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血管緊張素ⅰ放射免疫分析方法(固相抗體法)的建立-全文預(yù)覽

2024-11-17 22:17 上一頁面

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【正文】     標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品、質(zhì)控血清)100?l和標(biāo)記物100?l加于包被管中,混勻,然后放2―8℃靜置過夜(15―24h),棄溶液,加500?l洗滌液清洗2―3次,測各管放射性計數(shù)?! ?,時間對抗體包被的影響  用封閉液將兔抗(一抗)稀釋成不同滴度(1:2萬,1:4萬, 1:8萬,1:9萬,1:12萬,1:14萬),分別在不同溫度和時間下包被,實驗中抗體加入體積均為250?l,各管均加入100?l 125i―ai,將不同條件下制備的包被管進(jìn)行放射免疫結(jié)合分析,并對結(jié)果進(jìn)行比較。待包被第二層(兔二抗)用。其他試劑均為分析純。結(jié)果表明在2―8℃下過夜包被,抗體滴度在1:9萬 時,制備的包被管用于血管緊張素ⅰ放射免疫分析,結(jié)合達(dá)到最大;不同滴度下包被,包被溫度和時間對制備的包被管的影響不同;不同的反應(yīng)時間以及125i―ai和標(biāo)準(zhǔn)品加樣量的不同也會對包被管的結(jié)合產(chǎn)生影響。結(jié)果:本項工作所建立的分析方法測量范圍為1007800pg/ml, pg/ml。方法:通過對抗體包被步驟、抗體稀釋濃度、反應(yīng)時間、反應(yīng)體積等條件進(jìn)行選擇,建立新的分析方法,并進(jìn)行方法學(xué)鑒定?!  娟P(guān)鍵詞】血管緊張素ⅰ 固相抗體法 放射免疫分析  1引言  采用固相抗體包被聚苯乙烯試管,并對抗體包被條件進(jìn)行了研究,建立了血管緊張素ⅰ放射免疫分析法。對照藥盒由原子高科股份有限公司生產(chǎn)(國藥準(zhǔn)字:)?;旌暇鶆蚝?50?l /管包被,然后放2―8℃過夜,棄去包被管中第一層包被液,各管用500?l洗滌液( mol/l,)清洗1次?! 。ㄒ豢梗┌粚嶒灐 ⑼每褂梅忾]液配制成1:2萬,1:4萬,1:6萬,1:8萬,1:9萬,1:12萬,1:14萬,1:16萬不同的滴度,分別加250?l于已經(jīng)包有兔二抗的包被管中,每個滴度做雙復(fù)
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