過氧化物酶同工酶的提取、分離-全文預覽
【正文】 ■ 在 濃縮膠 中的三 個 主要作用角色： 甘氨酸 : pH= 負電荷 pI= 不帶電荷 Cl1: 蛋白質 (酶 ): 小分子 大分子 ■ 濃縮效應 ： 分離膠 濃縮膠 樣本 離子缺乏空間 A B C + + ? 以鄰甲氧基苯酚（即愈創(chuàng)木酚）為過氧化物酶的底物，在此酶存在下， H2O2可將鄰甲氧基苯酚氧化成紅棕色的 4鄰甲氧基苯酚，其反應為： ? 該紅棕色的物質可用分光光度計在 470nm處測定其消光值，即可求出該酶的活性。 當 C保持恒定時，凝膠的有效孔徑隨著 T的增加而減小，當 T保持恒定， C為 4％時，有效孔徑最小， C大于或小于 4％時，有效孔徑均變大， C大于 5％時凝膠變脆，不宜使用， 實驗中最常用的 C是 ％和 3 。 （ 2） 交聯(lián)度： 是指凝膠溶液中 ， 交聯(lián)劑占單體和交聯(lián)劑總量的 百分數 ， 用 C%表示 。 化學聚合 形成的凝膠孔徑較小 ， 且重復性好 ， 用來制備 分離膠 ； ② 光聚合： 催化劑 是 核黃素 （ VB2） ， 在痕量氧存在下 ， 核黃素光解形成無色基 ， 無色基再被氧氧化成自由基 ， 激活單體發(fā)生聚合 。 續(xù) (2)影響電泳效果的因素 ： 聚丙烯酰胺凝膠電泳是以 聚丙烯胺凝膠 作為載體的一種 區(qū)帶電泳 。 二、實驗原理 : 同工酶概念： 同工酶 指催化同一種化學反應 ， 但其酶蛋白本身的分子結構組成卻有所不同的一組酶 。 在植物生長發(fā)育過程中它的活性不斷發(fā)生變化 。過氧化物酶同工酶的提取、分離 實 驗 四 學時： 9 掌握聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理和方法； 掌握過氧化物酶 (POD)活性測定的原理及方法。 它與呼吸作用 、光合作用及生長素的氧化等都有關系 。 此外 ， 過氧化物同工酶在遺傳育種中的重要作用也正在受到重視 。 (2)影響電泳效果的因素： ①帶電顆粒的大小和形狀： 顆粒越大，電泳速度越慢，反之越快； ②顆粒的電荷數： 電荷越少，電泳速度越慢，反
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