【正文】 實(shí)施課題制管理，在課題責(zé)任人負(fù)責(zé)的基礎(chǔ)上，分“課題 子課題”兩級(jí)管理，由課題責(zé)任人負(fù)責(zé)簽訂課題分級(jí)合同，并報(bào)歸口部門備案。公司已形成一個(gè)以三葉青為重點(diǎn)，其他中藥材種植為輔的特色農(nóng)業(yè)生產(chǎn)基地和中草藥生產(chǎn)的科技型企業(yè)。 培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃器皿若干。 冰箱 205L 三臺(tái)。 人工氣候箱 SPX250LC 三臺(tái)。 （二）研究支撐條件 研究隊(duì)伍 課題組成員共有 6 人，其中高級(jí)職稱有 3 人，中級(jí)職稱 3人（專職試驗(yàn)員 1 人），對(duì)三葉青的種質(zhì)采集與鑒定、影響三葉青生長(zhǎng)與塊根發(fā)育的試驗(yàn)、組織擴(kuò)繁及相關(guān)栽培實(shí)驗(yàn)都能自行完成。 （三）預(yù)期獲取自主知識(shí)產(chǎn)權(quán) 獲取自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的三葉青繁殖和栽培技術(shù)方面專利1 項(xiàng)； 在核心期刊發(fā)表論文 3 篇以上。 能周年生產(chǎn)三葉青，向人們提供豐富的三葉青藥材，滿足 人民用藥需要，同時(shí)也為花卉市場(chǎng)提供插花材料和觀葉的盆花，豐富花卉市場(chǎng)的種類。成品苗成活率由原來(lái)的 40%— 50%提高到 90%。 栽后促早發(fā)、減少僵苗、死苗，采用種植基質(zhì)改良，調(diào)整基質(zhì)配比，進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)土容器栽培。 小苗擴(kuò)繁后，通過(guò)馴化煉苗達(dá)到壯苗出圃的過(guò)程中，通過(guò)假植基質(zhì)的選用、改進(jìn)種植方法、嚴(yán)格控制肥水管理的同時(shí)，采用“脫離凈化條件下的自然光煉苗”的技術(shù)方法。 （二）對(duì)三葉青的人工組織培養(yǎng)技術(shù)、小苗培養(yǎng)技術(shù)、改進(jìn)大田栽培技術(shù)等方面進(jìn)行深入探索研究。 從種質(zhì)資源保護(hù)的角度看，公司充分研究利用當(dāng)?shù)氐闹兴幉馁Y源，保護(hù)了野生三葉青資源，有助于維護(hù)當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)平衡。 (2)本項(xiàng)目建成至少可解決 50 至 60 人的勞動(dòng)就業(yè)，同時(shí)直接帶動(dòng)發(fā)展其他就業(yè)人員 140 人以上，并通過(guò)提供種子種苗、技術(shù)培訓(xùn)、產(chǎn)品訂合同辦證收購(gòu)等方式帶動(dòng)周邊中藥材生產(chǎn)基地 300500畝，對(duì)當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)增效農(nóng)民增收具有輻射和示范作用。因?yàn)槿~青高投入、高風(fēng)險(xiǎn)、高科技，所以利潤(rùn)很高，效益非常明顯。以三葉青為主要原料成功研發(fā)的中成藥金芪片、金絲地甲膠囊是具有中國(guó)特色的新一代防治惡性腫瘤藥物，特別是三葉青的抗癌療效被發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用后，三葉青的價(jià)格飛速上漲，在市場(chǎng)上供不應(yīng)求，由下表可知， 2020 年平均價(jià)格只有 85 元/kｇ到 2020 年 上漲到 250 元 /kｇ，是 2020 年價(jià)格的 倍， 上漲速度最快的是 20202020 年增長(zhǎng)率達(dá) 28％?？傊?，對(duì)三葉青的化學(xué)成分、藥理作用的研究已經(jīng)很多，未來(lái)對(duì)三葉青的研究發(fā) 展趨勢(shì)主要是對(duì)其塊根形態(tài)發(fā)育以及三葉青的種質(zhì)篩選及高效生態(tài)技術(shù)等方面進(jìn)行研究。由于三葉青具有很高的藥用和觀賞價(jià)值，藥材市場(chǎng)三葉青需求量很大，而人工繁殖又很少，人們開始大量采集野生三葉青，導(dǎo)致野生三葉青資源銳減。據(jù) 1998年報(bào)道三葉青的乙酸乙酯溶部分主要成分為 6’ 0－苯甲?；}卜甙 (6’ － O－ benzoyldau－costerol) 具有一定的腫瘤抑制和抗病毒作用；丁鋼強(qiáng)等 2020 年研究發(fā)現(xiàn)，三葉青提取物中乙酸乙酯溶部分對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2 活性具有較強(qiáng)的抑制作用正丁醇部分也有一定的作用，有力支持和驗(yàn)證了以上研究結(jié)果。伍昭龍等同時(shí)開展了三葉青水煎液對(duì) CCl4 致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用研究，研究結(jié)果表明，該中藥除能降低肝損傷大鼠血清 ALT、 AST 及 MDA 水平外，還能降低 ALP (堿性 磷酸酶 ) 水平； 而 SOD水平明顯升高。 本項(xiàng)目的研究旨在為擴(kuò)大野生三葉青的資源，加速三葉青栽培和開發(fā)提供新技術(shù)；本研究還為開展該物種遺傳育種和保護(hù)生物學(xué)等方面的研究提供了良好的試驗(yàn)基礎(chǔ)，具有廣泛的應(yīng)用前景；利用快繁技術(shù)繁殖三葉青， 可以 提高土地利用率開辟了新的途經(jīng)，對(duì)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和貧困山區(qū)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展 具 有重要的現(xiàn)實(shí)意義和長(zhǎng)遠(yuǎn)的歷史意義 ；還可以保持自然界生物多樣性向人們提供豐富的三葉青種質(zhì)資源，解決三葉青藥材來(lái)源匱乏的問(wèn)題，滿足人民用藥需要，可實(shí)現(xiàn)可持續(xù)性發(fā)展。三葉青主要生長(zhǎng)在蔭蔽度較高的山谷、灌叢林間等腐殖質(zhì)較高的地方，在陽(yáng)光直射的地方偶有生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)不良，其生長(zhǎng)環(huán)境要求相對(duì)嚴(yán)格。在長(zhǎng)江以南地區(qū)，即使在室外越冬，也可完全不用任何防寒措施，室內(nèi)盆栽則可在江北地區(qū)廣泛應(yīng)用。 另外，三葉青可塑性強(qiáng)，三葉青是四季常綠的藤本植物，葉片細(xì)小、繁密、光亮，可根據(jù)環(huán)境和觀賞要求 進(jìn)行多樣化栽培和造型。用三葉青研制出的一種創(chuàng)新中藥，有抑制和清除乙肝病毒，調(diào)整機(jī)體免疫、保護(hù)肝細(xì)胞、阻斷肝纖維化等作用。劉東（ 1999）從其地上部分的石油醚萃取物中分離到 4 個(gè)化合物：蒲公英萜酮、蒲公英萜醇、β 谷甾醇和麥角甾醇?；絷浚?2020）在三葉青塊根乙醚提取物中共分離出 21 個(gè)化合物，檢測(cè)出 18 個(gè)組分，其中含量較高的是亞油酸、棕櫚酸、油酸、二苯胺、 亞麻酸甲酯和硬脂酸。研究藥用瀕危植物的栽培技術(shù)能正確處理自然資源利用 和經(jīng)濟(jì)發(fā)展之間的關(guān)系 ，是實(shí)現(xiàn)可持續(xù)性發(fā)展的重要途徑。而研究野生植物的馴化和生態(tài)栽培技術(shù)是維護(hù)生物多樣性、維持生態(tài)環(huán)境平衡、 挽救瀕于滅絕的植物 、保存野生植物種質(zhì)資源與開發(fā)利用的根本保證。 通過(guò)本項(xiàng)目建設(shè)，以公司為龍頭，聯(lián)結(jié)廣大農(nóng)戶，通過(guò)“公司 +基地 +農(nóng)戶”的模式發(fā)展優(yōu)質(zhì)三葉青產(chǎn)業(yè)，全面利用高新技術(shù)和新品種與人工栽培生產(chǎn)新工藝等，勞 動(dòng)生產(chǎn)效率和資源的有效利用明顯提高，從而進(jìn)一步提高三葉青產(chǎn)品的附價(jià)值。 2．確定三葉青有效成分總黃酮提取工藝并建立快速檢測(cè)技術(shù)。 能周年生產(chǎn)三葉青，向人們提供豐富的三葉青藥材，滿足人民用藥需要，同時(shí)也為花卉市場(chǎng)提供插花材料和觀葉的盆花，豐富花卉市場(chǎng)的種類。經(jīng)過(guò)篩選的種質(zhì)進(jìn)行組織培養(yǎng)擴(kuò)繁，培育優(yōu)質(zhì)種苗。 一、主要研究?jī)?nèi)容 1．三葉青生態(tài)栽培技術(shù)研究與示范推廣 研究三葉青引種馴化栽培、種源繁殖、肥料使用、病蟲害防治、采收與加工等標(biāo)準(zhǔn)化栽培技術(shù)規(guī)程。 余杭區(qū)農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項(xiàng)目 項(xiàng)目名稱： 野生三葉青馴化栽培、種質(zhì)篩選及開發(fā)利用 承擔(dān)單位： 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司 合作單位： 杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 、浙江大學(xué) 目 錄 一、 項(xiàng)目 申請(qǐng)表 二、 項(xiàng)目可行性研究報(bào)告 三、承諾書 余杭區(qū) 2020年度農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新及社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目申報(bào)表 申 報(bào) 單 位 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)科 技有限公司 項(xiàng) 目 主持人 鄔錫偉 項(xiàng) 目 名 稱 野生三葉青的馴化栽培、種質(zhì)篩選及 開發(fā)利用 起止年 限 20200530——20200530 聯(lián) 系 電 話 13306811628 項(xiàng)目類別 農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項(xiàng)目 項(xiàng)目擬投入經(jīng)費(fèi) 50 萬(wàn)元 項(xiàng)目申報(bào)單位上年度 銷售收入 0 萬(wàn)元 技術(shù)依托單位 杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院、浙江大學(xué) 上繳稅收 0 萬(wàn)元 技術(shù)開發(fā)費(fèi) 0 萬(wàn)元 項(xiàng)目主要研究?jī)?nèi)容及預(yù)期經(jīng)濟(jì)效益： 三葉青是我國(guó)獨(dú)有的、極其稀少而珍貴的中草藥，具有抗病毒、抗炎、鎮(zhèn)痛與解熱、保肝等作用且毒副作用小，是西藥無(wú)法代替的植物抗生素；加上抗瘤藥用價(jià)值發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用，臨床上已廣泛用于抗癌、抗腫瘤及抗艾滋病毒等疾 病。 本項(xiàng)目的研究旨在為擴(kuò)大野生三葉青的資源 ,加速三葉青栽培和開發(fā)提供新技術(shù)，重點(diǎn)進(jìn)行該物種的遺傳育種和保護(hù)生物學(xué)研究，并針對(duì)三葉青馴化栽培技術(shù)、生態(tài)復(fù)合間混種及不同條件下的活性成分分析和優(yōu)質(zhì)種質(zhì)篩選與高效栽培進(jìn)行研究與應(yīng)用示范。在系統(tǒng)調(diào)査研究基礎(chǔ)上，在我省主要分布區(qū)域收集三葉青種質(zhì)資源。 篩選出適合三葉青組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)小苗的過(guò)程中，采用愈傷組織培養(yǎng)及最佳培養(yǎng)基配方的技術(shù)，整個(gè)過(guò)程時(shí) 間縮短了 6 個(gè)月，組培苗移栽成活率達(dá) 90%以上。 三、主要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)、社會(huì)效益及成果 1．制定《三葉青生 態(tài)栽培技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)》，建立三葉青試驗(yàn)、示范基地 20 畝，推廣 300畝，投產(chǎn)后年增產(chǎn)值 2020 萬(wàn)元，年增利潤(rùn) 400 萬(wàn)元，年增稅收 80 萬(wàn)元。 5．發(fā)表學(xué)術(shù)論文 2 篇，申請(qǐng)專利 1 項(xiàng)。同時(shí)，在社會(huì)經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展的今天，大量野生植物 資源的破壞和野蠻的采集，使野生植物種類和數(shù)量急劇下降，最終導(dǎo)致生態(tài)平衡的破壞，直接威脅著人類的生存與發(fā)展。積極建設(shè) “ 綠色浙江 ” ，推行以資源節(jié)約型、科 技先導(dǎo)型、質(zhì)量效益型和清潔生產(chǎn)為特征的可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略， 在全國(guó)率先建立符合可持續(xù)發(fā)展要求的良性生態(tài)環(huán)境系統(tǒng)已成為浙江省各級(jí)政府的一項(xiàng)重要戰(zhàn)略任務(wù)。 三葉青因其藥效顯著，開發(fā)潛力巨大。 Liu D（ 2020）報(bào)道從三葉青中 得到一種新的黃酮碳苷。按《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（ 2020版）“食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)”載：“ 三葉青無(wú)毒，無(wú)致突變 性”，其提取物對(duì)人肝癌細(xì)胞 HepG2 有較強(qiáng)的抑制作用。鑒于三葉青的良好藥用價(jià)值，其進(jìn)一步開發(fā)利用具有十分廣闊的前景。三葉青庭園栽培表現(xiàn)抗病、少蟲害，十分耐寒。因此三葉青的馴化栽培是保障三葉青產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的必然途徑。因此在加強(qiáng)三葉青野生資源種質(zhì)保護(hù)的同時(shí)進(jìn)行三葉青馴化栽培、育種、野生撫育等方面的研究，在廣大農(nóng)村地區(qū)進(jìn)行推廣種植，有利于三葉青資源的持續(xù)利用。 二 、 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì) 目前國(guó) 內(nèi)外對(duì)三葉青的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理以及生藥鑒定等方面，鐘曉明等 通過(guò)研究三葉青提取物（包括總黃酮、總氨基酸及多糖成分）對(duì) CCl4 致急性肝損傷小鼠的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)其能夠明顯降低肝損傷小鼠 ALT (谷丙轉(zhuǎn)氨酶 )、 AST (谷草轉(zhuǎn)氨酶 ) 的增高，減輕肝細(xì)胞變性，炎癥浸潤(rùn)及壞死等病變；降低肝中 MDA (丙二醛 ) 生成量。惡性腫瘤的治療目前在醫(yī)學(xué)界尚無(wú)理想的藥物和方法，且此類疾病藥物耐受性明顯增高，但同時(shí)中醫(yī)中藥及有關(guān)營(yíng)養(yǎng)支持療法為治療惡性腫瘤開辟了新途徑。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，國(guó)內(nèi)外對(duì)三葉青的生物學(xué)和栽培繁殖特性上研究的比較少，目前只有沈宗根 、戴雅娟、呂洪飛 等人研究了不同遮蔭處理對(duì)三葉青光合作用，葉綠素?zé)晒庖约叭~綠素含量的影響，對(duì)于三葉青人工繁殖和生態(tài)栽培技術(shù)的研究卻很少報(bào)道，國(guó)內(nèi)學(xué)者只研究了用三葉青進(jìn)行人工繁殖技術(shù)，但成活率低，產(chǎn)量不高，尚未見其三葉青種質(zhì)篩選方面的報(bào)道。本世紀(jì)初也有學(xué)者開始研究了三葉青生長(zhǎng)發(fā)育與光照強(qiáng)度、溫度、激素、 pH值的關(guān)系和三葉青的人工繁殖技術(shù)。 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