【正文】 色時(shí)著色深的染色質(zhì)組分。若 200bp 相當(dāng)于一個(gè)核小體，則可形成 25 個(gè)核小體，實(shí)際觀察到 23個(gè)，與推斷基本一致。 b、用非特異性微球菌核酸酶消化染色質(zhì)，經(jīng)過蔗糖梯度離心及瓊脂糖凝膠電泳分析，發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù) DNA被降解成約 200bp的片段 ；部分酶解，則得到的片段是以 200bp 不單位的單體、二體（ 400bp）、三體（ 600bp）等等。 ⑶、 146bp 的 DNA 分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體 圈 , 組蛋白 H1在核心顆粒外結(jié)合額外 20bp DNA，鎖住核小體 DNA的進(jìn)出端，起穩(wěn)定核小體的作用。 答： 結(jié)構(gòu)要點(diǎn) ：⑴每個(gè)核小體單位包括 200bp 左右的 DNA超螺旋和一個(gè)組蛋白八聚體及一個(gè)分子 H1。（ 4）參與細(xì)胞分裂時(shí)染色體的分離和位移。其他化學(xué)成分為微管結(jié)合蛋白包括為微管相關(guān)蛋白、微管修飾蛋白、達(dá)因蛋白。微管組織中心可以指揮微管的組裝與去組裝，它可以根據(jù)細(xì)胞的生理需要，調(diào)節(jié)微管的活動(dòng)。 答：微管組織中心是指微管裝配的發(fā)生處。 微管組織中心（ MTOC） ：微管在生理狀態(tài)及實(shí)驗(yàn)處理解聚后重新裝配的發(fā)生處稱為微管組織中心 。（ 3）具有肌性收縮作用（ 4）與其他細(xì)胞器相連，關(guān)系密切。 答：微絲的 化學(xué)組成 ：主要成分為肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白，肌球蛋白起控制微絲的形成、連接、蓋帽、切斷的作用，也可影響微絲的功能。 胞質(zhì)分裂環(huán) ：在有絲分裂末期，兩個(gè)即將分裂的子細(xì)胞之間產(chǎn)生一個(gè)收縮環(huán)。 肌動(dòng)蛋白是一種中等大小的蛋白質(zhì) , 由 375 個(gè)氨基酸殘基組成 , 并且是由一個(gè)大的、高度保守的基因編碼。 肌動(dòng)蛋白： 是微絲的結(jié)構(gòu)蛋白 , 以兩種形式存在 , 即單體和多聚體。 多細(xì)胞生物是由不同類型的細(xì)胞組成的社會(huì) , 而且是一個(gè)開放的社會(huì)，這 個(gè)社會(huì)中的單個(gè)細(xì)胞間必須協(xié)調(diào)它們的行為，為此，細(xì)胞建立通訊聯(lián)絡(luò)是必需的。 十八、 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的功能 一、 細(xì)胞基質(zhì)的含義 二、 細(xì)胞基質(zhì)的功能 （一） 蛋白質(zhì)、脂酸合成場所 （二） 與細(xì)胞骨架先關(guān)的功能：骨架是胞質(zhì)基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)成分 （三） 與細(xì)胞膜相關(guān)的功能：胞質(zhì)基質(zhì)產(chǎn)生區(qū)室化 （四） 蛋白質(zhì)修飾和選擇性降解 1. 蛋白質(zhì)修飾 （ 1） 輔酶或輔基與酶的共價(jià)結(jié)合 （ 2） 磷酸化與去磷酸化 （ 3） 蛋白質(zhì)糖基化作用 （ 4） 甲基化作用 （ 5） ?；饔? 2. 控制蛋白質(zhì)的壽命 泛素化的過程： ① 泛素活化酶 E1 通過形成酰基 腺苷酸中介物使泛素 C 端激活，耗 ATP ② 轉(zhuǎn)移活化的泛素分子與泛素結(jié)合酶 E2 的半胱氨酸殘基結(jié)合 ③ 異肽鍵形成 : 與 E2 結(jié)合的泛素羧基和靶蛋白賴氨酸側(cè)鏈的氨基之間形成異肽鍵， E3 催化 3. 降解變性和錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì) 4. 幫助變性或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)重新折疊，形成正確的分子構(gòu)象 簡述細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的功能。蛋白質(zhì)分選的四種基本類型： 蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)：主要指在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、葉綠體和過氧化物酶體等細(xì)胞器。 何為蛋白質(zhì)分選？細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選的基本途徑、分選類型是怎樣的？ 答： 蛋白質(zhì)的分選 ：細(xì)胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成，隨后或在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成，然后，通過不同途徑轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的特定部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體，參與細(xì)胞的生命活動(dòng)的過程。外被蛋白是一個(gè)大的復(fù)合體，稱為外被體 (coatomer)。網(wǎng)格蛋白小泡參與反面高爾基體和質(zhì)膜之間的選擇性分泌和內(nèi)吞活動(dòng) ,但是從高爾基體反面網(wǎng)絡(luò)形成的披網(wǎng)格蛋白小泡與從細(xì)胞質(zhì)膜形成的披網(wǎng)格蛋白小泡所用的銜接蛋白 (adaptin)是不同的。 信號(hào)假說的主要內(nèi)容是什么？ 答：分泌蛋白在 N端含有一信號(hào)序列，稱信號(hào)肽，由它指導(dǎo)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到 ER膜；多肽邊合成邊通過 ER膜上的 水通道進(jìn)入 ER腔， 13 在蛋白合成結(jié)束前信號(hào)肽被切除。?？康鞍缀袃蓚€(gè)亞基，一個(gè)亞基暴露于細(xì)胞質(zhì)的親水部分，由 640 個(gè)氨基酸組成；另一個(gè)亞基是嵌入膜內(nèi)的疏水部分，由 300 個(gè)氨基酸所組成。 SRP 上有三個(gè)功能部位 : 翻譯暫停結(jié)構(gòu)域 (P9/P14)、信號(hào)肽識(shí)別結(jié)合位點(diǎn) (P54)、 SRP 受體蛋白結(jié)合位點(diǎn) (P68/P72)。又稱定向轉(zhuǎn)運(yùn)。 十五、 信號(hào)假說與蛋白質(zhì)分選信號(hào) 信號(hào)假說 ： 1975 年 和 等根據(jù)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)依據(jù)提出，蛋白合成的位置是由其 N端氨基酸序列決定的。其功能是進(jìn)行電子傳遞 ,H+的傳遞及氧的利用 , 最后產(chǎn)生 H2O 和 ATP。該學(xué)說認(rèn)為 : 在電子傳遞過程中 , 伴隨著質(zhì)子從線粒體內(nèi)膜的里層向外層轉(zhuǎn)移 , 形成跨膜的氫離子梯度 ,這種勢能驅(qū)動(dòng)了氧化磷酸化反應(yīng) (提供了動(dòng)力 ), 合成了 ATP。線粒體是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和形成 ATP的主要場所 ,有細(xì)胞 動(dòng)力工廠 (power plant)之稱。在這個(gè)過程中，電子傳遞是一個(gè)開放的通道，故稱為非循環(huán)式光和磷酸化。間質(zhì)中懸浮有由膜囊構(gòu)成的類囊體，內(nèi)含葉綠體 DNA。運(yùn)輸時(shí)需要先建立電化學(xué)梯度，在動(dòng)物細(xì)胞主要是靠鈉泵，在植物細(xì)胞則是由 H+泵建立的 H＋質(zhì)子梯度。特異蛋白的“協(xié)助”使物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)速率增加，轉(zhuǎn)運(yùn)特異性增強(qiáng) 通道蛋白 ：由幾個(gè)蛋白亞基在膜上形成的孔道，能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過簡單的自由擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)從膜的一側(cè)到另一側(cè)。 載體蛋白 ：是一類膜內(nèi)在蛋白，幾乎所有類型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白 10 質(zhì)分子。 去垢劑： 是能使蛋白質(zhì)變性的一類化學(xué)物。 外周蛋白可用高鹽或堿性 pH 條件分離。 9 跨膜蛋白可再分為單次跨膜、多次跨膜、多亞基跨膜等。 十、 膜蛋白 （一） 膜蛋白的類型 A． 外在膜蛋白與膜脂結(jié)合的方式 （ 1） 水溶性蛋白 （ 2） 離子鍵其它弱鍵與膜表面蛋白、脂分子結(jié)合 （ 3） 提高溫度、離子強(qiáng)度，脫離 B．脂錨定膜蛋白與膜脂結(jié)合的方式： （ 1） 脂酸 →蛋白 N端甘氨酸殘基 （ 2） 烴鏈→蛋白 C端半胱氨酸殘基 （ 3） 糖脂→錨定 在脂膜上 B． 內(nèi)在膜蛋白與膜脂結(jié)合的方式（二） （ 1） 跨膜結(jié)構(gòu)域與脂雙層疏水核心作用：最主要、最基本 （ 2） 跨膜結(jié)構(gòu)域兩端的帶電荷殘基 —— 磷脂分子極性頭帶負(fù)電—— 離子鍵 直接作用：正電荷殘基 間接作用：負(fù)電荷殘基（由 ca2+、 Mg2+介導(dǎo)） （ 3） 胞質(zhì)側(cè)半胱氨酸 +脂酸 →插入脂雙層 跨膜結(jié)構(gòu)域 — 膜脂 具體作用方式： a. α螺旋 跨膜區(qū) 20 個(gè)疏水 AA 外部疏水側(cè)鏈與脂肪酸連作用 b. β 折疊片 主要組成跨膜結(jié)構(gòu)域 c. 雙性α螺旋 外側(cè)非極性 內(nèi)側(cè)極性鏈 （二） 去垢劑 整合蛋白 : 又稱內(nèi)在蛋白 (intrinsic protein)、跨膜蛋白 (transmembrane protein), 部分或全部鑲嵌在細(xì)胞膜中或內(nèi)外兩側(cè)，以非極性氨基酸與脂雙分子層的非極性疏水區(qū)相互作用而結(jié)合在質(zhì)膜上。 膜脂分布的不對(duì)稱性 表現(xiàn)在：①膜脂雙分子層內(nèi)外層所含脂類分子的種類不同；②脂雙分子層內(nèi)外層磷脂分子中脂肪酸的飽和度不同；③脂雙分子層內(nèi)外層磷脂所帶電荷不同；④糖脂均分布在外層脂質(zhì)中。在構(gòu)建導(dǎo)彈人工脂質(zhì)體時(shí) ,不僅要 8 將被運(yùn)載的分子或藥物包入脂質(zhì)體的內(nèi)部水相 ,同時(shí)要在脂質(zhì)體的膜上做些修飾 ,如插入抗體便于脂質(zhì)體進(jìn)入機(jī)體后尋靶。 流動(dòng)鑲嵌模型 的主要內(nèi)容：脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架，蛋白質(zhì)分子或鑲在表面或部分或全部嵌入其中或橫跨整個(gè)脂類層。單位膜模型的不足點(diǎn)： ⑴膜是靜止的、不變的。在低溫下這些區(qū)域能抵抗非離子去垢劑的抽提，所以又稱為抗去垢劑膜（ detergentresistant membranes， DRMs）。還有，該模型也不能解釋為什么有的膜蛋白很容易被分離，有些則很難。 單位膜模型： 1959 年 所提出。其一 ,蛋白質(zhì)不是伸展的片層 ,而是以折疊的球形鑲嵌在脂雙層中 ,蛋白質(zhì)與膜脂的結(jié)合程度取決于膜蛋白中氨基酸的性質(zhì)。 紅細(xì)胞質(zhì)膜蛋白及膜骨架的成分是什么？ SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳 分析血影蛋白成分，紅細(xì)胞膜蛋白主要包括血影蛋白（或稱紅膜肽）、錨蛋白、帶 3 蛋白、帶 蛋白和肌動(dòng)蛋白，還有一些血型糖蛋白。 體外培養(yǎng)的細(xì)胞，不論是原代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞，一般不保持體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)，而呈現(xiàn)出兩種基本形態(tài)即 和 。 6 顯微操作技術(shù)： 是指在高倍復(fù)式顯微 鏡下，利用顯微操作器（ micromanipulator）進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作的一種方法。 細(xì)胞系 ：在體外培養(yǎng)的條件下，有的細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變，而且?guī)в邪┘?xì)胞 特點(diǎn)，失去接觸抑制，有可能無限制地傳下去的傳代細(xì)胞。 六、細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工程 一、 細(xì)胞培養(yǎng) （一） 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) （二） 植物細(xì)胞培養(yǎng) 二、 細(xì)胞工程 （一） 細(xì)胞融合與單克隆抗體技術(shù) （二） 顯微操作技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng) ：把機(jī)體內(nèi)的組織取出后經(jīng)過分散（機(jī)械方法或 酶消化）為單個(gè)細(xì) 胞，在人工培養(yǎng)的條件下，讓其在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)基上繼續(xù)生長與增殖。 ③分辨率及有效放大本領(lǐng)不同 ：光鏡的分辨率為 μ m左右，放大倍數(shù)為 1000倍；電鏡的分辨率可達(dá) ，放大倍數(shù) 106倍。 試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。 電鏡超薄切片技術(shù)包括 ______、 、 ___ 、 等 四個(gè)步驟。它們包括酸性嗜熱菌，極端嗜鹽菌及甲烷微生物。支原體可以在培養(yǎng)基上培養(yǎng)，也能在寄主細(xì)胞中繁殖。支原體形態(tài)多變 ,有圓形、絲狀或梨形，光鏡下難以看清其結(jié)構(gòu)。以后內(nèi)膜系統(tǒng)的一部分包圍了染色質(zhì)，于是就形成了最原始的細(xì)胞核。 ，為雙層被膜所包裹，有自己特 有的基因組、核酸合成系統(tǒng)與蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)，其內(nèi)膜上有與氧化磷酸化相關(guān)的電子傳遞鏈 【從遺傳過程】 ，蛋白質(zhì)的合成在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，而原核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的合成交聯(lián)在一起進(jìn)行。與光合磷酸化相關(guān) 的電子傳遞系統(tǒng)位于由葉綠體的內(nèi)膜內(nèi)褶形成的片層上 。 、肌球蛋白等構(gòu)成的微纖維系統(tǒng)，后者與胞質(zhì)環(huán)流、吞噬作用等密切相關(guān)；而原核生物卻沒有這種系統(tǒng)，因而也沒有胞質(zhì)環(huán)流和吞噬作用。 原核生物和真核生物區(qū)別（從細(xì)胞結(jié)構(gòu)、基因組結(jié)構(gòu)和遺傳過程分析）主要差別 2 由真核細(xì)胞構(gòu)成的生物。真核細(xì)胞的種類繁多 , 既包括大量的單細(xì)胞生物和原生生物 (如原生動(dòng)物和一些藻類細(xì)胞 ), 又包括全部的多細(xì)胞生物 (一切動(dòng)植物 )的細(xì)胞。 二、原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的比較 原核細(xì)胞 組成原核生物的細(xì)胞。 細(xì)胞 學(xué)說： 1838— 1839年， 和 共同提出：一切植物、動(dòng)物都是由細(xì)胞組成的，細(xì)胞是一切動(dòng)植物的 。 1 一、細(xì)胞學(xué)說的建立及其意義 細(xì)胞學(xué) cytology：研究細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能和生活史的科學(xué)。對(duì)于生殖過程中的細(xì)胞以及核的行為的研究，對(duì)于發(fā)展遺傳和進(jìn)化的理論起了很大作用。其 意義 在于：明確了整個(gè)自然界在結(jié)構(gòu)上的統(tǒng)一性，即動(dòng)、植物的各種細(xì)胞具有共同的基本構(gòu)造、基本特性，按共同規(guī)律發(fā)育，有共同的生命過程；推進(jìn)了人類對(duì)整個(gè)自然界 的認(rèn)識(shí)；有力地促進(jìn)了自然科學(xué)與哲學(xué)的進(jìn)步。 遺傳信息量大，并且有特化的膜相結(jié)構(gòu)。遺 傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化 ，真核細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的 轉(zhuǎn)錄與翻譯有嚴(yán)格的階段性與區(qū)域性，而在原核細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時(shí)進(jìn)行。 真核細(xì)胞有發(fā)達(dá)的微管系統(tǒng)，其鞭毛（ 纖毛）、中心粒、紡錘體等都與微管有關(guān)，原核生物則否。 真核生物的植物含有葉綠體，它們亦為雙層膜所包裹，也有自己特有的基因組和合成系統(tǒng)。 （如甲藻等）的細(xì)胞以外，染色體上都有 5種或 4種組蛋白與DNA結(jié)合，形成核小體 ；而在原核生物則無 。 最原始的真核生物的直接祖先很可能是一種異常巨大的原核生物，體內(nèi)具有由質(zhì)膜內(nèi)褶而成的象內(nèi)質(zhì)網(wǎng)那樣的內(nèi)膜系統(tǒng)和原始的微纖維系統(tǒng)，能夠作變形運(yùn)動(dòng) 和吞噬。 三、細(xì)胞的基本共性 3 蛋白體系的生物膜 ：所有細(xì)胞都有 DNA 與 RNA 的遺傳裝置 ：細(xì)胞都以一分為二的分裂方式分裂繁殖 質(zhì)合成的機(jī)器 核糖體 四、原核細(xì)胞與古核細(xì)胞 一、 原核細(xì)胞 二、 最小最簡單的細(xì)胞 支原體 三、 原核細(xì)胞的兩個(gè)代表類群 —— 細(xì)菌和藍(lán)藻 （一） 細(xì)菌細(xì)胞 1. 細(xì)菌細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu) （ 1） 細(xì)胞壁 （ 2） 細(xì)胞質(zhì)膜 （ 3） 中膜體 （ 4） 莢膜 2. 細(xì)菌細(xì)胞的核區(qū)與基因組 3. 細(xì)菌細(xì)胞核外 DNA 4. 細(xì)菌細(xì)胞的核糖體 5. 細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)生孢子 6. 細(xì)菌細(xì)胞的增殖及其調(diào)控 （ 1） 細(xì)菌細(xì)胞的增殖 （ 2） 細(xì)菌細(xì)胞增殖的調(diào)控 （二） 藍(lán)藻細(xì)胞 1. 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 2. 細(xì)胞分裂 3. 異形胞 四、 古核細(xì)胞（古細(xì)菌） （一） 古細(xì)菌的細(xì)胞壁 （二） 古細(xì)菌的質(zhì)膜 （三） DNA 與基因結(jié)構(gòu) （四）