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20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五章-酶與細(xì)胞的固定化不考-全文預(yù)覽

2024-11-16 00:50 上一頁面

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【正文】 頁。ng)是由于聚合時(shí)一些線性纖維被堆積成為一股股的纖維束,因而纖維束之間的距離變寬。 在單體丙烯酰胺濃度不變時(shí),交聯(lián)劑用量以5%為最好。產(chǎn)生的聚合物凝膠便是固定化酶,它可通過機(jī)械方法分散成一定大小的粒子以供應(yīng)用。,第十三頁,共三十二頁。,第十二頁,共三十二頁。,缺點(diǎn)(quēdiǎn) :,其一,在高濃度的電介質(zhì)(K+、Na+)等溶液中,固定化顆粒會(huì)變得不穩(wěn)定; 其二,Ca+等多價(jià)離子在磷酸緩沖液中會(huì)沉淀,固定化顆粒的機(jī)械強(qiáng)度將降低,最后重新溶解。uy,常用的格子型包埋法載體有:海藻酸鹽、K—角叉菜、瓊脂(qi243。,缺點(diǎn):包埋法對(duì)底物分子和產(chǎn)物分于的大小有所限制。酶被包埋后不再擴(kuò)散到周圍介質(zhì)中去而底物和產(chǎn)物卻能自由擴(kuò)散。由這些方法制得的兩膜每克膠原可含有5—50 mg酶。,一般膠原蛋白載體預(yù)先制成膜狀(膠原膜),膠原膜溶脹、然后浸入酶溶液,酶滲入(sh232。缺點(diǎn)是當(dāng)離子強(qiáng)度增加或介質(zhì)的pH、溫度變化時(shí),這種結(jié)合發(fā)生分解。,目前最常用的吸附劑是離子交換劑。 guī)能吸附酸性磷酸酯酶、磷酸葡萄糖變位酶等。,第六頁,共三十二頁。,蛋白質(zhì)與載體之間的結(jié)合力相當(dāng)弱。,第五頁,共三十二頁。因此在制備固定化酶時(shí)必須嚴(yán)格操作條件(ti225。,應(yīng)用(y236。 (2) 抗生素生產(chǎn),用固定化細(xì)胞生產(chǎn)桿菌素、四環(huán)素、頭孢菌素(t243。bāo),定義:固定化酶或細(xì)胞是被限制或固定在某一局部的空間或特定的固體載體(z224。通過適當(dāng)方法制成的不溶于水的酶都能滿足這一定義。ngōng)合成酶,使用有機(jī)合成(yǒujī h233。n suǒ),價(jià)格昂貴 2.難以重復(fù)使用 3.穩(wěn)定性差,第一頁,共三十二頁。第五章 酶與細(xì)胞(x236。)酶使用中的局限性:,1.提取純化繁瑣(f225。)游離酶缺點(diǎn)的方法:,1. 人工(r233。,2. 酶的改性、修飾,凡限制在一定的空間范圍內(nèi)并能連續(xù)反復(fù)地使用的酶都稱為固定化酶。bāo)的固定化方法,一. 固定化酶與細(xì)胞(x236。,(1) 氨基酸生產(chǎn),利用固定化細(xì)胞生產(chǎn)L天冬氨酸、L谷氨酸、L異亮氨酸、L賴氨酸、L色氨酸、L精氨酸。 (3) 利用固定化細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體、生長(zhǎng)因子等、活性蛋白質(zhì)藥物、還可生產(chǎn)維生素B、維生素C中間體、山梨糖、氫化可的松等維生素和甾體激素系物質(zhì)。,二 固定化方法(fāngfǎ),酶的催化活性主要依賴于它的特殊的高級(jí)結(jié)構(gòu)——活性中心。,酶的固定化方法(fāngfǎ):,吸附法、包埋法、交聯(lián)法、化學(xué)共價(jià)法以及酶的逆膠束包囊法。nlǐ):將酶液或細(xì)胞懸浮液吸附結(jié)合到吸附劑表面。,可分為物理吸附法和離子交換吸附法。r yǎng hu224。糖苷水解酶在纖維素上有較強(qiáng)的吸附,這可能是由于纖維素的多糖結(jié)構(gòu)與這些水解酶的底物(糖類物質(zhì))結(jié)構(gòu)有些相似的緣故。,離子交換劑對(duì)酶的吸附主要靠靜電吸引力。,第七頁,共三十二頁。也可以通過含有酶的膠原分散液進(jìn)行電沉積制得。i)包埋法。,第九頁,共三十二頁。ng)小時(shí),則擴(kuò)散阻力小。,海藻(hǎi zǎ
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