《哺乳動物表達系統(tǒng)》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 使其 DNA形成類似核小體的 微型染色體 結(jié)構(gòu)。目前已鑒定的人腺病毒有 6個亞屬，其中常用來構(gòu)建載體的主要是 C亞屬的 2型（ Ad2） 和 5型（ Ad5） 病毒。哺乳動物基因工程 基因工程 5 2 3 4 1 6 7 8 9 基因工程的基本概念 基因工程的基本原理 基因工程所需的基本條件 基因工程的操作過程 目的基因的克隆與基因文庫的構(gòu)建 大腸桿菌基因工程 酵母基因工程 哺乳動物基因工程 高等植物基因工程 D 高等哺乳動物的基因轉(zhuǎn)移 8 哺乳動物基因工程 C 高等哺乳動物的載體系統(tǒng) B 高等哺乳動物的受體系統(tǒng) A 高等哺乳動物基因工程的基本概念 E 利用哺乳動物工程細胞生產(chǎn)重組蛋白 A 高等哺乳動物基因工程的基本概念 8 哺乳動物基因工程 高等哺乳動物基因工程 高等哺乳動物細胞基因表達技術(shù) 高等哺乳動物轉(zhuǎn)基因技術(shù) 轉(zhuǎn)基因動物個體 動物工程細胞 哺乳動物遺傳性狀改良 藥物篩選研究評價模型 人體基因治療 蛋白多肽物質(zhì)大規(guī)模生產(chǎn) 藥物篩選研究評價模型 B 高等哺乳動物的受體系統(tǒng) 8 哺乳動物基因工程 高等哺乳動物細胞的生長特性 高等哺乳動物受體細胞的條件 高等哺乳動物受體細胞的遺傳標(biāo)記 常用的高等哺乳動物受體細胞 高等哺乳動物細胞的生長特性 正常的哺乳類動物細胞具有下列四大生物學(xué)特征： 錨地依賴性： 細胞必須附在固體上或固定的表面才能生長分裂 血清依賴性： 細胞必須具有生長因子才能生長 接觸抑制性： 細胞與細胞接觸后，生長便受到抑制 形態(tài)依賴性： 細胞稱扁平狀，并有長纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) 上述特征使得正常的哺乳動物細胞在體外培養(yǎng)中，一般只能存活 50代 且在培養(yǎng)皿上以平面的形式生長，即單層細胞生長。 高等哺乳動物受體細胞的遺傳標(biāo)記 營養(yǎng)缺陷型的哺乳動物受體細胞 5磷酸核糖 1焦磷酸（ PRPP） 次黃嘌呤核苷一磷酸（ HMP） 次黃嘌呤核苷（ HR） GMP AMP 尿嘧啶核苷一磷酸（ UMP） 胸腺嘧啶核苷一磷酸（ TMP） 胸腺嘧啶核苷（ TR） 嘌呤核苷酸生物合成途徑 嘧啶核苷酸生物合成途徑 次黃嘌呤磷酸 核糖轉(zhuǎn)移酶 （ HPRT） （ TK） 胸腺嘧啶 核苷激酶 氨基喋呤（ AP） 氨基喋呤（ AP） 從頭合成途徑 補救合成途徑 高等哺乳動物受體細胞的遺傳標(biāo)記 營養(yǎng)缺陷型的哺乳動物受體細胞 含有胸腺嘧啶核苷激酶（ TK） 編碼基因缺陷的受體細胞（ tk ） 不能在含有 次黃嘌呤核苷 、 氨基喋呤 、 胸腺嘧啶核苷 的培養(yǎng)基 上（ HAT培養(yǎng)基 ）生長，載體上的標(biāo)記基因 tk能與之遺傳互補 含有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（ HPRT） 編碼基因缺陷的受體細胞 不能在含有 次黃嘌呤核苷 、 氨基喋呤 、 胸腺嘧啶核苷 的培養(yǎng)基 上（ HAT培養(yǎng)基 ）生長，載體上的標(biāo)記基因 hprt與之遺傳互補 （ hprt ） 高等哺乳動物受體細胞的遺傳標(biāo)記 哺乳動物受體細胞常見的遺傳選擇標(biāo)記 遺傳標(biāo)記 編碼產(chǎn)物 篩選藥物 作用機理 APH 氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 G418 APH滅活 G418 DHFR 二氫葉酸還原酶 氨甲喋呤 DHFR變體抗氨甲喋呤 HPH 潮霉素 B磷酸轉(zhuǎn)移酶 潮霉素 B HPH滅活潮霉素 B TK 胸腺嘧啶核苷激酶 氨基喋呤 TK合成 TMP XGPRT 黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 霉酚酸 XGPRT合成 GMP ADA 腺嘌呤核苷脫氨酶 腺嘌呤木酮糖苷 ADA滅活 XylA 常用的高等哺乳動物受體細胞 迄今為止，用于醫(yī)療用品（藥物、抗體、診斷試劑）大規(guī)模
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