色譜技術(shù)及相關設備知識培訓課件-全文預覽
【正文】 中傳質(zhì)和擴散行為決定的，即與色譜過程的動力學性質(zhì)有關 。2 根據(jù)色譜峰的保留值，可以進行定性分析。保留體積與保留時間t的關系如下： VR = tR即峰高一半處對應的峰寬，如圖 4－ 1中 GH間的距離．它與標準偏差 σ的關系是： W1/2 = （ 3） . 基線寬度 W 即色譜峰兩側(cè)拐點上的切線在基線上的截距，如圖 4－ 1中 IJ的距離．它與標準偏差 σ的關系是： W = 4σ 保留值 － 定性1 死時間 t0死時間 (dead time)不保留組分的保留時間 不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進入色譜柱時，從進樣到出現(xiàn)峰極大值所需的時間稱為死時間，如圖 4－ 1中 O′A′ 。 （ 2） . 1 色譜法的發(fā)展2 色譜法的分類3 色譜法流出曲線及相關術(shù)語4 色譜法的原理內(nèi)容提要色譜流出曲線及有關術(shù)語圖 41基線鋒高 ht 0 如果進樣量很小，濃度很低，在吸附等溫線的線性范圍內(nèi)，色譜峰如果對稱，可用 Gauss正態(tài)分布函數(shù)表示： 式中： C— 不同時間 t時某物質(zhì)的濃度， C0— 進樣濃度， tr— 保留時間， σ — 標準偏差。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子，按照質(zhì)量作用定律，這些離子將與結(jié)合在固定相上的反離子進行交換。1 色譜法的發(fā)展2 色譜法的分類3 色譜法流出曲線及相關術(shù)語4 色譜法的原理內(nèi)容提要? 色譜法的分類1 根據(jù)流動相的物態(tài)可分為氣相色譜 (GC)液相色譜 (LC)超臨界流體色譜(SFC){2 根據(jù)固定相的外形分柱色譜平板色譜{平 板 色 譜吸附色譜： 利用吸附劑對不同組分的吸附性能的差別而進行分離， 常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。1960年代，為了分離蛋白質(zhì)、 核酸 等不易汽化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1952年馬丁和 詹姆斯 提出用氣體作為流動相進行色譜分離的想法，他們用硅藻土吸附的硅酮油作為固定相，用氮氣作為流動相分離了若干種小分子量揮發(fā)性有機酸。隨著電子技術(shù)和計算機技術(shù)的發(fā)展 氣相色譜儀 器也在不斷發(fā)展完善中，到現(xiàn)在最先進的氣相色譜儀已實現(xiàn)了全自動化和計算機控制，并可通過網(wǎng)絡實現(xiàn)遠程診斷和控制。1941年， Martin和 Synge采用水分飽和的 硅膠為固定相，以含有乙醇的氯仿為流動相分離乙?；?氨基酸 ，他們在這一工作的論文中預言了用氣體代替液體作為流動相來分離各類化合物的可能性。由 Tswett的開創(chuàng)性工作，因此人們尊稱他為 色譜學之父 ，而以他的名字命名的Tswett獎也成為了色譜界的最高榮譽獎。色譜法1 色譜法的發(fā)展2 色譜法的分類3 色譜法流出曲線及相關術(shù)語4 色譜法的原理內(nèi)容提要色譜法始于二十世紀初，經(jīng)歷了整整一個世紀的發(fā)展到今天已經(jīng)成為最重要的分離分析科學，廣泛地應用于許多領域，如石油化工、有機合成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護，乃至空間探索等。是利用混合物不同組分在 固定相固定相 和 流動相流動相 中分配系數(shù) (或吸附系數(shù)、滲透性等 )的差異，使不同組分在作相對運動的兩相中進行反復分配，實現(xiàn)分離的分析方法。三年后，他將這種方法命名為色譜法（ Chromatography），很顯然色譜法 （ Chromatography）這個詞是由希臘語中 ”色“的寫法（ chroma）和 ”書寫 “(graphein)這兩個詞根組成的，派生詞有 chromatograph（色譜儀），chromatogram（色譜圖）， chromatographer（色譜工作者）等。 分配色譜 是由著名的英國科學家 Martin和 Synge創(chuàng)立的，他們因此而獲得 1952年的諾貝爾化學獎。七十年代發(fā)明了石英毛細管柱和固定液的交聯(lián)技術(shù)。氣相色譜和色譜理論的出現(xiàn) 高效液相色譜 1971年科克蘭等人出版了 《 液相色譜的現(xiàn)代實踐 》 一書，標志著 高效液相色譜法 （ HPLC）正式建立。3 根據(jù)分離機理可分為:離子交換色譜 離子交換色譜中的 固定相 是一些帶電荷的基團，這些帶電基團通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結(jié)合。 當分子進入色譜柱后，它們中的不同組分按其大小進入相應的孔徑內(nèi)，大小大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內(nèi)部，在色譜過程中不被保留，最早被流動相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保留時間較短；大小小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孔徑，在柱子中滯留時間較長，表現(xiàn)為保留時間較長；其余分子則按分子大小依次被洗脫。標準偏差 σ 即 ，如圖 4－ 1中 EF距離的一半。F0 5．保留體積 VR 指從進樣開始到被測組份在柱后出現(xiàn)濃度極大點時所通過的流動相體積。色譜流出曲線上的信息1 根據(jù)色譜峰的個數(shù)，可判斷樣品所含的最少組份數(shù)。 但是兩峰間雖有一定距離，如果每個峰都很寬，以致彼此重疊，還是不能分開。這種分離過程經(jīng)常用樣品分子在兩相間的分配來描述，而描述這種分配的參數(shù)稱為分配系數(shù)見它是指在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動相之間分配達平衡時的濃度之比值，即 167。選擇適宜的固定相可改善分離效果影響 K 的因素 固定相、溫度2 分配比 (容量因子 )k 分配比又稱容量因子，它是指在一定溫度和壓力下，組分在兩相間分配達平衡時，分配在固定相和流動相中的質(zhì)量比。K與 k都是衡量色譜柱對組分保留能力的參數(shù)，數(shù)值越大，該組分的保留時間越長。它是衡量色譜柱對被分離組分保留能力的重要參數(shù)。 0Rs若用質(zhì)量分數(shù)表示，即 對組分和流動相通過長度為 L的色譜柱，其所需時間分別為mmmmm0可得： 000004. 分配系數(shù) K與分配比 k的關系 其中 β 稱為相比率，它是反映各種色譜柱型特點的又一個參數(shù)。 兩組分的 K或 k值相差越大，則分離得越好。這一小段柱長稱為理論塔板高度 H。 為簡單起見，設色譜往由 5塊塔板（ n＝ 5， n為柱子的塔板數(shù)）組成，并以 r表示塔板編號， r=1， 2… ，
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1