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正文內(nèi)容

全面組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室及操作技術(shù)-全文預(yù)覽

  

【正文】 營(yíng)養(yǎng)豐富 ◆ 不需要添加更多的有機(jī)附加物 二、幾種常見培養(yǎng)基的特點(diǎn) White培養(yǎng)基 ◆ 1943年由 White為培養(yǎng)番茄根尖而設(shè)計(jì) ◆ 1963年作了改良,提高 MgSO4的濃度和增加硼元素 ◆ 無(wú)機(jī)鹽濃度較低 ◆ 使用廣泛 ◆ 在生根培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)中有良好的效果 大量元素 含量 微量元素 含量 鐵鹽 含量 有機(jī)物 含量 其他 含量 KNO3 80 H3BO3 Fe2(SO4)3 肌醇 100 蔗糖 30000 Ca(NO3)2 4H2O 300 MnSO4 4H2O 煙酸 瓊脂 8000 MgSO4 7H2O 720 ZnSO4 7H2O 鹽酸硫胺素 NaH2PO4 4H2O MoO3 01 鹽酸吡哆辛 KCl 65 CuSO4 5H2O 1 甘氨酸 3 Na2SO4 200 附表: White培養(yǎng)基 B5培養(yǎng)基 ◆ 1968年由 Gamb等為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì) ◆ 含有較低的銨鹽 ◆ 較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素 組成成分 數(shù)量 (mg/l) 組成成分 數(shù)量 (mg/l) KNO3 2500 FeSO47H2O 250 蔗糖 40 (NH4)2SO4 134 pH KI 肌醇 100 H3BO4 煙酸 MnSO46H2O 鹽酸硫銨 10 Na2EDTA B5培養(yǎng)基的組成和配方 N6培養(yǎng)基 ◆ 1974年朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)設(shè)計(jì) ◆ KNO3和( NH4) SO4含量高,不含鉬 組成成分 數(shù)量 (mg/l) 組成成分 (mg/l) KNO3 Na2- EDTA CaCl24H2O 鹽酸硫銨 ZnSO4 培養(yǎng)基分裝封口后立刻進(jìn)行滅菌,至少在 24h內(nèi)完成滅菌程序。 檢驗(yàn)方法: 將培養(yǎng)基置于培養(yǎng)室中 3天,若沒(méi)有污染現(xiàn)象,說(shuō)明滅菌可靠,可以使用。 五、培養(yǎng)基的保存 。常溫下保存時(shí)要進(jìn)行防塵和避光處理。 四、培養(yǎng)基的滅菌 滅菌鍋有很多種,實(shí)驗(yàn)室中常用手提式高壓蒸汽滅菌鍋,使用時(shí)要注意一下幾點(diǎn): 鍋中應(yīng)放足量的水,以免造成空燒或干燒; 裝鍋時(shí)不要過(guò)度傾斜,可保持內(nèi)部有一定的空 間,利于蒸汽流動(dòng); 增壓前高壓鍋內(nèi)的空氣必須排凈,否則易影響 滅菌效果; 滅菌過(guò)程中,應(yīng)盡量保持壓力恒定,嚴(yán)格遵守滅菌時(shí)間; 排氣降壓時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行; 只有待高壓鍋內(nèi)壓力表指針恢復(fù)到零后,才能開啟壓力鍋; 高壓鍋工作時(shí),應(yīng)有專人看守。包括配制過(guò)程中所需電爐、酸度計(jì)、高壓滅菌鍋等設(shè)備及其他玻璃器皿的清洗和準(zhǔn)備 試劑、藥品的準(zhǔn)備 根據(jù)培養(yǎng)基的配方、母液擴(kuò)大倍數(shù)及需要配制的培養(yǎng)基體積計(jì)算所需各種母液及其他附加物的量 三、培養(yǎng)基的配制 具體操作如下: 取規(guī)定數(shù)量的糖源和凝固劑置于燒杯或搪瓷鍋內(nèi),加蒸餾水加熱使之溶解,并不斷攪拌; 根據(jù)計(jì)算所需量依次加入大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液及其他特殊的附加物,攪拌均勻; 加水定容至規(guī)定體積,攪拌均勻; 調(diào)整培養(yǎng)基的 pH值; 分裝; 封口。7H2O MgSO47H2O 激動(dòng)素 Na2MoO42H2O 150 CuSO4 馬鈴薯 碳源 碳源物質(zhì)包括糖類物質(zhì)、醇類物質(zhì)和有機(jī)酸,以 糖類 物質(zhì)最重要。 菊花 缺錳典型癥狀: 葉脈間失綠褪色,但葉脈仍保持綠色,脈間出現(xiàn)壞死斑,缺素癥狀由幼葉開始。隨病勢(shì)發(fā)展,葉片失綠程度加重,出現(xiàn)整葉變?yōu)榘咨?,葉緣枯焦,引起落葉。 Mg、 S、 Ca是葉綠素的組成成分,又是激酶的
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