血紅蛋白的提取與分離(1)-全文預(yù)覽
【正文】 洗滌干凈的標(biāo)志是什么？ 1 除去其中的雜蛋白，以利于后續(xù)血紅蛋白的分離純化。血紅蛋白由四個(gè)肽鏈組成 (如圖 )，包括兩個(gè) α 肽鏈和兩個(gè) β 肽鏈。 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶靜電荷的多少以及分子的大小等因素。 SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物， SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有電荷量。 測(cè)定蛋白質(zhì)分子量。 基礎(chǔ)知識(shí) （三）電泳 原理：許多重要的生物大分子，如（ ）等都具有 ( ) 在 ( )下，這些基團(tuán)會(huì)帶上（ ） 。 原理 ① 許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的 PH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。 基礎(chǔ)知識(shí) （二）緩沖溶液 生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的 pH下進(jìn)行的，為了能夠在實(shí)驗(yàn)室條件下 準(zhǔn)確模擬 生物體內(nèi)的過(guò)程，就必須保持體外的 pH與體內(nèi)的基本一致。 能夠抵制外界的酸或堿的對(duì)溶液的 PH值的影響，維持 PH基本不變。 具體過(guò)程 原理： 當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)（ ）的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程（ ），移動(dòng)速度（ ），而（ ）的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在（ ）移動(dòng)，路程（ ），移動(dòng)速度（ ），相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。 問(wèn)： 依據(jù)什么來(lái)分離和提取蛋白質(zhì)（ 原理 P65T5－ 13） 基礎(chǔ)知識(shí) 閱讀并回答 （ P64） 凝膠色譜法另一個(gè)名稱(chēng)； 凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)； 凝膠的實(shí)質(zhì)； 凝膠色譜法 凝膠色譜法的原理。 CO NH 氨基酸的種類(lèi)不同；數(shù)目成百上千；排列順序變化多端；多肽鏈的空間結(jié)構(gòu)千差萬(wàn)別 生理功能 細(xì)胞和生物體的結(jié)構(gòu)物質(zhì) ， 是人體發(fā)育和組織更新的主要原料 ， 具有運(yùn)輸 、 調(diào)節(jié) 、 免疫 、 催化等作用 ， 是一切生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者 ① 氨基酸間脫水縮合時(shí)，原來(lái)的氨基和羧基就不存在了，形成的化合物即多肽的一端只有一個(gè)氨基，另一端只有一個(gè)羧基（不計(jì) R基上的氨基和羧基）。對(duì)蛋白質(zhì)的研究與應(yīng)用，首先需要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。 人類(lèi)基因組： 指 DNA分子所攜帶的全部遺傳信息。 細(xì)胞中有許多種蛋白質(zhì)，怎樣才能將所需要的酶提取分離出來(lái)呢？ 2022年 4月 14日宣布人類(lèi)基因組序列圖完成，這標(biāo)志著進(jìn)入了后基因組時(shí)代。隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃的進(jìn)展以及多種生物基因組測(cè)序工作的完成，人類(lèi)跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時(shí)代。在本課題中，我們將以血紅蛋白為實(shí)驗(yàn)材抖，學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)提取和分離的一些基本才技術(shù) 知識(shí)回顧 有關(guān)蛋白質(zhì)的幾個(gè)問(wèn)題： 含量 組成元素 相對(duì)分子質(zhì)量 基本組成單位： 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式： 種類(lèi)： 氨基酸連接方式 占細(xì)胞干重的 50％以上，細(xì)胞中含量最多的有機(jī)物 C、 H、 O、 N 高分子化合物 氨基酸 R H C COOH NH2 脫水縮合 知識(shí)回顧 有關(guān)蛋白質(zhì)的幾個(gè)問(wèn)題： 肽鍵 分子結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)多樣性的原因： (多樣性的 根本原因 ) 9 、蛋白質(zhì)的鑒定方法 氨基酸 肽鏈 蛋白質(zhì) 脫水縮合 盤(pán)曲折疊 （ n條） 細(xì)胞和生物體的結(jié)構(gòu)物質(zhì) ， 是一切生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者 。18 關(guān)于血紅蛋白 元素組成 分子結(jié)構(gòu) 顏色 存在細(xì)胞 生理功能 6 、獲得方法、 根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差異， 如 分子的形狀和大小 、所帶 電荷的性質(zhì)和多少 、 溶解度 和吸附的性質(zhì) 和 對(duì)其他分子的親和力 等等，可以用來(lái)分離不同蛋白質(zhì)。 基礎(chǔ)知識(shí) （一） 凝膠色譜法 依據(jù)的特性 蛋白質(zhì)分子量的大小。 我們?cè)谑裁吹胤接龅竭^(guò)緩沖物質(zhì)的？ 緩沖物質(zhì)有哪些？ 緩沖溶液的作用是什么？ 怎樣配制緩沖溶液？ 基礎(chǔ)知識(shí) （二）緩沖溶液 緩沖溶液 概念 在一定的范圍內(nèi)，能對(duì)抗外來(lái)少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液 PH發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用，具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。 ① 弱酸和弱酸鹽組合 H2CO3/NaHCO3 CH3COOH/C
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