【正文】 (3)合并三次提取液，并棄去藥渣； (4)實驗完成后關閉微波發(fā)生器開關。 高效液相色譜掃描 采用高效液相色譜 法 對 綠原酸 標準品及 提取液 進行分析 ， 測試條件 如表 23 所示 表 23 高效液相色譜檢測所需色譜條件表 項目 檢測條件 色譜柱 ZORBAX Eclipse 柱 流動相 18%乙醇溶液 檢測波長 324nm 流速 柱溫 26℃ （室溫） 時間 5min 東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 10 3 實驗結(jié)果分析與討論 預實驗 結(jié)果分析 預實驗金銀花中 綠原酸提取率如表 31 所 示 表 31 預實驗實驗結(jié)果 因素 實驗 微波功率 提取時間 乙醇濃度 溶媒用量 預浸泡時間 提取次數(shù) 提取率 （ W） (min) （ %） （ mL/g） (h) （ mg/g） 1 2 3 4 5 250 70 2 10 0 1 250 70 2 10 0 2 250 70 2 10 0 3 250 70 2 10 0 4 250 70 2 10 24 4 單位質(zhì)量藥材的總外表面積越大，有利于溶劑的滲透及溶質(zhì)向主體傳遞，但是金銀花系花類藥材，質(zhì)地較松散，在提取時間較長的情況下，藥材粉碎與否對提取結(jié)果影響不大。 實驗數(shù)據(jù)處理 正交試驗結(jié)果及 極差分析 如 表 32 所示 ，方差 分析 結(jié)果 如 表 33 所示 。 圖 32 微波功率對 提取 率影響趨勢 圖 33 提取時間對 提取 率影響趨勢 圖 34 溶媒比對 提取 率影響趨勢 圖 35 乙醇濃度 提取 率影響趨勢 微波 提取時間 對綠原酸提取率的影響如 圖 32 所示 ，綠原酸提取率在提取功率為 200～300W 之間有所上升 ,在達到 300W 后綠原酸提取率逐漸下降。 溶媒比對綠原酸提取率的影響如 圖 34 所示 ，溶媒比為 9 時，綠原酸提取提取率最高，原因是溶媒過少，溶液易 達到飽和，有效成分不足以提取完全，溶媒過多不利于綠原酸提取，且浪費溶劑。因為中藥提取，除了為了盡可能多得提取有效成分外，也需盡量去處無效成分，盡可能增加保存的時間，以保證中藥制劑的質(zhì)量。 液相色 描法檢測 圖 38，圖 39 分別 為綠原酸標準品和綠原酸提取液的液相色譜圖。實驗結(jié)果 表 明： (1) 微波輔助 提取工藝較傳統(tǒng)溶劑提取 法收率高，而且提取時間極短、條件溫和，是一種較好的提取方法 。 最后，向在百忙中抽出時間對本文進行評審并提出寶貴意 見的各位 老師 表示衷心地感謝！ 。 東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 參考文獻 [1] 蔡小華 ,楊志學 .中藥研究現(xiàn)代化的思索 [J].甘肅中醫(yī)學院學報 ,2022,22(3):4749. [2] 劉小平 ,李湘南 ,徐海星 .中藥分離工程 [M],北京 :化學工業(yè)出版社 ,. [3] 張驃 ,大海 .中藥復方藥效工程學 [M].北京 :中國醫(yī)藥科技出版社 ,. [4] 張永清 ,王麗萍 ,劉志敏 .金銀花名稱本草考證 [J].山東中醫(yī)藥大學學報 ,1998,22(6):456462. [5] 張玲 .山東金銀花干花及鮮花揮發(fā)油成分比較研究 [J].西北藥學雜志 ,1998,13(6):249250 [6] 武達 ,關澍男 .金銀花提取工藝研究 [J].黑龍江醫(yī)藥 ,2022,18(2):3840. [7] I wanhas hi H, Negoro Y, I keda A, et al. Inhibation by chlotogenic acid of hae matincatalysed retinoic acid 5, of Biochemistry[J].1986,239:641646. [8] 韓麗 .實用中藥制劑新技術 [M].北京 :化學工業(yè)出版社 ,:144145 [9] 陳鋼 ,侯世祥 .金銀花提取物中綠原酸的穩(wěn)定性研究 [J].中國中藥雜志 ,2022,28(3):223226. [10] EngShi Ong,SooOn Woo,YukLin liquid extraction of Berberine and aristolochic acids in medicinal plants. [J].Journal of Chromatography A,313(2022) :5764. [11] 林丹 ,趙國玲 .金銀花不同提取方法的綠原酸比較研究 [J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā) ,2022,15(2):124126. [12] 林緞嫦 ,宋勁詩 .金銀花中綠原酸提取工藝探討 [J].中成藥 ,1994,16(7) :23. [13] 李志華 ,許讓翻 .不同提取工藝對金銀花中綠原酸提取率的影響 [J].中草藥 ,2022,33(8):714715. [14] 張文清 ,鄭琪 .金銀花中綠原酸提取工藝的研究 [J].廣西輕工業(yè) ， 2022,1:3334. [15] 何德貴 ,周芳勇等 .金銀花不同提取工藝及優(yōu)選條件探討 [J].中國實驗方劑學雜 志 ,2022,7(1) : [16] 周莉莉 ， 趙曉林等 .山茱萸化學成分超聲提取工藝的研究 [J].現(xiàn)代中藥研究與實踐 ， 2022,19(3) :4749. [17] 盧曉江 .中藥提取工藝與設備 [M].北京 :化學工業(yè)出版社 ,2022:1017. [18] Mikihiro Nomura, Tang Bin, Sinichi Nakao. Selective ethanol extraction from fermentation broth using a silicalite membrane[J]. Separation and purification Technolology,2022,27:5966 [19] 黃旭初 ,侯 娟 ,張建軍 ,劉 艷 .金銀花中綠原酸的微波預處理提取及檢測 [J].分析測試技術與 儀器2022,14(1):1418. [20] 趙國玲 .杜仲葉中綠原酸的提取分離純化工藝研究 :[D].貴州 :貴州大學 ,2022. [21] 余建平 ,林燕 ,滕莉麗 ,王科軍 .微波法提取金銀花中的綠原酸 [J].江西化工 ,2022,3:99101. [22] Nurhan Turgut Dunford, Minquan Zhang, Pressurized solvent extraction of wheat germ oil[J]. Food Research International,2022,36:905909. 東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 致謝 本論文的工作 是 在史瑞 欣 老師的熱情關懷和悉心指導 下完成的 。 圖 38 綠原酸標準品液相色譜圖 圖 39 綠原酸提取液液相色譜圖 東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 15 4 結(jié)論 本文 對 微 波輔助 法提取 金銀花 中綠原酸的 提 取工藝進行了研究。 綠原酸提取液的檢測 紫外掃描法檢測 取適量的綠原酸標準品溶液，綠原酸提取液稀釋溶液，用 雙光束紫外分光光度計TU1901 在 200～ 600nm 范圍內(nèi)進行掃描 ，得 紫外光譜圖 。所以當乙醇體積分數(shù)進一步增加時，綠原酸得率出現(xiàn)了緩慢下降的趨勢這一點在綠原酸的水提醇沉法提取中得到了驗證。但是當功率繼續(xù)增加 時， 溫度將繼續(xù)升高 ， 溫東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 13 度高于 80℃ 對綠原酸的穩(wěn)定性造成影響， 以及實驗因素間的相互作用，造成綠原酸提取率降低。 最優(yōu) 組合為 A3B1C2D2， 即微波輔助提取功率為300W， 提取時間為 1min， 以 50%的乙醇溶液為溶媒，溶媒比為 9。 從 圖 31 中 可以 看 出， 隨著微波次數(shù)的增多，綠原酸的得率不斷提高，但當微波次數(shù)達到 3 次以后，綠原酸得率趨于穩(wěn)定，考慮到后續(xù)工作的方便，以后實驗中均采取 3 次微波輔助提取。 提取液中 綠原酸含量測定 將提取液定容于 250mL 容量瓶中，靜止片刻后，取 5mL 定容于 250mL 容量瓶中，在最大吸收波長處測其含量，從而計算出綠原酸的提取率。 微波輔助法 提取實驗 (1)打開微波發(fā)生器開關，設定反應所需功率及提取時間，開始實驗。 金銀花中綠原酸提取液的檢測 根據(jù)藥典規(guī)定金銀花中的有效成分主要是綠原酸，這也是控制某些含金銀花藥材的質(zhì)量指標。 藥液分離效果的好壞，在于分離因數(shù)的大小，分離因數(shù)越大藥渣與藥液的分離效率就越高。 考察微波輔助提取次數(shù) 的實驗 為預實驗 1，預實驗 2，預實驗 3， 預實驗 4； 考察藥材浸泡與否 的實驗為預實驗 5， 實驗條件 如 表 21 所示 。 東北林業(yè)大學畢業(yè)論文 6 2 實驗部分 實驗 藥品 金銀花花蕾干制品 （ 海 暉 大藥房 ） 綠原酸對照品（ 中國藥品生物制品鑒定所 ） 無水乙醇 （ AR） 無水碳酸鈉（ AR） 38%鹽酸溶液 實驗儀器 儀器名稱 規(guī)格及型號 生產(chǎn)廠家 高速萬能 粉碎機 FW10 天津市泰斯特儀器有限公司 實驗專用微波爐 NJL073 南京杰全微波爐設備有限公司 低速臺式自動平衡離心機 DT52 北京時代北利離心機有限公司 雙光速紫外可見分光光度計 TU1901 北京普析通用儀器有限責任公司 安捷倫 高效 液相色譜儀 Agilent 1100 江蘇舜星科技有限公司 萬分之一分析天平 BT224S 賽多利斯科學儀器 有限公司 實驗設計 本課題 采 用正交試驗法 ，以微波乙醇輔助提取法 對金銀花中的綠原酸進行提取， 探索金銀花中綠原酸的最佳提取條件。對于具體的提取設備，單位時間的水蒸發(fā)量是可知的，單位方藥飲片的吸水量也可通過實驗測定 [2122]。目前在配制中藥針劑中，常用水和乙醇作提取溶媒。有效成分長時間受熱會導致生物活性的破壞，大量雜質(zhì)成分溶出， 結(jié)果得不償失。 (3)提取時間 被浸出物質(zhì)在不同的浸出時間內(nèi)其浸出量是不同的。文獻表明 [8]，在弱酸性條件下，咖啡酸和鞣酸較易合成為綠原酸。有時也選用碳 酸鈣、氫氧化鈣、碳酸鈉等。常用的輔助劑有酸、堿、酶及表面活性劑等。 (2)預浸泡 中藥材的待加工狀態(tài)多數(shù)是干燥狀態(tài)，在正式浸取前予以適當?shù)慕?，吸收溶媒，使之組織浸潤膨脹，將有利于浸取時溶質(zhì)的加速溶解和擴散。多數(shù)中藥材是植物或動物性的生藥，這些生藥的細胞組織很緊密，細胞壁也很厚，使溶劑