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《細(xì)胞系與細(xì)胞克隆》ppt課件-全文預(yù)覽

  

【正文】 隆形成率 常見(jiàn)的克隆培養(yǎng)技術(shù)有哪幾種,簡(jiǎn)要敘述其技 術(shù)要點(diǎn) 影響克隆形成率的因素 克隆分離的方法和技術(shù)要點(diǎn) 。 HamF12k – 血清 – 飼養(yǎng)細(xì)胞 – 激素和生長(zhǎng)因子:胰島素,地塞米松, EGF,BFGF。 :最常用 消化 — 低密度細(xì)胞懸液制備 — 接種 — 標(biāo)記與培養(yǎng) — 分離擴(kuò)大培養(yǎng) — 觀察 — 移植瓶或皿內(nèi)培養(yǎng) 注意事項(xiàng): 1)確保一個(gè)細(xì)胞,注意培養(yǎng)孔的周邊 2)輪廓清晰完整,體積適宜的健康細(xì)胞 3)不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞( feeder cell):也稱滋養(yǎng)細(xì)胞,是一層經(jīng)過(guò)射線或絲裂霉素 C處理過(guò)的供其它細(xì)胞附著的細(xì)胞層,如成纖維細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 細(xì)胞系的維持 細(xì)胞系檔案要記錄好:組織來(lái)源、培養(yǎng)基要求、傳代時(shí)間等; 傳代換液有規(guī)律,否則會(huì)引起生物學(xué)特性改變; 多種細(xì)胞維持傳代,要防止交叉污染; 要有充足的凍存儲(chǔ)備,防止因污染造成絕種;另外
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