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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作-全文預(yù)覽

  

【正文】 / \\ / 有95%和15%乙醇溶液,需要配制成75%乙醇溶液,要取95%乙醇溶液60份和 15%乙醇溶液20份,兩者混合即成75%乙醇溶液。例4體重l7g的小鼠應(yīng)注射藥液幾毫升?解:按15mg/kg的劑量計(jì)算,17g體重的小鼠應(yīng)給藥15=%, mg /15=%鹽酸苯海拉明溶液的容量。例2 摩爾濃度(mol/L)1L溶液中含溶質(zhì)的摩爾數(shù)稱(chēng)為該溶液的摩爾濃度。 比例濃度常用于表示稀溶液的濃度,例如1:5 000高錳酸鉀溶液是指5000 ml溶液中含高錳酸鉀1g;1:%腎上腺素。適用于液體藥物,如消毒用 75%乙醇即100 m1溶液中含無(wú)水乙醇75ml,相當(dāng)于W/W法70%乙醇。重量/體積(W/V)法:重量/體積(W/V)法即每l00 ml溶液中含藥物的克數(shù),如5%葡萄糖即每100m1含葡萄糖5g。 藥物濃度表示法 由人用量推算動(dòng)物用量。例2查A種動(dòng)物為小鼠,B種動(dòng)物為家兔,交叉點(diǎn)為折算系數(shù)W=,20mg/kg=/kg。 鼠家B種動(dòng)物的劑量(mg/kg)=WA種動(dòng)物的劑量(mg/kg)表51下面將分述按體重?fù)Q算和按體表面積換算的方法。如能查到為了同一目的,給相同種類(lèi)動(dòng)物用藥的記錄,那就可以直接照試。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥劑量的計(jì)算方法在需要給動(dòng)物用藥時(shí),經(jīng)常會(huì)遇到兩個(gè)問(wèn)題:(1)給多少劑量;(2)配成何種濃度的藥液。心跳呼吸驟停多半由于麻醉過(guò)深,抑制了延髓心血管運(yùn)動(dòng)中樞和呼吸中樞。若系藥物的毒性反應(yīng),尤其是由非麻醉藥所引起,可對(duì)癥處理。1.4.3.2.1.(二)、局部麻醉常以1%鹽酸普魯卡因溶液,在手術(shù)部位作皮下浸潤(rùn)麻醉。(3)肌肉注射肌肉注射麻醉法常用于鳥(niǎo)類(lèi)。因此,麻醉作用發(fā)生慢,有一定程度的興奮期,麻醉深度不易控制,只有靜脈注射麻醉失敗后才進(jìn)行。大、小白鼠和豚鼠腹腔內(nèi)注射麻醉一人操作即可。②注入藥物的速度一般要慢,尤其是使用20%氨基甲酸乙酯(烏拉坦)溶液給家兔作耳緣靜脈注射麻醉時(shí),速度過(guò)快,往往引起動(dòng)物死亡。宜選用4號(hào)針頭或5號(hào)針頭,選擇最粗的一根血管刺入。兔耳皮膚薄,耳緣靜脈表淺,因此進(jìn)針不能太深,以免刺破血管。耳緣靜脈沿耳背內(nèi)側(cè)行走。這兩支靜脈都位于皮下。這種方法對(duì)裝注射器針頭的要求是,針頭號(hào)與注射器刻度線在同一個(gè)方向上。注射麻醉就是將藥液抽吸入注射器內(nèi),然后通過(guò)注射針頭注入到動(dòng)物機(jī)體的某個(gè)部位,以達(dá)到麻醉目的。此外,這些動(dòng)物以及豚鼠、大小白鼠等體型較小的動(dòng)物可置入一個(gè)特制的麻醉箱內(nèi),或者放在鐘罩或大燒杯內(nèi),然后將浸有乙醚的藥棉或紗布放入其內(nèi),讓動(dòng)物呼吸乙醚空氣。狗吸入乙醚后有興奮現(xiàn)象,如掙扎、呼吸不規(guī)則或加深、肌張力增強(qiáng)等。先按照狗的大小選擇合適的口鼻罩套住狗嘴,內(nèi)墊數(shù)層紗布。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法所謂麻醉,通常是指用藥物使整個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(全身麻醉)或其手術(shù)部位(局部麻醉)處于無(wú)知覺(jué)狀態(tài),并使其基本生命活動(dòng)不受影響。(黃紅林 陳用移液管沿罩柄上開(kāi)口處,加入待試藥物,使受檢液與皮膚充分接觸并完全吸收后解開(kāi)(一般2~6小時(shí)),然后將皮膚表面仔細(xì)洗凈。脫毛過(guò)程中應(yīng)特別注意不要損傷皮膚。為此,要將試管的軟木塞塞緊,必要時(shí)可將受檢液表面加上一層液體石蠟。藥液與皮膚接觸的時(shí)間可根據(jù)藥物性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)要求而定。(6)股靜脈或頸外靜脈注射有時(shí)用于大鼠和犬,但必須在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行。將蛙或蟾蜍腦脊髓破壞后,仰臥固定于蛙板上,沿腹部正中線稍左剪開(kāi)腹肌并翻轉(zhuǎn),可見(jiàn)腹靜脈沿腹壁肌肉下行,注射時(shí)用左手拇指和食指捏住腹壁肌肉,稍向外拉,用中指在下頂起腹壁肌肉,右手持注射器,將針頭沿血管平行方向刺入即可。選擇尾靜脈下1/3處,用細(xì)針頭沿血管方向平行、向心端進(jìn)針(圖511)。圖510回抽注射器針?biāo)ǎ醒夯亓?,即可將藥液緩慢注?圖510)。如果是混懸液,可能會(huì)因懸浮粒子較大而引起血管栓塞。 靜脈注射角斜刺入腹肌,進(jìn)入腹腔。此注射方法是嚙齒類(lèi)動(dòng)物常用的給藥方法。注射完畢后用手輕輕按摩注射部位,促進(jìn)藥液吸收。肌肉注射主要用于注射不溶于水而懸于油或其他劑型中的藥物。注射后5分鐘再拔針,以免藥液從針孔漏出。操作時(shí),先剪去注射部位的被毛,消毒局部,然后用左手將皮膚捏成皺襞,右手持針頭,將針頭與皮膚呈30176。2.不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的注射部位有所不同,犬、貓多在大腿外側(cè),豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)或小腹部,大鼠可在左側(cè)下腹部。二、注射法給藥1.根據(jù)動(dòng)物大小選擇不同的導(dǎo)尿管,在導(dǎo)尿管的頭部涂上凡士林,使動(dòng)物取蹲位,助手以左臂及左腋輕輕按住動(dòng)物的頭部及前肢,以左手拉住動(dòng)物尾巴露出肛門(mén),右手輕握后肢。插管完成后應(yīng)注意檢查胃管是否準(zhǔn)確插入食管內(nèi),以防將藥物注入氣管(圖57)。成年動(dòng)物插管深度一般是:小鼠 3cm,大鼠5cm,家兔15cm,犬20 cm。為減少不良影響,必須充分掌握灌胃技術(shù)。2.此法的優(yōu)點(diǎn)是:操作簡(jiǎn)便,不會(huì)因操作失誤而致動(dòng)物死亡。一、攝入法給藥攝人法是經(jīng)消化道給藥,有自動(dòng)口服給藥、強(qiáng)制灌胃給藥和經(jīng)直腸給藥3種方式。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究工作的基本要素之一,如新藥開(kāi)發(fā)、對(duì)疾病和生命現(xiàn)象的研究等均需要?jiǎng)游镞M(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。烙印前,最好對(duì)烙印部位預(yù)先用75%乙醇消毒,以免造成皮膚局部感染。掛牌法是將標(biāo)有編號(hào)的金屬制號(hào)碼牌固定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳部皮膚上,大動(dòng)物可掛在頸上或籠箱上。若動(dòng)物編號(hào)超過(guò)10或更大數(shù)字,可使用上述兩種不同顏色的溶液,即把一種顏色作為個(gè)位數(shù),另一種顏色作為十位數(shù),這種交互使用可編到99號(hào)。染色法是用有色化學(xué)試劑在動(dòng)物身體明顯處如被毛、四肢等不同部位處進(jìn)行涂染或用不同顏色來(lái)區(qū)別各組動(dòng)物,是實(shí)驗(yàn)中最常用、最容易掌握的方法。應(yīng)及時(shí)用碘酒、乙醇消毒,隨后到有關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)診治。例如家兔這樣的動(dòng)物,不能采用抓雙耳或抓提腹部的錯(cuò)誤捉拿方法。二、注意事項(xiàng)1捉拿固定某一動(dòng)物之前,要對(duì)該動(dòng)物的習(xí)性有一定的了解。犬嘴的捆綁方法:取一圓形鐵柱管(直徑約1cm,長(zhǎng)25cm,可用萬(wàn)能支架上的鐵柱管代替)橫貫置于犬齒后部的上下頜之間,用較寬的紗布從下頜繞到上頜打第1個(gè)結(jié)扣后,紗布的兩端在鐵柱管的兩端靠犬的頭部繞兩圈固定。進(jìn)行頭顱部手術(shù)時(shí),多采用仰臥位固定配合馬蹄形固定器進(jìn)行。用左手托住其臀部,使其軀干的重量大部分集中在左手上(圖55),然后按實(shí)驗(yàn)要求固定。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,可用圖釘,采取俯臥位或仰臥位固定在蛙板上。一般方法是:先用右手掌迅速、輕輕地扣住豚鼠背部,抓住其肩中上方,以拇指和食指環(huán)握頸部,對(duì)于體型較大或懷孕的豚鼠,可用另一只手托住其臀部(圖5圖54)。需取尾血及尾靜脈注射時(shí),可將其固定在大鼠固定盒里,將鼠尾留在外面供實(shí)驗(yàn)操作。 大鼠取尾血及尾靜脈注射時(shí),可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上(圖511)。掌握正確捉拿、固定動(dòng)物的目的就是防止實(shí)驗(yàn)者被動(dòng)物咬傷抓傷,同時(shí)也是為了維持動(dòng)物的正常生理活動(dòng),從而不影響實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿、固定和編號(hào)方法在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,正確捉拿與固定動(dòng)物,是實(shí)驗(yàn)工作的基礎(chǔ),也是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的保證。 小鼠捉拿時(shí)先用右手將鼠尾抓住提起,放在較粗糙的臺(tái)面或鼠籠上,在其向前爬行時(shí),右手向后拉尾(圖51),用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚,將其置于左手心中,拉直四肢并用左手無(wú)名指壓緊尾和后肢(圖52),右手即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。2.若進(jìn)行手術(shù)或解剖,則應(yīng)事先麻醉或處死,然后用棉線活結(jié)縛四肢,用棉線固定門(mén)齒,背臥位固定在大鼠固定板上。豚鼠具有膽小易驚的特性,因此抓取時(shí)要求快、穩(wěn)、準(zhǔn)。圖53用左手將動(dòng)物貼緊在手掌中,并以左手中指、無(wú)名指、小指壓住其左腹側(cè)和后肢,拇指和食指分別壓住左、右前肢,右手進(jìn)行操作。用右手把兩耳輕輕地壓于手心內(nèi),同時(shí)抓住頸部的被毛與皮膚。固定方式分仰臥位和俯臥位,仰臥位固定時(shí),四肢用粗棉線固定,頭用家兔頭固定夾固定或用棉線鉤住家兔門(mén)齒后再固定在家兔臺(tái)頭端柱子上(圖56)。抓取犬時(shí),需要用特制的長(zhǎng)柄鉗夾夾住其頸部,套上犬鏈,然后根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求將其固定。如實(shí)驗(yàn)需要靜脈注射時(shí),可先使動(dòng)物麻醉后再取下長(zhǎng)柄夾,解綁,把動(dòng)物放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,按實(shí)驗(yàn)要求固定。4捉拿動(dòng)物過(guò)程中要以規(guī)范性的方法抓取和固定動(dòng)物,要避免因動(dòng)作粗暴而造成動(dòng)物高級(jí)職稱(chēng)考試網(wǎng)的損傷。6捉拿動(dòng)物過(guò)程中應(yīng)防止被動(dòng)物咬傷,若不慎被動(dòng)物咬傷、抓傷。 染色法一般把涂在左前腿上的記為1號(hào),左側(cè)腹部記為2號(hào),左后腿記為3號(hào),頭頂部記為4號(hào),腰背部記為5號(hào),尾基部記為6號(hào),右前腿上的記為7號(hào),右側(cè)腰部記為8號(hào),右后腿記為9號(hào)。 掛牌法烙印法是用刺數(shù)鉗在動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位(如耳、面鼻部和四肢等部位)刺上編號(hào),然后用棉簽蘸著溶有乙醇的黑墨汁在編號(hào)上涂抹。 凱)第二節(jié)較常見(jiàn)的給藥方法有:攝入法給藥、注射法給藥、涂布法給藥和吸入法給藥,其中前兩種方法較為常用。將藥物放入飼料或溶于飲水中,由動(dòng)物自動(dòng)攝入體內(nèi)。因此,該方法適用于動(dòng)物疾病的防治、藥物毒性觀測(cè)、某些與食物有關(guān)的人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的復(fù)制等。但
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