【正文】 (3)合并三次提取液，并棄去藥渣； (4)實(shí)驗(yàn)完成后關(guān)閉微波發(fā)生器開(kāi)關(guān)。 高效液相色譜掃描 采用高效液相色譜 法 對(duì) 綠原酸 標(biāo)準(zhǔn)品及 提取液 進(jìn)行分析 ， 測(cè)試條件 如表 23 所示 表 23 高效液相色譜檢測(cè)所需色譜條件表 項(xiàng)目 檢測(cè)條件 色譜柱 ZORBAX Eclipse 柱 流動(dòng)相 18%乙醇溶液 檢測(cè)波長(zhǎng) 324nm 流速 柱溫 26℃ （室溫） 時(shí)間 5min 東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 10 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與討論 預(yù)實(shí)驗(yàn) 結(jié)果分析 預(yù)實(shí)驗(yàn)金銀花中 綠原酸提取率如表 31 所 示 表 31 預(yù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 因素 實(shí)驗(yàn) 微波功率 提取時(shí)間 乙醇濃度 溶媒用量 預(yù)浸泡時(shí)間 提取次數(shù) 提取率 （ W） (min) （ %） （ mL/g） (h) （ mg/g） 1 2 3 4 5 250 70 2 10 0 1 250 70 2 10 0 2 250 70 2 10 0 3 250 70 2 10 0 4 250 70 2 10 24 4 單位質(zhì)量藥材的總外表面積越大，有利于溶劑的滲透及溶質(zhì)向主體傳遞，但是金銀花系花類(lèi)藥材，質(zhì)地較松散，在提取時(shí)間較長(zhǎng)的情況下，藥材粉碎與否對(duì)提取結(jié)果影響不大。 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理 正交試驗(yàn)結(jié)果及 極差分析 如 表 32 所示 ，方差 分析 結(jié)果 如 表 33 所示 。 圖 32 微波功率對(duì) 提取 率影響趨勢(shì) 圖 33 提取時(shí)間對(duì) 提取 率影響趨勢(shì) 圖 34 溶媒比對(duì) 提取 率影響趨勢(shì) 圖 35 乙醇濃度 提取 率影響趨勢(shì) 微波 提取時(shí)間 對(duì)綠原酸提取率的影響如 圖 32 所示 ，綠原酸提取率在提取功率為 200～300W 之間有所上升 ,在達(dá)到 300W 后綠原酸提取率逐漸下降。 溶媒比對(duì)綠原酸提取率的影響如 圖 34 所示 ，溶媒比為 9 時(shí)，綠原酸提取提取率最高，原因是溶媒過(guò)少，溶液易 達(dá)到飽和，有效成分不足以提取完全，溶媒過(guò)多不利于綠原酸提取，且浪費(fèi)溶劑。因?yàn)橹兴幪崛?，除了為了盡可能多得提取有效成分外，也需盡量去處無(wú)效成分，盡可能增加保存的時(shí)間，以保證中藥制劑的質(zhì)量。 液相色 描法檢測(cè) 圖 38，圖 39 分別 為綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品和綠原酸提取液的液相色譜圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 明： (1) 微波輔助 提取工藝較傳統(tǒng)溶劑提取 法收率高，而且提取時(shí)間極短、條件溫和，是一種較好的提取方法 。 最后，向在百忙中抽出時(shí)間對(duì)本文進(jìn)行評(píng)審并提出寶貴意 見(jiàn)的各位 老師 表示衷心地感謝！ 。 東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 參考文獻(xiàn) [1] 蔡小華 ,楊志學(xué) .中藥研究現(xiàn)代化的思索 [J].甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) ,2022,22(3):4749. [2] 劉小平 ,李湘南 ,徐海星 .中藥分離工程 [M],北京 :化學(xué)工業(yè)出版社 ,. [3] 張驃 ,大海 .中藥復(fù)方藥效工程學(xué) [M].北京 :中國(guó)醫(yī)藥科技出版社 ,. [4] 張永清 ,王麗萍 ,劉志敏 .金銀花名稱(chēng)本草考證 [J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào) ,1998,22(6):456462. [5] 張玲 .山東金銀花干花及鮮花揮發(fā)油成分比較研究 [J].西北藥學(xué)雜志 ,1998,13(6):249250 [6] 武達(dá) ,關(guān)澍男 .金銀花提取工藝研究 [J].黑龍江醫(yī)藥 ,2022,18(2):3840. [7] I wanhas hi H, Negoro Y, I keda A, et al. Inhibation by chlotogenic acid of hae matincatalysed retinoic acid 5, of Biochemistry[J].1986,239:641646. [8] 韓麗 .實(shí)用中藥制劑新技術(shù) [M].北京 :化學(xué)工業(yè)出版社 ,:144145 [9] 陳鋼 ,侯世祥 .金銀花提取物中綠原酸的穩(wěn)定性研究 [J].中國(guó)中藥雜志 ,2022,28(3):223226. [10] EngShi Ong,SooOn Woo,YukLin liquid extraction of Berberine and aristolochic acids in medicinal plants. [J].Journal of Chromatography A,313(2022) :5764. [11] 林丹 ,趙國(guó)玲 .金銀花不同提取方法的綠原酸比較研究 [J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā) ,2022,15(2):124126. [12] 林緞嫦 ,宋勁詩(shī) .金銀花中綠原酸提取工藝探討 [J].中成藥 ,1994,16(7) :23. [13] 李志華 ,許讓翻 .不同提取工藝對(duì)金銀花中綠原酸提取率的影響 [J].中草藥 ,2022,33(8):714715. [14] 張文清 ,鄭琪 .金銀花中綠原酸提取工藝的研究 [J].廣西輕工業(yè) ， 2022,1:3334. [15] 何德貴 ,周芳勇等 .金銀花不同提取工藝及優(yōu)選條件探討 [J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜 志 ,2022,7(1) : [16] 周莉莉 ， 趙曉林等 .山茱萸化學(xué)成分超聲提取工藝的研究 [J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐 ， 2022,19(3) :4749. [17] 盧曉江 .中藥提取工藝與設(shè)備 [M].北京 :化學(xué)工業(yè)出版社 ,2022:1017. [18] Mikihiro Nomura, Tang Bin, Sinichi Nakao. Selective ethanol extraction from fermentation broth using a silicalite membrane[J]. Separation and purification Technolology,2022,27:5966 [19] 黃旭初 ,侯 娟 ,張建軍 ,劉 艷 .金銀花中綠原酸的微波預(yù)處理提取及檢測(cè) [J].分析測(cè)試技術(shù)與 儀器2022,14(1):1418. [20] 趙國(guó)玲 .杜仲葉中綠原酸的提取分離純化工藝研究 :[D].貴州 :貴州大學(xué) ,2022. [21] 余建平 ,林燕 ,滕莉麗 ,王科軍 .微波法提取金銀花中的綠原酸 [J].江西化工 ,2022,3:99101. [22] Nurhan Turgut Dunford, Minquan Zhang, Pressurized solvent extraction of wheat germ oil[J]. Food Research International,2022,36:905909. 東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 致謝 本論文的工作 是 在史瑞 欣 老師的熱情關(guān)懷和悉心指導(dǎo) 下完成的 。 圖 38 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖 圖 39 綠原酸提取液液相色譜圖 東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 15 4 結(jié)論 本文 對(duì) 微 波輔助 法提取 金銀花 中綠原酸的 提 取工藝進(jìn)行了研究。 綠原酸提取液的檢測(cè) 紫外掃描法檢測(cè) 取適量的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液，綠原酸提取液稀釋溶液，用 雙光束紫外分光光度計(jì)TU1901 在 200～ 600nm 范圍內(nèi)進(jìn)行掃描 ，得 紫外光譜圖 。所以當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)進(jìn)一步增加時(shí)，綠原酸得率出現(xiàn)了緩慢下降的趨勢(shì)這一點(diǎn)在綠原酸的水提醇沉法提取中得到了驗(yàn)證。但是當(dāng)功率繼續(xù)增加 時(shí)， 溫度將繼續(xù)升高 ， 溫東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 13 度高于 80℃ 對(duì)綠原酸的穩(wěn)定性造成影響， 以及實(shí)驗(yàn)因素間的相互作用，造成綠原酸提取率降低。 最優(yōu) 組合為 A3B1C2D2， 即微波輔助提取功率為300W， 提取時(shí)間為 1min， 以 50%的乙醇溶液為溶媒，溶媒比為 9。 從 圖 31 中 可以 看 出， 隨著微波次數(shù)的增多，綠原酸的得率不斷提高，但當(dāng)微波次數(shù)達(dá)到 3 次以后，綠原酸得率趨于穩(wěn)定，考慮到后續(xù)工作的方便，以后實(shí)驗(yàn)中均采取 3 次微波輔助提取。 提取液中 綠原酸含量測(cè)定 將提取液定容于 250mL 容量瓶中，靜止片刻后，取 5mL 定容于 250mL 容量瓶中，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)其含量，從而計(jì)算出綠原酸的提取率。 微波輔助法 提取實(shí)驗(yàn) (1)打開(kāi)微波發(fā)生器開(kāi)關(guān)，設(shè)定反應(yīng)所需功率及提取時(shí)間，開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。 金銀花中綠原酸提取液的檢測(cè) 根據(jù)藥典規(guī)定金銀花中的有效成分主要是綠原酸，這也是控制某些含金銀花藥材的質(zhì)量指標(biāo)。 藥液分離效果的好壞，在于分離因數(shù)的大小，分離因數(shù)越大藥渣與藥液的分離效率就越高。 考察微波輔助提取次數(shù) 的實(shí)驗(yàn) 為預(yù)實(shí)驗(yàn) 1，預(yù)實(shí)驗(yàn) 2，預(yù)實(shí)驗(yàn) 3， 預(yù)實(shí)驗(yàn) 4； 考察藥材浸泡與否 的實(shí)驗(yàn)為預(yù)實(shí)驗(yàn) 5， 實(shí)驗(yàn)條件 如 表 21 所示 。 東北林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文 6 2 實(shí)驗(yàn)部分 實(shí)驗(yàn) 藥品 金銀花花蕾干制品 （ 海 暉 大藥房 ） 綠原酸對(duì)照品（ 中國(guó)藥品生物制品鑒定所 ） 無(wú)水乙醇 （ AR） 無(wú)水碳酸鈉（ AR） 38%鹽酸溶液 實(shí)驗(yàn)儀器 儀器名稱(chēng) 規(guī)格及型號(hào) 生產(chǎn)廠家 高速萬(wàn)能 粉碎機(jī) FW10 天津市泰斯特儀器有限公司 實(shí)驗(yàn)專(zhuān)用微波爐 NJL073 南京杰全微波爐設(shè)備有限公司 低速臺(tái)式自動(dòng)平衡離心機(jī) DT52 北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司 雙光速紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) TU1901 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司 安捷倫 高效 液相色譜儀 Agilent 1100 江蘇舜星科技有限公司 萬(wàn)分之一分析天平 BT224S 賽多利斯科學(xué)儀器 有限公司 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 本課題 采 用正交試驗(yàn)法 ，以微波乙醇輔助提取法 對(duì)金銀花中的綠原酸進(jìn)行提取， 探索金銀花中綠原酸的最佳提取條件。對(duì)于具體的提取設(shè)備，單位時(shí)間的水蒸發(fā)量是可知的，單位方藥飲片的吸水量也可通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定 [2122]。目前在配制中藥針劑中，常用水和乙醇作提取溶媒。有效成分長(zhǎng)時(shí)間受熱會(huì)導(dǎo)致生物活性的破壞，大量雜質(zhì)成分溶出， 結(jié)果得不償失。 (3)提取時(shí)間 被浸出物質(zhì)在不同的浸出時(shí)間內(nèi)其浸出量是不同的。文獻(xiàn)表明 [8]，在弱酸性條件下，咖啡酸和鞣酸較易合成為綠原酸。有時(shí)也選用碳 酸鈣、氫氧化鈣、碳酸鈉等。常用的輔助劑有酸、堿、酶及表面活性劑等。 (2)預(yù)浸泡 中藥材的待加工狀態(tài)多數(shù)是干燥狀態(tài)，在正式浸取前予以適當(dāng)?shù)慕?，吸收溶媒，使之組織浸潤(rùn)膨脹，將有利于浸取時(shí)溶質(zhì)的加速溶解和擴(kuò)散。多數(shù)中藥材是植物或動(dòng)物性的生藥，這些生藥的細(xì)胞組織很緊密，細(xì)胞壁也很厚，使溶劑