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《凝膠過濾色譜填料》ppt課件-全文預覽

2024-11-24 17:52 上一頁面

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【正文】 品回收率。 ! 見書本 247頁 凝膠過濾色譜的應用 ? 例 利用木瓜蛋白酶水解大豆分離蛋白制備大豆肽的水解液,水解液經(jīng) Sephadex G25凝膠過濾色譜進行分子量分級,根據(jù)分離圖譜確定柱層析的最佳條件。但用于生物高分子,如蛋白質(zhì)、核酸等分離時,還是以進行表面親和處理為宜。需要 注意的一點是,因為在溶液中 蛋白質(zhì)常呈球形 ,而 PEG和葡聚糖則是線性分子,依據(jù)此工作曲線會帶來很大的誤差。因此,用 作凝膠分離介質(zhì)的 硅膠,必須具有較 高的孔容。 。 5~100nm之 間,以適應不同分子量 范圍物質(zhì)的分離只需。 早期 理想的高效凝膠色譜填料應具備以下性能 : ,能耐受 幾兆帕的操作壓力。 ②分子體積的大小,造成了在孔中擴散途徑的差異,溶質(zhì)分子只能進入尺寸比它大的孔; 如果溶質(zhì)分子的尺寸大于孔徑,則只能從孔旁流過。 主要缺點: 分辨率及峰 容量均相對 較低。 體積排除色譜( SEC) 與其他色譜相比較的優(yōu)點: ① 出峰迅速,任何組分的保留體積均在 Vi 和 V0之間,且不需要梯度淋洗 。
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