【正文】 被誘導(dǎo)與 GTP 結(jié)合，這兩種方式都使得信號蛋白結(jié)合上一個或多個磷酸基團(tuán)，被磷酸化的蛋白有了活性后，通常反過來引起磷酸通路中的下游蛋白磷酸化，當(dāng)信號消失后，信號蛋白就會去磷酸化。該信號途徑為：激素→識別并與 G 蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合→激活 G 蛋白→活化腺苷酸環(huán)化酶→胞內(nèi)的 cAMP 濃度升高→激活 PKA→基因調(diào)控蛋白→基因轉(zhuǎn)錄。 Na+依賴的磷酸化和 K+依賴的去磷酸化引起構(gòu)象變化有序交替發(fā)生。 六、 論述題 試論述 Na+K+泵的結(jié)構(gòu)及作用機(jī)理。該信號途徑涉及的反應(yīng)鏈可表示為：激素→ G 蛋白偶聯(lián)受體→ G 蛋白→腺苷酸環(huán)化化酶→ cAMP → cAMP 依賴的蛋白激酶 A→基因調(diào)控蛋白→基因轉(zhuǎn)錄。⑵產(chǎn)生第二信使。 cGMP 可降低血管平滑肌中的 Ca2+離子濃 度，引起血管平滑肌的舒張，血管擴(kuò)張、血流通暢。（ ） 硝酸甘油治療心絞痛的作用原理是：硝酸甘油在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成 NO，從而可舒張血管，減輕心臟負(fù)荷和心肌的需氧量。（ √ ） 胞外信號通過跨膜受體才能轉(zhuǎn)換成胞內(nèi)信號。（ √ ） 協(xié)助擴(kuò)散是一種不需要消耗能量、不需要載體參與的被動運輸方式。 A、蛋白激酶 A B、糖原合成酶 C、糖原磷酸化酶 D、腺苷酸環(huán)化酶 Ras 基因的哪一種突變有可能引起細(xì)胞的癌變（ A ） A、突變后的 Ras 蛋白不能水解 GTP B、突變后的 Ras 蛋白不能結(jié)合 GTP C、突變后的 Ras 蛋白不能結(jié)合 Grb2 或 Sos D、突變后的 Ras 蛋白不能結(jié)合 Raf （ D ）不是細(xì)胞表面受體。 A、 cAMP B、 cGMP C、 DG D、 NO Na+K+泵由α、β兩個亞基組 成，當(dāng)α亞基上的（ C ）磷酸化才可能引起α亞基構(gòu)象變化，而將 Na+泵出細(xì)胞外。 由 G 蛋白偶聯(lián)受體所 介 導(dǎo)有細(xì)胞信號通路主要包括 __cAMP____信號通路和 __雙信使系統(tǒng) ____信號通路。 10 在磷脂酰肌醇信號通路中胞外信號分子與細(xì)胞 G 蛋白偶聯(lián) 表面受體結(jié)合， 激活 質(zhì)膜上的磷脂酶 C，使質(zhì)膜上 二磷酸磷脂酰肌醇 水解成 1,4,5三磷酸肌醇（ IP3）和二酰基甘油（ DG）兩個第二信使，胞外信號轉(zhuǎn)換為胞內(nèi)信號，這一信號系統(tǒng)又稱為 雙信使系統(tǒng) 。主要參與細(xì)胞生長和分化的調(diào)控。 1蛋白激酶 A ：稱為依賴于 cAMP 的蛋白激酶 A，是由四個亞基組成的復(fù)合物，其中兩個是調(diào)節(jié)亞基，兩個是催化亞基； PKA 的功能是將 ATP 上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到特定蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸殘基上，使蛋白質(zhì)被磷酸化，被磷酸化的蛋白質(zhì)可以調(diào)節(jié)下游靶蛋白的活性。 1 G 蛋白耦聯(lián)受體 是指配體 — 受體復(fù)合物與靶蛋白的作用要通過與 G 蛋白的偶聯(lián)，在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使，從而將胞外信號跨膜傳遞到胞內(nèi)影響細(xì)胞的行為。細(xì)胞內(nèi)重要的第二信使有： cAMP、 cGMP、 DAG、 IP3 等。 信號分子 生物體內(nèi)的某些化學(xué)分子，如激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長因子等，在細(xì)胞間和細(xì)胞內(nèi)傳遞信息，特稱為信號分子。 鈉 — 鉀泵（ Na+— K+ pump）又稱 Na+ K+ ATPase，能水解 ATP，使 a 亞基帶上磷酸集團(tuán)或去磷酸化，將 Na+泵出細(xì)胞，而將 K+泵入細(xì)胞的膜裝運載體蛋白。 細(xì)胞通訊 一個細(xì)胞發(fā)出的信息通過介質(zhì)傳遞到另一個細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。（ 3）是接受外界信號的傳感器，使細(xì)胞對外界環(huán)境的變化產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)。（ 對 ） 8 外在 (外周 )膜蛋白為水不溶性蛋白，形成跨膜螺旋，與膜結(jié)合緊密，需用去垢劑使膜崩解后才可分離。 外周蛋白 ； 為水溶性蛋白 ,靠離子鍵或其它弱鍵與膜表面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭部非共價結(jié)合，易分離。 ⑥ 生物樣品制備技術(shù)不同：光鏡樣品制片技術(shù)較簡單，通常有組織切片、細(xì)胞涂片、組強(qiáng)壓片和細(xì)胞滴片 等；而電鏡樣品的制備較復(fù)雜，技術(shù)難度和費用都較高，在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作，還需要制備超薄切片 七、翻譯 cell line ； 細(xì)胞系 cell strain； 細(xì)胞株 cell culture ； 細(xì)胞培養(yǎng) cell engineering； 細(xì)胞工程 cell fusion； 細(xì)胞融合 primary culture cell ； 代細(xì)胞 monoclonal antibody； 單克隆抗體 第四章 細(xì)胞膜與細(xì)胞表面 一、名詞 解釋 生物膜； 把細(xì)胞所有膜相結(jié)構(gòu)稱為生物膜。 ② 透鏡不同：光鏡為玻璃透鏡；電鏡為電磁透鏡。相差顯微鏡的樣品不需染色，可以觀察活細(xì)胞，甚至研究細(xì)胞核、線粒體等到細(xì)胞器的形態(tài)。但是電子顯微鏡：樣品制備更加復(fù)雜；鏡筒需要真空，成本更高；只能觀察 “死 ”的樣品，不能觀察活細(xì)胞。差速離心是 一種較為簡便的分離法，常用于細(xì)胞核和細(xì)胞器的分離。（ x ） 五、簡答題 超薄切片的樣品制片過程包括哪些步驟？ 答案要點：固定，包埋，切片，染色 。（ √） 細(xì)胞株是指在體外培養(yǎng)的條件下，細(xì)胞發(fā)生遺傳突變且?guī)в邪┘?xì)胞特點，有可能無限制地傳下去的傳代細(xì)胞。 A、能無限增殖 B、不能增殖分裂很快死亡 C、經(jīng)過有限增殖后死亡 D、一般進(jìn)行有限增殖后死亡，但少數(shù)情況下某些細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變，獲得無限增殖能 力 1細(xì)胞培養(yǎng)時，要保持細(xì)胞原來染色體的二倍體數(shù)量，最多可傳代培養(yǎng)（ B ）代。 A、單克隆抗體 B、多克隆抗體 C、單鏈抗體 D、嵌合抗體 適于觀察培養(yǎng)瓶中活細(xì)胞的顯微鏡是（ C ） A、熒光顯微鏡 B、相差顯微鏡 C、倒置顯微鏡 D、掃描電鏡 冰凍蝕刻技術(shù)主要用于（ A ） A、電子顯微鏡 B、光學(xué)顯微鏡 C、微分干涉顯微鏡 D、掃描隧道顯微鏡 5 分離細(xì)胞內(nèi)不同細(xì)胞器的主要技術(shù)是（ A ） A、超速離心技術(shù) B、電泳技術(shù) C、層析技術(shù) D、光鏡技術(shù) Feulgen 反應(yīng)是一種經(jīng)典的細(xì)胞化學(xué)染色方法，常用于細(xì)胞內(nèi)（ C ） A、蛋白質(zhì)的分布與定位 B、脂肪的分布與定位 C、 DNA 的分布與定位 D、 RNA 的分布與定位 流式細(xì)胞術(shù)可用于測定（ D ） A、細(xì)胞的大小和 特定細(xì)胞類群的數(shù)量 B、分選出特定的細(xì)胞類群 C、細(xì)胞中 DNA、 RNA 或某種蛋白的含量 D、以上三種功能都有 真核細(xì)胞和原核細(xì)胞的最主要區(qū)別是（ A ）。 雜交瘤是通過 （小鼠骨髓）瘤 細(xì)胞 細(xì)胞 和 B 淋巴細(xì)胞 種細(xì)胞的融合實現(xiàn)的，由此所分泌的抗體稱為 單克隆抗體 。 電鏡超薄切片技術(shù)包括 固定，包埋，切片，染色 。 傳代細(xì)胞培養(yǎng)； 原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細(xì)胞匯合以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭，將影響細(xì)胞的生長，這一分離培養(yǎng)稱為傳代細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞融合； 兩個或多個細(xì)胞融合成一個雙核細(xì)胞或多核細(xì)胞的現(xiàn)象。 ⑥ 沒有細(xì)胞就沒有完整的生命 試論述原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最根本的區(qū)別。 六、論述題 如何理解“細(xì)胞是生命活動的基本單位”。（ x ） 細(xì)菌核糖體的沉降系數(shù)為 70S， 由 50S 大亞基和 30S 小亞基組成。（√ ） 細(xì)菌的基因組主要是由一個環(huán)狀 DNA 分子盤繞而成，特稱為核區(qū)或擬核。 A、生物大分子→病毒→細(xì)胞 B、生物大分子→細(xì)胞和病毒 C、生物大分子→細(xì)胞→病毒 D、都不對 動物細(xì)胞特有的細(xì)胞器是（ C ） 3 A、細(xì)胞核 B、線粒體 C、中心粒 D、質(zhì)體 在真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中共同存在的細(xì)胞器是（ D ） A、中心粒 B、葉綠體 C、溶酶體 D、核糖體 原核細(xì)胞的呼吸酶定位在（ B ）。 細(xì)菌細(xì)胞表面主要是指 細(xì)胞壁 和 細(xì)胞膜 及其特化結(jié)構(gòu) 間體 ， 莢膜 和 鞭毛 等。 原核細(xì)胞的遺傳信息量 小 ，遺傳信息載體僅由一個 環(huán) 狀的 DNA 構(gòu)成，細(xì)胞內(nèi)沒有專門的 細(xì)胞器 和 核膜 ,其細(xì)胞膜具 有 多功能性 性。 二、填空題 所有細(xì)胞的表面均有由 脂類 和 蛋白質(zhì) 構(gòu)成的 細(xì)胞膜 ；所有 的細(xì)胞都含有 兩 種核酸；所有細(xì)胞都以 二分分裂 方式增殖；所有細(xì)胞內(nèi)均存在蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)器 核糖體 。人類亟待通過以上四個方面的研究，闡明當(dāng)今主 要威脅人類的四大疾病：癌癥、心血管疾病、艾滋病和肝炎等傳染病的發(fā)病機(jī)制，并采取有效措施達(dá)到治療的目的。 細(xì)胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容主要包括兩個大方面：細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞重要生命活動。 三、選擇題 第一個觀察到活細(xì)胞有機(jī)體的是（ B ）。 1 第一章 緒論 一、概念 細(xì)胞生物學(xué) cell biology； 是研究細(xì)胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué)，是在顯微、亞顯微和分子水平上，以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能，細(xì)胞增殖、分化、衰老與凋亡，細(xì)胞信號傳遞，真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控，細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門學(xué)科。 1838— 1839 年， 施萊登（ Schleiden） 和 施旺（ Schwann） 共同提出：一切植物、動物都是由細(xì)胞組成的，細(xì)胞是一切動植物的 基本單位 。 答 :細(xì)胞生物學(xué)是研究細(xì)胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué) ,它是在三個水平 (顯微、亞顯微與分子水平 )上，以研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞衰老開發(fā)商地亡、細(xì)胞信號傳遞、真核細(xì)胞基因表達(dá)與調(diào)控、細(xì)胞起源與進(jìn)化等為主要內(nèi)容的一門科 學(xué)。 答：當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)研究主要集中在以下四個領(lǐng)域： ⑴ 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)； ⑵ 細(xì)胞增殖調(diào)控； ⑶細(xì)胞衰老、凋亡及其調(diào)控； ⑷ 基因組與后基因組學(xué)研究。 原核細(xì)胞； 沒有由膜圍成的明確的細(xì)胞核、體積小、結(jié)構(gòu)簡單、進(jìn)化地位原始的細(xì)胞。 病毒的增殖一般可分為 病毒侵入細(xì)胞，病毒核酸的侵染 和 病毒核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的合成；病毒的裝配、成熟與釋放 三個階段。 原核細(xì)胞和真核細(xì)胞核糖體的沉降系數(shù)分別為 70S 和 80S 。 三、選擇題 大腸桿菌的 核糖體的沉降系數(shù)為（ B ） A、 80S B、 70S C、 60S D、 50S 植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器是（ B ） A、線粒體 B、葉綠體 C、高爾基體 D、核糖體 在病毒與細(xì)胞起源的關(guān)系上，下面的（ C ）觀戰(zhàn)越來越有說服力。（ √） 細(xì)菌的 DNA 復(fù)制、 RNA 轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的翻譯可以同時進(jìn)行，沒有嚴(yán)格的時間上的階段性與空間上的區(qū)域性。（ √ ） 核糖體僅存在于真核細(xì)胞中，而在原核細(xì)胞沒有。因此作為比支原體更小、更簡單的細(xì)胞，又要維持細(xì)胞生命活動的基本要求，似乎是不可能存在的，所以說支原體是最小、最簡單的細(xì)胞。 ② 細(xì)胞具有獨立的、有序的自控代謝體系，細(xì)胞是代謝與功能的基本單位 ③ 細(xì)胞是有機(jī)體生長與發(fā)育的基礎(chǔ) ④ 細(xì)胞是遺傳的基本單位，細(xì)胞具有遺傳的全能性 ⑤ 細(xì)胞是生命起源和進(jìn)化的基本單位。 七、翻譯 virus ； 病毒 bacteria ； 、細(xì)菌 第三章 細(xì)胞生物學(xué)研究方法 一、名詞解釋 原代細(xì)胞培養(yǎng) ； 直接從有機(jī)體取出組織，通過組織塊長出單層細(xì)胞，或者用酶消化或機(jī)械方法將組織分散成單個細(xì)胞，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 二、填空題 熒光顯微鏡是以 紫外光 為光源，電子顯微鏡則是以 電子束 為光源。 電子顯微鏡使用的是 電磁 透鏡，而光學(xué)顯微鏡使用的是 玻璃 透鏡。 三、選擇題 由小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某一 B 細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體稱（ A ）。 A、獲得細(xì)胞不同切 面的圖像 B、觀察活細(xì)胞 C、定量分析細(xì)胞中的化學(xué)成分 D、觀察細(xì)胞表面的立體形貌 建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞是通過下列技術(shù)構(gòu)建立（ A） A、細(xì)胞融合 B、核移植 C、病毒轉(zhuǎn)化 D、基因轉(zhuǎn)移 1動物細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下生長情況是（ C ）。廣泛用于測定細(xì)胞和細(xì)胞器中的核酸、氨基酸、蛋白質(zhì)等。（ x ） 6 光鏡和電鏡的切片均可用載玻片支持。 答案要點：二者都是依靠離心力對細(xì)胞勻漿懸浮扔中的顆粒進(jìn)行分離的技術(shù)。 為什么電子顯微鏡不能完全替代光學(xué)顯微鏡？ 答案要點：電子顯微鏡用電子束代替了光束，大大 提高了分辨率，電子顯微鏡相對光學(xué)顯微鏡是個飛躍。 相差顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用？ 答案要點：相差顯微鏡通過安裝特殊裝置（如相差板等）將光波通過樣品的光程