【正文】 科學(xué)學(xué)報(bào) , 2020, 28(10) : 2020– 2034. [2] 張 瑩瑩，王修林，楊汝君，等 . 鉛離子對(duì)海洋浮游植物生長(zhǎng)影響的研究 [J]. 海洋科學(xué) , 2020, 29(6) : 28– 34. [3] 宋瑜，金樑，曹宗英，等 . 植物對(duì)重金屬鎘的響應(yīng)及其耐受機(jī)理 [J]. 草業(yè)學(xué)報(bào) , 2020, 5(17) : 84– 91. [4] 鐵柏清，孫健，秦普豐，等 .單一重金屬污染對(duì)燈心草生長(zhǎng)及重金屬積累特性的影響 [J]. 生態(tài)與農(nóng)村環(huán)境學(xué)報(bào) . 2020, 22(2) : 65– 70. [5] 李德明，鄭昕，張秀娟 . 重金屬對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) , 2020, 37(1): 74– 75. [6] 李秀珍，李彬 . 重金屬對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育及品質(zhì)的影響 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) , 2020, 36(14), 5742– 5746 [7] 沙爾比亞 建議今后在以下幾方面開展進(jìn)一步的工作： (1)以不同產(chǎn)地的丹參作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行各項(xiàng)生理指標(biāo)的測(cè)定。隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)及處理濃度的增加，游離脯氨酸含量增加，丹參生長(zhǎng)受到一定的抑制 [27]。根據(jù) Csonka(1991)和 (2020)等的報(bào)道，脯氨酸的積累對(duì)細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)、 細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定、氧化的降低具有非常重要的作用。 植物器官衰老時(shí)或逆境條件下 [15,18]，往往發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，而 MDA 是其綿陽(yáng)師范學(xué) 2020屆畢業(yè)論 鉛離子脅迫對(duì)丹參幼苗生理活性的影響 11 產(chǎn)物之一，因此，通常利用它作為脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)，表示細(xì)胞膜脂 過(guò)氧化程度和植物對(duì)逆境條件反應(yīng)的強(qiáng)弱。本實(shí)驗(yàn)中，葉綠素 a 的變化比葉綠素 b明顯，說(shuō)明高濃度的鉛脅迫對(duì)丹參幼苗葉片中葉綠素 a 的影響較大，其機(jī)理和顯著程度需要進(jìn)一步研究。 POD是一種含鐵的金屬蛋白質(zhì)，是植物體內(nèi)常見的氧化還原酶。說(shuō)明鉛脅迫在高濃度鉛時(shí)，丹參受傷害較為明顯；且脅迫時(shí)間對(duì)丙二醛的含量的 影響較濃度不明顯，說(shuō)明影響丙二醛含量的主要因素為 Pb2+濃度。 植物器官衰老或在逆境條件下發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，丙二醛通常作為脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)，表示細(xì)胞膜脂過(guò)氧化程度和植物對(duì)逆境條件下膜系統(tǒng)受損程度的指標(biāo)。而當(dāng)脅迫濃度增加時(shí)，脯氨酸含量大量增加，可能是脯氨酸對(duì)鉛脅迫逆境下積累更多的游離脯氨酸以保持綿陽(yáng)師范學(xué) 2020屆畢業(yè)論 鉛離子脅迫對(duì)丹參幼苗生理活性的影響 9 滲透作用。當(dāng) Pb2+濃度達(dá)到 400mg/L及大于該濃度時(shí)，脯氨酸含量的增加越來(lái)越顯著，且隨時(shí)間的增長(zhǎng)，幾乎成倍的增長(zhǎng)。葉綠素含量的降低有多方面的原因，與合成葉 綠素所需酶受重金屬破壞有關(guān)，可能是鉛離子被植物吸收后，細(xì)胞內(nèi)的鉛離子作用于葉綠素生物合成途徑的幾種酶的肽鏈中富含 SH 的部分，改變了正常構(gòu)型，從而抑制了酶的活性，阻礙葉綠素的不可逆損傷。另外，葉綠素 a 和葉綠素b 在 Pb2+濃度較低時(shí)會(huì)有一定程度的上升，說(shuō)明低濃度的 Pb2+可以 增加葉片葉綠素含量隨著鉛處理濃度的增加及時(shí)間的延長(zhǎng)，葉綠素的增加量開始下降。 4 結(jié)果及分析 含水量的變化 由圖 2 可 以看出，對(duì)照組的含水量基本沒(méi)變化隨著脅迫時(shí)間的增加，含水量的百分比逐漸降低。以加熱煮沸 5min的酶液為對(duì)照，反 應(yīng)體系加入酶液后，立即于 34℃水浴中保溫 3min，然后迅速稀釋 1倍， 470nm 波長(zhǎng)下比色，每隔 1min 記錄 1 次吸光度（ A470），共記錄 5次。 按雙組分分光光度法原理，建立方程組，解此方程組 A453=(103） C 糖 A532—A600=（ 155103) CMDA+(103) C 糖 綿陽(yáng)師范學(xué) 2020屆畢業(yè)論 鉛離子脅迫對(duì)丹參幼苗生理活性的影響 5 酶活性的測(cè)定 酶液提取 取 5g 洗凈的丹參葉片 [10,20,24,25]，放入研缽中，加入適量的磷酸緩沖液，研磨成勻漿。 取 8支干凈試管，編號(hào)， 7只為樣品管（七個(gè)重復(fù)），各加入提取液 2ml。用吸管輕輕吸取上層脯氨酸紅色甲苯溶液于比色杯中，以甲苯溶液為空白對(duì)照，在 520mm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（ A）值。 樣品鮮重稀釋倍數(shù)提取液體積葉綠素的濃度 ??????? ?? 1000綿陽(yáng)師范學(xué) 2020屆畢業(yè)論 鉛離子脅迫對(duì)丹參幼苗生理活性的影響 4 表 1 標(biāo)準(zhǔn)樣的配制 Confecting of the standard samples 試 劑 管號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 10μ g 分別計(jì)算葉綠素 a、 b和總?cè)~綠素的含量 葉綠素含量等于 脯氨酸含量的測(cè)定 脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 取 7 支試管 [10,17]，編號(hào)，按下表配制每管含量為 0～ 6μ g 的脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)液。最后用乙醇定容至 25ml，搖勻，把葉綠體色素提取液稀釋 5 倍后倒入光徑 1cm 的比色杯內(nèi)。計(jì)算： 鮮重含水量（％）＝（ Wf Wd） / Wf * 100% 干重含水量（％）＝（ Wf Wd） / Wd * 100% 葉綠素含量的測(cè)定 取不同濃度等量丹參葉片 [10,12,14]，擦凈組織表面污物，分別剪碎（去掉中脈），混勻。取出培養(yǎng)皿和葉片冷卻至室溫，用電子天平稱葉片的重 量。一共設(shè)定 6 個(gè)組，編號(hào) ：① (對(duì)照 )、②、③、④、⑤、⑥ ,其 Pb2+濃度分別為 0、 100 mg/L、 200 mg/L、 400 mg/L、800 mg/L、 1600mg/L。H2O 、 2 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)樣品 丹參幼苗 主要儀器及試劑 移液管； 申溢牌電熱不繡鋼蒸餾水器（上海三中醫(yī)療器械有限公司出產(chǎn)）； 雙燕牌冰箱（博西華家用電器有限公司出產(chǎn)）； 恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司出產(chǎn)）； 高速冷凍離心機(jī)（貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司廣州分公司）； 電子萬(wàn)用爐（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）； FA1104A 電子天平（上海精天電子儀器有限公司）； 綿陽(yáng)師范學(xué) 2020屆畢業(yè)論 鉛離子脅迫對(duì)丹參幼苗生理活性的影響 2 Sartorius BP211D 電子天平 （德國(guó)賽多利斯公司） HHSⅡ 2 數(shù)顯恒溫水?。ㄉ虾？等A生化儀器制造有限公司） ； UL trospec 3300 pro 型紫外可見分光光度計(jì) （ Amersham biosciences）； 硝酸鉛； 95%乙醇； 主要試劑的配置 反應(yīng)混合液 [10] 100mmol/L 磷酸緩沖液 ()50mL，加入愈創(chuàng)木酚 28uL，加熱攪拌，直至愈創(chuàng)木酚溶解，待溶液冷卻后，加入 30%過(guò)氧化氫 19uL，混合均勻保存于冰箱中。直接或間接的重金屬污染物在自然界中沉積，毒性較大 ， 儲(chǔ)蓄性強(qiáng)，難降解，對(duì)人類健康具有潛在的危害性。具祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效，是一種臨床應(yīng)用廣泛的中藥。 lead。說(shuō)明了低濃度(0~400mg/L)鉛對(duì)植物生長(zhǎng)傷害不明顯，而高濃度 (400mg/L 以上 )鉛對(duì)植物的傷害明顯。結(jié)果顯示，隨鉛濃度的上升和脅迫時(shí)間的增長(zhǎng)，含水量下降；在低濃度鉛時(shí)，葉綠素含量有小程度上升，當(dāng)鉛濃度高時(shí)，葉綠素呈下降趨勢(shì)；在低濃度鉛 時(shí)，丙二醛、脯氨酸、酶活性都隨脅迫時(shí)間的增長(zhǎng)而有一定的上升，維持在相對(duì)穩(wěn)定的水平；當(dāng)鉛的濃度升高時(shí)，則含量會(huì)有極速的增長(zhǎng)。 at high lead concentration, those will increase quickly. The results showed that the low concentration of lead can promote the growth of plants, however, the high concentration of lead damage the plants obviously. Key words: Salvia miltiorrhiza。其味苦、性微寒，歸心、肝二經(jīng)。 由于人類早期對(duì)環(huán)境問(wèn)題的忽略 [9]，產(chǎn)生了一系列的環(huán)境問(wèn)題，特別 是重金屬的污染已成為一大公害。研究鉛對(duì)中江產(chǎn)丹參