《蛋白質(zhì)組學(xué)》ppt課件 (2)-全文預(yù)覽
【正文】 量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù) 蛋白質(zhì)溶液或經(jīng) SDSPAGE分離的蛋白質(zhì)條帶 肽段混合物 酶解 液相色譜分離 串聯(lián)質(zhì)譜分析 數(shù)據(jù)檢索，鑒定蛋白 蛋白質(zhì)－核酸間相互作用的研究 蛋白質(zhì)可以與末端標(biāo)記的核酸探針特異性結(jié)合，電泳時(shí)蛋白質(zhì)－核酸的復(fù)合物比無(wú)蛋白質(zhì)的探針在凝膠中泳動(dòng)速度漫，表現(xiàn)為相對(duì)滯后。 。 (2)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 (3)雙向電泳 第一向 ：等電聚焦電泳第二向 ： SDSPAGE 雙向電泳后的凝膠經(jīng)染色后蛋白呈現(xiàn)二維分布圖： 水平方向反映出蛋白在 pI上的差異， 垂直方向反映出它們?cè)诜肿恿可系牟顒e 。 根據(jù)一定的配方計(jì)算后，將適宜的 IPG試劑添加至混合物中用于凝膠聚合，在聚合中 緩沖基團(tuán)通過(guò)乙烯鍵共價(jià)聚合至聚丙烯酰胺骨架中而形成 pH梯度 。 工作原理： (1)1st dimension: 等電聚焦凝膠電泳 (IEF) 根據(jù)蛋白質(zhì)的凈電荷或等電點(diǎn)的不同進(jìn)行分離 (2)2nd dimension: SDSPAGE 根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大小不同進(jìn)行分離 雙向電泳后的凝膠經(jīng)染色后蛋白呈現(xiàn)二維分布圖： 水平方向 反映出蛋白在 pI上的差異， 垂直方向 反映出它們?cè)诜肿恿可系牟顒e 。 中國(guó)第一次領(lǐng)導(dǎo)重大國(guó)際協(xié)作計(jì)劃。 蛋白質(zhì)組 Genome=static position Proteome = highly flexible position Identical Genome – but different looks....? proteome parison 蛋白質(zhì)組與基因組的聯(lián)系與區(qū)別 ? 蛋白質(zhì)組學(xué)（ proteomics）： 以蛋白質(zhì)組為 研究對(duì)象 ， 分析 細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)， 了解 蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系， 在整體水平上 揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。 第一節(jié) 蛋白質(zhì)組及蛋白質(zhì)組學(xué)基本概念 蛋白質(zhì)組 (proteome)： PROTEOME = PROTE in +genOME Proteins expressed by a genome. 是指“特定細(xì)胞、組織
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