其機(jī)理研究 [J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志 ,2020,19 2 :278280. [14] CaiJu Xu, GangQing Ding, JianYun Fu, tory of ethyl acetate fraction of extracts fr om tetrastigma hemsleyanum diels et1gilg on immune function of I CR mice [J] .1Biomed Environ Sci,2020,21:3253311. [15] McHugh RS, Shevach EM1The role of suppress or Tcells in regulati on of immune res ponses[J] .1Allergy Clin mmunol, 2020, 110(5) : 693 7021. [16] Ding Gangqiang, Yu Ming, Gong Wei wei, et al1Nutrition relateddisease and death in Zhejiang Pr ovince[J]1Asia Pacific J of Clin Nutr, 2020,13(12) :162 1651. 二、市場需求、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)、生態(tài)效益分析 （一）市場需求分析 三葉青是一種用途廣泛的中草藥，含黃酮類如槲皮素及三萜類化合物、蒲公英萜醇等重要有效化學(xué)成分，在臨床上已廣泛用于抗癌及抗艾滋病毒、治療血液病與心腦血管疾病、肝炎、腦膜炎、急性支氣管炎、肺炎、腸炎及咽喉炎、小兒外感高熱等疾病。三葉青是多年生常綠植物，一次種植科連續(xù)收獲，隨著栽培技術(shù)的提高，今后單位面積產(chǎn)量還可逐年遞增。下圖是試驗(yàn)區(qū)三葉青栽培模式： 圖 1 三葉青高效栽培方式研究 圖 2 三葉青套種技術(shù)研究 圖 3 經(jīng)過篩選的三葉青栽培形成的發(fā)達(dá)的塊根 社會(huì)效益分析 (1)本項(xiàng)目的實(shí)施，能使我市三葉表生產(chǎn)率先實(shí)現(xiàn)集約化、標(biāo)準(zhǔn)化，從而改變了目前三葉青種植業(yè)品質(zhì)低下、技術(shù)含量低的傳統(tǒng)模式，促進(jìn)我市乃至浙江省中藥材產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。從耕地資源的角度看，耕地是一種極為寶貴的、不可再生的資源，這對(duì)于緩和及解決日益嚴(yán)重的耕地問題，有著深遠(yuǎn)的意義。項(xiàng)目采用野生種子，篩選原原種，采集種子和外植體進(jìn)行人工仿野生條件下的栽培。培養(yǎng)小苗的過程中，愈傷分裂速度加快，幼苗根系發(fā)達(dá)，分葉清爽，整個(gè)過程時(shí)間縮短 7 個(gè)月。 （三）壯苗培育、生態(tài)復(fù)合間混栽培安全高效生產(chǎn)技術(shù)。春秋 通過保護(hù)地栽培法延長三葉青生長最適溫度的時(shí)間。 篩選出適合三葉青組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)小苗的過程中，采用愈傷組織培養(yǎng)及 最佳培養(yǎng)基配方的技術(shù)，整個(gè)過程時(shí)間縮短了 6 個(gè)月，組培苗移栽成活率達(dá) 90%以上。 （二）應(yīng)用和產(chǎn)業(yè) 化前景 目前三葉青高效栽培技術(shù)已經(jīng)成為三葉青產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的最大障礙，通過本項(xiàng)目的研究，獲取三葉青優(yōu)質(zhì)種質(zhì)利用技術(shù)、三葉青快速繁殖技術(shù)、三葉青容器栽培技術(shù)及三葉青套種生態(tài)栽培技術(shù)，使三葉青產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)成為可能，從而滿足市場對(duì)三葉青的需求，同時(shí)可減少對(duì)其野生資源和環(huán)境的破壞，并且可獲得可觀的經(jīng)濟(jì)效益，因而具有廣泛的應(yīng)用前景。通過觀察和試驗(yàn)，初步明確了三葉青能在山地不同海拔高度馴化栽培，而且隨著海拔的提高，夏季涼爽而春季回暖遲，有利于三葉青種塊根發(fā)育，田間生 育期明顯延長，為爭取培育大塊根創(chuàng)造了有利條件；也明確了三葉青培育需要較大的蔭蔽度，需在蔭棚內(nèi)栽培或與喬木木混 作，適合套種和間混種。 生物倒置顯微鏡 XD101 一臺(tái)。 電子精密天平 BS110S 二臺(tái)。 調(diào)溫調(diào)濕箱 DR302 二臺(tái)。公司建有 500 平方米的組培工廠一座，按年生產(chǎn)能力 80 萬瓶設(shè)計(jì)，目前年生產(chǎn)組培苗 20 萬瓶左右。 本項(xiàng)目以三葉青種質(zhì)篩選、快速繁殖、生態(tài)栽培及活性成分分析為主線，按以下技術(shù)路線進(jìn)行研究。 六、計(jì)劃進(jìn)度安排 本項(xiàng)目按照生產(chǎn)要求設(shè)計(jì)生產(chǎn)工藝，實(shí)行規(guī)范化操作，嚴(yán)格，按照科學(xué)選種、科學(xué)培育、科學(xué)用藥、科學(xué)管理等工藝技術(shù)方案，確保項(xiàng)目提供的三葉青品種好、質(zhì)量高、 效益三葉青種質(zhì)收集 種質(zhì)篩選并鑒定 三葉青快速育苗技術(shù)研究 三葉青高效復(fù)種技術(shù)研究 三葉青生態(tài)栽培模式 三葉青安全高效栽培體系與示范 總結(jié)及推廣應(yīng)用 三葉青活性成分分析與對(duì)比 好。 采集種子或外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)，篩選用 2— 3 個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行。 — 進(jìn)行脫離凈化 條件下的自然光煉苗。 開展三葉青培養(yǎng)土配比、適應(yīng)的有機(jī)肥料和病蟲害防治的研究。 測土配方施肥。 項(xiàng)目驗(yàn)收，課題總結(jié)。 近年 來公司一直致力于 藥賞兼用植物資源 及其系列產(chǎn)品的研制與開發(fā)工作，并應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)對(duì) 三葉青、白背三七等植物 進(jìn)行馴化和培植 ，逐步 形成產(chǎn)業(yè)化規(guī)模。擁有 實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室 95 個(gè)，實(shí)訓(xùn)中心 7個(gè)，校內(nèi)生產(chǎn)性實(shí)訓(xùn)基地、校外實(shí)訓(xùn)基地 100 多個(gè)，教學(xué)儀器設(shè)備 2870 多萬元 ；實(shí)驗(yàn)室擁有完成本項(xiàng)目研究所需的大型儀器，如 高效液相色譜 儀 、 氣 相色譜 儀 、原子吸收分光光度 計(jì)、熒光分光光度計(jì) 、冷凍高速離心機(jī)等 一批先進(jìn) 檢測設(shè)備 設(shè)施。擁有系列先進(jìn)的儀器設(shè)備，如傅立葉變換紅外光譜儀、液 質(zhì)聯(lián)用儀、 400 兆核磁共振儀、高效液相色譜儀、氣相色譜儀、旋光光度儀、紫外分光光度計(jì)、數(shù)字式熔點(diǎn)儀等；擁有較完備的用于中藥分離制備和衍生化研究的各種儀器材料，并擁有了各型常規(guī)制備色譜、中壓制備色譜、各型葡聚糖凝膠色譜（ DEAE、 Sephdex）、反相制備色譜（ RP RP18），高效液相色譜、逆流色譜和組合快速制備色譜；制劑實(shí)驗(yàn)室擁有的儀器設(shè)備如智能溶出試驗(yàn)儀、片 劑硬度計(jì)、粉碎機(jī)、片劑脆碎檢查儀、濕法混合制粒機(jī)、微型顆粒機(jī)、單沖壓片機(jī)、無級(jí)變速包衣機(jī)等，藥理實(shí)驗(yàn)室擁有的儀器設(shè)備如熒光 酶標(biāo)儀、 Uv1601 分光光度計(jì)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)、 CO2培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)等。從事中藥化學(xué)研究與生物制 藥工作。 項(xiàng)目主要參加人員之二 農(nóng)藝師，從事作物栽培科研工作三十余年，先后主持和參加了《全年三熟高產(chǎn)綜合配套技術(shù)研究》、《黑麥草引種及推廣》等項(xiàng)目，獲省、市（地）科研成果、推廣成果、 星火獎(jiǎng)等 3項(xiàng)，在省級(jí)以上專業(yè)刊物發(fā)表論文多篇，近年來，開展中藥材 —— 三葉青的引種、試驗(yàn)及推廣工作 。 項(xiàng)目負(fù)責(zé)人簽字： 申報(bào) 單位（蓋印） 2020 年 7 月 13日