生物化學(xué)蛋白質(zhì)之一-全文預(yù)覽
【正文】 層析法是利用被分離樣品混合物中各組分的 化學(xué)性質(zhì) 的差異，使各組分以不同程度分布在兩個(gè)相中，這兩個(gè)相一個(gè)為 固定相 ，另一個(gè)為 流動(dòng)相 。 試劑： 對(duì)氨基苯磺酸鹽酸溶液、亞硝酸鈉、碳酸鈉混合溶液 . 產(chǎn)物： 橘紅色的化合物。 (3) 坂口反應(yīng)： 檢測(cè) Arg或含 Arg的蛋白質(zhì)的反應(yīng) 。 產(chǎn)物： 紅色的化合物 。 α 氨基參加的反應(yīng)： 羧基參加的反應(yīng)： (1)與堿反應(yīng)成鹽 (2)與醇反應(yīng)成酯 (3)與酰化試劑反應(yīng)成酰氯 氨基與 α 羧基共同參加的反應(yīng) 與茚三酮的反應(yīng)：除脯氨酸與羥脯氨酸外，可與其它氨基酸生成 藍(lán)紫色化合物 。 α 氨基參加的反應(yīng)： (3) 與 2,4二硝基氟苯 （ 2,4DNFB）的反應(yīng)（ Sanger反應(yīng)）：生成黃色的二硝基苯 氨基酸衍生物。 PI=兩性離子狀態(tài)兩側(cè)的基團(tuán)的 PK’值之和的一半（ +） /2= 中性氨基酸： pI=(pK’1 + pK’2)/2 pK’1為 α 羧基的解離常數(shù) , pK’2為 α 氨基的解離常數(shù) 。3 谷氨酸（ A）和賴(lài)氨酸（ B）滴定曲線(xiàn)和等電點(diǎn)計(jì)算 在酸性條件下，丙氨酸以陽(yáng)離子形式存在，可以看作是 一個(gè)二元弱酸 ，有兩個(gè)可以解離的 H+，即 COOH上的 H+和 NH3上的 H+。 一氨基二羧基 AA的等電點(diǎn)計(jì)算： pI= 2 pK180。 一氨基一羧基 AA的等電點(diǎn)計(jì)算： pI= 2 pK180。 在 某一 pH環(huán)境 下 ， 以 兩性離子 （ 兼性離子 ） 的形式存在 。 ：除甘氨酸外的氨基酸均有旋光性。 （ 3） 半必需氨基酸： 指人體內(nèi)可以合成但合成量不能滿(mǎn)足人體需要的氨基酸，有： 組氨酸、精氨酸 。 （ 3） 極性帶電氨基酸 ：天冬氨酸、谷氨酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、組氨酸。 （ 2） 堿性氨基酸 ：二氨基一羧基氨基酸，有： 賴(lài)氨酸、精氨酸、組氨酸 。 ? 除 R為 H（甘氨酸）外，其余氨基酸均具有 旋光性 。 含量(%) 5055 67 2023 1517 微量或無(wú) 元素組成 C H O N S 其它 蛋白質(zhì)中 N是特征元素，且含量恒定，為 16%左右，即 16克氮 /100克蛋白質(zhì)，故可以用 凱氏定氮法 測(cè)定樣品中 總氮含量 和 無(wú)機(jī)氮含量 , 求出樣品中蛋白質(zhì)含量 。 ?缺點(diǎn) ：水解不完全，中間產(chǎn)物多。 ?優(yōu)點(diǎn) ：水解徹底， 色氨酸不被破壞 ，水解液清亮。 （四）、根據(jù)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分類(lèi) 二、蛋白質(zhì)的水解 ? 條件 ： 510倍的 20%的鹽酸煮沸回流 1624
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