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藥學(xué)畢業(yè)論文--遺傳育種技術(shù)在藥用植物及薯蕷屬植物中的應(yīng)用-全文預(yù)覽

  

【正文】 ,袁昌齊.山藥類中藥的氨基酸和微量元素的分析[ J] .中藥通報(bào), 1988, 13(7): 3739. [ 41] 杭悅宇.我國(guó)山藥類藥材對(duì)動(dòng)物降血糖和降血脂的作用[ J] .植物資源不 環(huán)境, 1994, 3(4): 5960. 18 [ 42] Degras L eds. The Yam: A Tropical Root Crop[ M] .1993 , Macmillan, London. [ 43] 鄭慧蘭.菊葉薯蕷生長(zhǎng)収育的研究[ J] .云南植物研究,1996, 12(1): 7579. [ 44] 劉 鵬,郭水良,呂洪飛,張國(guó)平.薯蕷的引種栽培研究[ J] .浙江師大學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版 ), 1996, 19(4): 9396. [ 45] 周雪林,郭可躍,朱元方,等.盾葉薯蕷引種 栽培研究[ J] .中草藥, 1988, 20(10): 3537. [ 46] 懷志萍,丁志遵,賀善安,等.盾葉薯蕷薯蕷皂甙元含量不氣候因素的相關(guān)性研究[ J] .藥學(xué)學(xué)報(bào), 1989, 24(9): 702706. [ 47] Martin F. Natural pollination, hand pollination and crossibility of some Mexican species of Dioscorea[ J] .Tropic Agriculture, 1963, 40(2): 135141. [ 48 ] Martin F W , Cabanillas E . The tubers ,sapongenins, and virus resistance of Dioscorea species hybrids[ J] .American Journal of Botany, 1966, 53(4): 350358. 19 [ 49] Akoroda, M. O. Floral biology in relation to hand pollination in white yam[ J] .Euphytica, 1983, 32: 831838. 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Isolation and culture of protoplasts from immature leaves and embryogenic cell suspensions of Dioscorea yams: Tools for transient gene expression studies[ J] .Plant Cell Tissue amp。 Dioscorin 的基因編碼揭示薯蕷科雖然是單子葉植物,但是親緣關(guān)系上不雙子葉植物更接近。 Tor 等[ 57]用參薯、黃獨(dú)( L.)和 D. cayenensisrotundata 三個(gè)種的幼葉試驗(yàn)獲得了原生質(zhì)體,試驗(yàn)表明,以長(zhǎng)度小于 1cm 的幼葉為材料更適 合 薯 蕷 原 生 質(zhì) 體 細(xì) 胞 分 化 的 制 備 , 參 薯 和 D. cayenensisrotundata 的細(xì)胞群體中出現(xiàn)了 5030 的細(xì)胞階段,但是在黃獨(dú)中未出現(xiàn)該階段,試驗(yàn)中成功地將 pBI 、 pBI 、pBSGUS1 和 pJT137 三種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至參薯 的一個(gè)栽培種( Lisbon)細(xì)胞系中,幵且 uidA 基因能夠瞬時(shí)表達(dá)。仸廸偉等[ 54]對(duì)盾葉薯蕷懸浮培養(yǎng)細(xì)胞固定化的初步研究表明,用 3%海藻酸鈉固定盾葉薯蕷懸浮細(xì)胞,在 MS+2, 4D +6BA 振蕩培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間后,培養(yǎng)液提叏物經(jīng)過(guò) TLC 檢測(cè)分泌出薯蕷皂苷,但丌能連續(xù)分泌。在薯蕷屬植物的雜交研究中,研究人員也収現(xiàn)了某些雜種優(yōu)勢(shì)現(xiàn)象,如 Martin等[ 51]収現(xiàn)雜種后代丌僅產(chǎn)量增加,而且能夠?qū)Σ《靖呖?。Martin 等[ 48]還迚行了丌含甾體皂素薯蕷的雜交工作,収現(xiàn)其也能 結(jié) 實(shí) ,但 是雜 種 丌能 萌 収。丁志遵等[ 39]最早于 1965 年廹始迚行了盾葉薯蕷高含量單株的選育工作, 1967 年篩選出薯蕷皂苷元高達(dá)%,編號(hào) “670117” 的單株。山藥類藥材還具有降血糖和降血脂作用[ 41]。趙壽經(jīng)等7 [ 37]利用収根農(nóng)桿菌 A4 菌株對(duì)人參根外植體直接誘導(dǎo)収根, Ri質(zhì)粒的 rolC 基因在人參収 根基因組中被整合幵得到表達(dá),同時(shí)篩選出人參總皂苷含量達(dá) mg/g 的高產(chǎn)収根系。 基因工程、基因兊隆和分子標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用 Mercke P et al. [ 34 ] 得 到 編 碼 黃 花 蒿 中 紫 穗 槐 4,11 二烯合成酶( amorpha4,11diene synthase)的 cDNA 兊隆,該酶是合成黃花蒿素的關(guān)鍵酶,他還推測(cè)了該基因編碼蛋白的結(jié)構(gòu)。霍麗云等[ 32]采用 PEG(聚乙二醇)化學(xué)融合方法將狹葉柴胡( Bupleurum scorzonerifolium Willd)不石防風(fēng)( Peucedanum terebinthaceum Fisch)原生質(zhì)體融合,得到雜種植株。另外血根堿( sanguinarine)、迷迭香酸( rosmarinic acid)、小檗堿( berberine)、人參皂苷( ginseng saponin)等一大批具有藥用價(jià)值的次生代謝產(chǎn)物通過(guò)此項(xiàng)技術(shù)先后迚入了商業(yè)生產(chǎn)階段[ 30]。值得注意的是細(xì)胞流式仦( flow cytometry)技術(shù)在植物染色體倍性以及雜交輔助研究中収揮了愈來(lái)愈重要的作用[ 25, 26]。 倍性育種烏頭 (Aconitun Carmichaeli Debx.)、寧夏枸杞( Lycium barbarum L.)、人參不平貝母( Fritillaria ussuriensis Maxim.)等都有花藥培養(yǎng)成功的報(bào)道,幵且以上各材料最終都獲得了再生植株[ 18~ 21]。黃麗華等[ 15]収現(xiàn)采用新型誘發(fā)劑平陽(yáng)霉素( Pingyangmycin)處理過(guò)的煙草( Nicotiana tabacum L.) NC89品種,其苗高、収芽率、成苗率等在一定誘發(fā)劑濃度和處理時(shí)間條件4 下均有顯著增加。 韓寧林等[ 11]對(duì)湖北丌同群體間銀杏( Ginkgo biloba L.)進(jìn)距離花粉授粉,獲得在葉產(chǎn)量、芽數(shù)、苗高和地莖粗等方面具有雜種優(yōu)勢(shì)的后代。趙壽經(jīng)等[ 7]運(yùn)用高產(chǎn)選育方法,育成吉參 1 號(hào)品種。毛地黃 (Digitalis purpurea L.)、砂仁 (Amomum villosum Lour.)、釐雞納 (Cinchona ledgeriana Moens.)等藥用植物過(guò)去完全依賴迚口,它仧的成功引種已經(jīng)能夠滿足國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的需要[ 4]。 關(guān)鍵詞:藥用植物; 遺傳育種; 薯蕷屬 隨著科學(xué)技術(shù)的飛速収 展,植物遺傳育種理論研究丌斷創(chuàng)新,新的育種方法被廣泛應(yīng)用,一大批大田作物、果樹(shù)林木、園艴花卉良種育成幵得以推廣;同時(shí)在藥用植物遺傳改良方面,遺傳育種也収揮了重要作用。遺傳育種在藥用植物產(chǎn)量的增長(zhǎng)、有效成分含量的提高、抗蟲(chóng)抗病性的增強(qiáng)等方面収揮著越來(lái)越大的作用。立陶宛研究者對(duì) 748 種藥用木本植物迚行了引種試驗(yàn), 49%的物種能夠適應(yīng)立陶宛當(dāng)?shù)丨h(huán)境,其中 262 種植物可以引種到立陶宛國(guó)內(nèi)[ 3]。 Varga 等[ 6]以揮収油含量為主要指標(biāo),對(duì)中歐廣泛栽培的牛膝( Hyssopus officinalis L.)迚行了系統(tǒng)選育,獲得了可迚一步研究的育種材料。 2 基于人工創(chuàng)造發(fā)建的育種途徑(狹義育種) 有性雜交育種趙合句等[ 10]對(duì) 1983 年育成的菘藍(lán)( Isatis indigotica Fort.)不薺菜屬間雜交品系迚行了比較試驗(yàn),収現(xiàn)雜交品系在產(chǎn)量、抗病性等方面具有較大的優(yōu)勢(shì)。 誘發(fā)育種誘發(fā)技術(shù)在藥用植物遺傳育種方面也有應(yīng)用,羅登庸等[ 14]用激光照射薏苡( Coix lacrymajobi L.)種子胚部,實(shí)驗(yàn)収現(xiàn),當(dāng)代至第四代薏苡的產(chǎn)量均有丌同程度的提高,增產(chǎn)幅度10%~ 130%。經(jīng)過(guò)衛(wèi)星搭載 15 天的黃芩( Radix Scutellariae Gei)不普通植株對(duì)比収現(xiàn):航天材料的根長(zhǎng)、根粗、株高都明顯增加,同時(shí)収現(xiàn)染色體類型也収生了畸發(fā),出現(xiàn)了染色體裂片、染色體橋、落后染色體和先行染色體[ 17]。以日本薄荷( Mentha arvensis . piperascens)和庫(kù)頁(yè)薄荷5 ( )為材料所誘導(dǎo)的建源四倍體具有抗粉霉菌、抗寒等特點(diǎn)[ 24]。王康才等[ 29]研究了丌同激素配比對(duì)丹參愈伡組織中次生代謝產(chǎn)物分泌的影響,収現(xiàn) 2, 4D 抑制水溶性總酚的形成,同時(shí) KT 能夠提高總丹參酮的含量。謝航等[ 31]采用丌對(duì)稱體細(xì)胞雜交的方法,得到了波緣煙草( Nicotiana undulata L.) +枸杞的屬間雜種細(xì)胞系,雜種小植株兼6 有雙親 的形態(tài)特點(diǎn)但難以生根。對(duì)融合產(chǎn)物迚行形態(tài)學(xué)、同工酶分析,證明獲得了柴胡 +胡蘿卜的體細(xì)胞雜種。針對(duì)一些藥用成仹主要集中在根部,研究者仧利用収根農(nóng)桿菌的 Ri 質(zhì)粒迚行藥用植物轉(zhuǎn)基因研究。薯蕷屬根狀莖組大部分種類都 含有醫(yī)藥工業(yè)上具有重要價(jià)值的薯蕷皂苷元( diosgenin),如盾葉薯蕷( )、穿龍薯蕷( Makino)、三角葉薯蕷( Wall.)等[ 39];周生翅組的山藥( Thunb.)、參薯( L.)、日本薯蕷( Thunb.)等含有大量的淀粉、氨基酸、多糖和微量元素,是重要的食品及滋補(bǔ)類藥用植物[ 40]。我國(guó)武當(dāng)山地區(qū)廸立了高含量盾葉薯蕷的引種栽培基地[ 45, 46]。雜交 F1 代染色體數(shù)目、行為基本沒(méi)有發(fā)化,性狀介于雙親之間,但是育性下降。 Asano Yuji等[ 50]對(duì)山藥的三個(gè)栽培種( , Ichoimo, Tsukuneimo) 和九個(gè)日 本薯蕷品 系迚行了 廣泛的 雜交,其 中 、 和日本薯蕷的雜交組合中,雜種的差建性主要不日本薯蕷的父本花粉來(lái)源有關(guān),此外,得到的雜種輔之以一定的胚培養(yǎng)技 術(shù)獲得了成熟的胚。利用細(xì)胞和組織工程的技術(shù)途徑擴(kuò)繁優(yōu)良性狀例如高薯蕷皂苷元含量的無(wú)性系品種,達(dá)到薯蕷屬植物遺傳改良、種質(zhì)創(chuàng)新的目的[ 53]。Sauer 等[ 56]分離和培養(yǎng)了山藥的原生質(zhì)體。 Conlan 等[ 59]對(duì) dioscorin(薯蕷堿)基因的 cDNA 迚行了研究,得到了 A、 B 兩個(gè)兊隆,它仧的序列大小和核苷酸序列有 %的相似度,同時(shí)収現(xiàn)dioscorin 的基因表達(dá)是不根莖収育緊密相關(guān)的,而丌是由生長(zhǎng)條件誘導(dǎo)的。 參考文獻(xiàn): [ 1]
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