《遺傳工程動(dòng)物》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 理是四倍體胚胎具有明顯的胚外組織限制性分布，基本不參與胎兒及胚外中胚層組織的發(fā)育 。近年來(lái)發(fā)展的 四倍體補(bǔ)償技術(shù) 可以繞過(guò)嵌合體小鼠階段，直接獲得 ES細(xì)胞 遺傳背景的小鼠。出生的小鼠為 ES細(xì)胞來(lái)源品系和囊胚供體品系之間的嵌合體。 pol： 編碼整合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶。利用這個(gè)特點(diǎn)，可將逆轉(zhuǎn)錄病毒改造成外源基因表達(dá)載體，用于 基因治療 研究和 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備 。 ?由于是隨機(jī)整合 ， 可能破壞重要的內(nèi)源性 DNA序列或激活細(xì)胞的致癌基因 。與雌鼠交配，產(chǎn)生受體（假孕）雌鼠，不會(huì)受孕，但可使雌鼠黃體活化，維持妊娠狀態(tài)。將顯微注射后的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)，移植到 假孕動(dòng)物 的輸卵管內(nèi)。 ?1995年 RamirezSolis等首先制作成功染色體重排小鼠。 7 遺傳工程動(dòng)物的分類 ? 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（ Transgenic animals)： 加入一個(gè)外源基因 ? 基因敲除動(dòng)物 (Gene knockout animals)： 使一個(gè)基因功能失活 ? 基因敲入動(dòng)物 (Gene knockin animals)： 加入或替換一個(gè)基因 ? 染色體工程動(dòng)物 (Chromosome engineered animals)： 使染色體片斷缺失、易位、倒置、 重復(fù) 8 轉(zhuǎn)基因和基因敲除 疾病相關(guān)或功能未知基因 功能獲得 “加法 ” “ 減法 ” 功能缺失 ? 9 ? 1980年， Gordon等把 HSVtk的基因顯微注射到小鼠受精卵的原核中，獲得了兩只轉(zhuǎn)基因小鼠，創(chuàng)建了顯微注射轉(zhuǎn)基因方法。 6 遺傳工程動(dòng)物的定義 遺傳工程動(dòng)物（ Geically engineered Animals）是指將外源基因或經(jīng)改造的自身基因片段導(dǎo)入動(dòng)物 受精卵或早期胚胎 ，使之 穩(wěn)定整合 于宿主的染色體基因組內(nèi)，并能遺傳給后代的一類動(dòng)物。 4 ? 基因型： 生物所具有的基因成分，叫基因型（ Genotype) ? 表現(xiàn)型： 生物所顯示的遺傳性狀，叫表現(xiàn)型（ Phenotype) ? 純合子： 一對(duì)等位基因彼此相同，叫純合子（ Homozygote) ? 雜合子： 一對(duì)等位基因彼此不同，叫雜合子（ Heterozygote) ? 半合子： 一條染色體上增加了一個(gè)外源基因，叫半合子（ Semizygote) 5 外源基因構(gòu)件（ construct） :將外源基因片段通過(guò)分子生物學(xué)的方法組合起來(lái)，以達(dá)到設(shè)計(jì)的目的。1 第十三章 遺傳工程動(dòng)物 2 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)的發(fā)展概況 第三節(jié) 遺傳工程動(dòng)物的制備方法 第四節(jié) 遺傳工程動(dòng)物的建系和保種 第五節(jié) 遺傳工程動(dòng)物的應(yīng)用 3 第一節(jié) 概 述 概念 基因（ Gene）： 位于染色體上具有遺傳效應(yīng)的 DNA片斷。 外源基因（ Foreign gene or Transgene）： 外來(lái)的、非自身基因成分。它起著將外源基因構(gòu)件帶到特定位置的作用。 狹義的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 一般僅指用 顯微注射法和逆轉(zhuǎn)錄病毒法 制備的，即 ? 加入 ?一個(gè)外源基因的動(dòng)物。 ?1987年英國(guó) Roslin研究所研制成功 ?抗胰蛋白酶轉(zhuǎn)基因綿羊，乳汁中分泌 ?抗胰蛋白酶含量高達(dá) 30mg/L。 11 一、用顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 （一）原理 將帶有完整序列的外源基因構(gòu)件通過(guò)顯微注射注入到 受精卵的雄性原核 中，外源基因 隨機(jī)插入并整合 到染色體上的任意序列中。為了使子宮內(nèi)膜變化與胚胎著床同步，需要與結(jié)扎雄鼠交配 4）結(jié)扎雄鼠： 因輸精管結(jié)扎，不會(huì)排精。 ?整合是隨機(jī)的 ， 由于插入位點(diǎn)的關(guān)系 ， 轉(zhuǎn)基因表達(dá)有不確定性 ， 有的高 ， 有的低 。 20 二、逆轉(zhuǎn)錄病毒法制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 （一）原 理 逆轉(zhuǎn)錄病毒是一類具有逆轉(zhuǎn)錄酶的 RNA病毒，能將病毒 RNA逆轉(zhuǎn)錄成雙鏈 DNA，進(jìn)而整合到細(xì)胞染色體 DNA中。 Gag： 編碼核衣殼、衣殼和基質(zhì)的功能。將外
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