植物花藥和花粉培養(yǎng)-全文預(yù)覽
【正文】 種植在附加一定濃度和秋水仙素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，轉(zhuǎn)入無(wú)秋水仙素的相同培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)誘導(dǎo)胚狀體。由于單倍體愈傷組織在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)有一定頻率的核內(nèi)有絲分裂，從而形成二倍體細(xì)胞，分化出純合的二倍體植株。 （ 2）細(xì)胞形態(tài)學(xué)鑒定法 葉片保衛(wèi)細(xì)胞大小、單位面積上的氣孔數(shù)及保衛(wèi)細(xì)胞中葉綠體的大小和數(shù)目與倍性具有高度的相關(guān)性。 （七）花藥壁因素 花藥組織的存在對(duì)小孢子的胚性分裂具有明顯的促進(jìn)作用。玉米中蔗糖效果最好；而麥類(lèi)作物中，麥芽糖似乎為最好的碳源。在此基礎(chǔ)上發(fā)展出一些其它的培養(yǎng)基。 例子 :如煙草， 32℃ 高溫；小麥， 33℃ 高溫預(yù)處理顯著地提高了小孢子胚胎發(fā)生能力（ Touraev， 1996） 化學(xué)物質(zhì)處理 ? 包括高糖、甘露醇、秋水仙素、乙烯利等進(jìn)行處理。不同的處理溫度需要不同的時(shí)間。 高低溫處理 低溫 預(yù)處 理 ：指在接種之前將材料用 0℃ 以上低溫處理一段時(shí)間后再接種。 形成雙核后，在合適的條件，主要由營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞分裂產(chǎn)生胚狀體。但物種間存在差異。同一物種中的不同基因型對(duì)小孢子離體誘導(dǎo)反應(yīng)差異較大。 機(jī)理 核基因起關(guān)鍵作用，導(dǎo)致質(zhì)體 DNA缺失，產(chǎn)生白苗。 微室培養(yǎng) 利用小的蓋玻片和凹穴載玻片形成微室進(jìn)行花粉培養(yǎng) 條件培養(yǎng)基培養(yǎng) 利用培養(yǎng)過(guò)花藥的液體培養(yǎng)基或含失活花藥提取物的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 液體培養(yǎng) 花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，需震蕩，以利通氣。 二、花粉培養(yǎng) (一 )花粉的分離與純化 自然散落法 (漂浮培養(yǎng)散落小孢子收集法 ) 將花藥接種在預(yù)處理液或液體培養(yǎng)基上，待花粉自動(dòng)散落后，收集培養(yǎng)。 四、花粉植株形態(tài)發(fā)生方式 胚狀體發(fā)育途徑 部分花藥通過(guò)胚狀體途徑形成小植株 煙草花藥培養(yǎng) 通過(guò)胚狀體途徑再生形成小植株 煙草花藥培養(yǎng) 胚狀體發(fā)育途徑 a) 球形胚 d) 魚(yú)雷形胚 蕓苔屬小孢子培養(yǎng) 愈傷組織發(fā)育途徑 部分花藥產(chǎn)生愈傷組織 接種在平板上的水稻花藥 水稻花藥培養(yǎng) 愈傷組織轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基 愈傷組織分化形成再生植株 水稻花藥培養(yǎng) 花藥和花粉培養(yǎng)方法 一、花藥培養(yǎng) 取材 鏡檢，根據(jù)花粉的發(fā)育時(shí)期，選取大小適宜的花蕾。也稱(chēng)小花粉（ S花粉）或不染色花粉（ NS花粉） 雄核發(fā)育與饑餓處理 饑餓處理改變了小孢子的配子體發(fā)育方向，啟動(dòng)雄核發(fā)育。還可用于基因的劑量效應(yīng)分析。 （ 3）誘變育種中的作用 物種進(jìn)化研究 可探索親本染色體組的構(gòu)成。 花藥或花粉培養(yǎng)的作用： 供體植株小孢子（ n） 花培 花粉植株（ n） 雄核發(fā)育 自然加倍 人工加倍 純合植株 DH（ 2n） 一年內(nèi)獲得純系 作物育種 （ 1） 縮短育種周期： 常規(guī)育種需 46年獲得純系，而小 孢子培養(yǎng)僅需一年。 ? 兩者的異同點(diǎn) – 培養(yǎng)目的相同，均獲得小孢子植株。十字花科、麥類(lèi)、水稻、玉米等。許多作物小孢子培養(yǎng)已經(jīng)成功。該發(fā)育途
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