【正文】 選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。主要的細(xì)胞因子有：白細(xì)胞介素、干擾素、生長(zhǎng)因子、趨化因子家族、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、轉(zhuǎn)化因子家族以及其他細(xì)胞因子等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：血象特點(diǎn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)血象：血紅蛋白、紅細(xì)胞均減少，以血紅蛋白減少更為明顯。血小板計(jì)數(shù)一般正常。有兩種計(jì)算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散（》48h）的結(jié)果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環(huán)直徑 k為常數(shù)）單向擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)的注意點(diǎn)：（1）抗血清必須特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng)，在良好條件下保存。（5）應(yīng)用單克隆抗體測(cè)量多態(tài)性抗原時(shí)，測(cè)定值偏低；用多克隆抗體測(cè)量單克隆病時(shí)，測(cè)定值偏高2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：雙向擴(kuò)散試驗(yàn)雙向擴(kuò)散試驗(yàn)：在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在最恰當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線，根據(jù)沉淀線的位置、形狀以及對(duì)比關(guān)系，可對(duì)抗原或抗體作出定性分析。在相應(yīng)孔中加入抗原或抗體，待其自由擴(kuò)散后，抗原、抗體形成可見的沉淀線。分子量小者，擴(kuò)散快，反之較慢?？贵w效價(jià)是抗原、抗體經(jīng)過自由擴(kuò)散形成沉淀線，出現(xiàn)沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價(jià)。參考值：AGLT50大于l800s（30min）（2）臨床意義：減少見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥（25～150s）、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。：屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：激素類受體、遞質(zhì)類受體、丙種球蛋白受體、病毒受體、EP0受體和鐵蛋白受體等。另外，也可見獲得性血紅蛋白病。也有多種基因異常導(dǎo)致的血紅蛋白病，如HbE、Hb Constant Spring、Hb Lepore等。這種直接法所測(cè)的細(xì)胞為IgM生成細(xì)胞，其他類型Ig由于溶血效應(yīng)較低，不能直接檢測(cè)，可用間接檢測(cè)法，即在小鼠脾細(xì)胞和SRBC混合時(shí)，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體生成細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物，此時(shí)能活化補(bǔ)體導(dǎo)致溶血，稱間接空斑試驗(yàn)。SBA能與人及多數(shù)哺乳動(dòng)物IgG的Fc段呈非特異性結(jié)合，利用這一特征，首先將SPA包被SRBC，然后進(jìn)行溶血空斑測(cè)定，可提高敏感度和應(yīng)用范圍。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋巴細(xì)胞分離：利用單核細(xì)胞在37℃和Ca2+存在時(shí)，能主動(dòng)粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性，從單個(gè)核細(xì)胞懸液中除去單核細(xì)胞，從而獲得純淋巴細(xì)胞群。常用的方法包括：①E花環(huán)沉降法；②尼龍毛柱分離法；③親和板結(jié)合分離法；④磁性微球分離法及熒光激活細(xì)胞分離儀分離法?？梢詼y(cè)定血鋅或發(fā)鋅判斷體內(nèi)含鋅情況。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師臨檢基礎(chǔ)知識(shí)講解：輸血傳播性疾病的概述常見的有：乙型、丙型肝炎，艾滋病，巨細(xì)胞病毒感染，梅毒，瘧疾，弓形體病等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師臨檢基礎(chǔ)知識(shí)講解：常見輸血的不良反應(yīng)溶血反應(yīng)、非溶血性發(fā)熱反應(yīng)、過敏反應(yīng)、蕁麻疹、非心源性肺水腫、移植物抗宿主病、輸血后紫癜、對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板或血漿蛋白的同種（異體）免疫等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋病奈瑟菌的生物學(xué)特性（1）形態(tài)與染色：本菌的形態(tài)與腦膜炎奈瑟菌很相似。（2）培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求較高，須在含有血液、血清或多種氨基酸和無機(jī)鹽類物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。（3）生化反應(yīng)：可發(fā)酵葡萄糖、產(chǎn)酸，但不酵解麥芽糖（常借此與腦膜炎奈瑟菌相鑒別）。2012年臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：淋巴細(xì)胞保存與活力的測(cè)定（1）短期保存技術(shù)：將分離的細(xì)胞用適量含10%～20%滅活小牛血清的Hanks、Tc19RPMIl640或其他培養(yǎng)液稀釋重懸。臺(tái)盼藍(lán)又稱錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，這種染料不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，但死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，通過死亡細(xì)胞與活細(xì)胞的百分比可反映細(xì)胞活力。故檢測(cè)相對(duì)易采集的血藥濃度，替代心、腦、腎等難以取樣的靶位藥物濃度的可行性基礎(chǔ)2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：水與鈉的代謝紊亂水與鈉的代謝紊亂：等滲性缺水，低滲性缺水，高滲性缺水，水過多。（二）臨床表現(xiàn)：少尿、畏食、惡心、乏力、舌干燥、眼窩下陷、皮膚干燥、松弛，但不口渴。（四）治療 在積極治療原發(fā)病的同時(shí)，應(yīng)給予等滲鹽水，并注意補(bǔ)充血容量（包括晶體和膠體）糾正體克。輕度缺鈉：乏力、頭暈、手足麻木、口渴不明顯。（三）診斷：①依據(jù)病史及表現(xiàn)；②尿Na+和Cl下明顯減少；③血清鈉低于135mmol/L；④紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤。缺水量為體重的4%～6%.重度缺水 除上述癥狀外，出現(xiàn)躁狂、幻覺、譫妄、甚至昏迷。有時(shí)可發(fā)生腦疝。（二）診斷：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容和血漿蛋白量均降低；血漿滲透壓降低。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：鐵染色與代謝的檢查特點(diǎn)鐵染色顯示細(xì)胞外鐵增多，鐵粒幼細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增加、鐵顆粒增多變粗；如幼紅細(xì)胞鐵顆粒在6個(gè)以上（正常少于4個(gè)），圍繞并靠近核排列成環(huán)狀或半環(huán)稱此為環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞，占幼紅細(xì)胞15%以上，為本病特征和重要診斷依據(jù)。：見第二十二章流式細(xì)胞儀分析技術(shù)。B細(xì)胞經(jīng)熒光標(biāo)記的抗Ig抗體染色，細(xì)胞膜表面呈現(xiàn)的熒光著色可有不同的形式，開始均勻分布呈環(huán)狀，其后集中在某些部位呈斑點(diǎn)狀，然后又可集在一個(gè)部位呈帽狀，最后可被吞飲入胞漿直至熒光消失。水和鈉成比例的喪失，血清鈉仍在正常的沲圍，細(xì)胞外液滲透壓也保持正常。（三）診斷：主要依據(jù)病史和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。補(bǔ)液量（l）=hct上升值/hct正常值體重（kg）二、低滲性缺水（一）病因：①胃腸道消化液持續(xù)喪失，②大創(chuàng)面慢性滲液；③腎排鈉過多。重度缺鈉：病人神志不清、肌痙攣性抽搐、腱反射減弱或消失，出現(xiàn)木僵，甚至昏迷。三、高滲性缺水（）病因：①攝人水不足，如食管癌吞咽困難，病危病人給水不足等；②水分喪失過多，如高熱大汗、燒傷暴露療法、糖尿病昏迷等。（四）治療：①盡早去除病因；②補(bǔ)充水分，不能經(jīng)口補(bǔ)充者，可以經(jīng)靜脈滴注5%%氯化鈉溶液；③因血液濃縮，體內(nèi)總鈉量仍有減少，故補(bǔ)水的同時(shí)應(yīng)適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充鈉鹽；④尿量達(dá)40ml/h后應(yīng)補(bǔ)充鉀鹽；⑤經(jīng)補(bǔ)液后酸中毒仍未能完全糾正者，應(yīng)給碳酸氫鈉。病人體重明顯增加，皮膚蒼白而濕潤(rùn)。對(duì)容易發(fā)生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、創(chuàng)傷和大手術(shù)者以及急性腎功能不全和慢性心功能不全的病人，應(yīng)嚴(yán)格限制人水量。與造血干細(xì)胞受損、造血微環(huán)境損傷及免疫介導(dǎo)有關(guān)。骨髓活檢對(duì)再障的診斷具有十分重要價(jià)值。因此，膽堿酯酶是一項(xiàng)具有重要。CHE是一種生物酶，具有降解膽堿酯并在自主神經(jīng)系統(tǒng)和肌肉運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)中起神經(jīng)傳遞的功能，它存在于血清、肝、大腦、腎、腸及胰中，對(duì)其檢測(cè)常被用于有機(jī)磷中毒患者的輔助診斷。網(wǎng)織紅細(xì)胞極低，血小板計(jì)數(shù)早期減少。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：再生障礙性貧血診斷（1）概念：是由多種原因致造血干細(xì)胞減少或功能異常，從而引起紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、血小板減少的一種獲得性疾病。（二）診斷：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容和血漿蛋白量均降低；血漿滲透壓降低。有時(shí)可發(fā)生腦疝。缺水量為體重的4%～6%.重度缺水 除上述癥狀外，出現(xiàn)躁狂、幻覺、譫妄、甚至昏迷。（三）診斷：①依據(jù)病史及表現(xiàn)；②尿Na+和Cl下明顯減少；③血清鈉低于135mmol/L；④紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤。輕度缺鈉：乏力、頭暈、手足麻木、口渴不明顯。（四）治療 在積極治療原發(fā)病的同時(shí)，應(yīng)給予等滲鹽水，并注意補(bǔ)充血容量（包括晶體和膠體）糾正體克。（二）臨床表現(xiàn)：少尿、畏食、惡心、乏力、舌干燥、眼窩下陷、皮膚干燥、松弛，但不口渴。當(dāng)SmIg抗體發(fā)生結(jié)合時(shí)，由于抗血清為雙價(jià)，使SmIg出現(xiàn)交聯(lián)現(xiàn)象，這種抗原與抗體結(jié)合物可連成斑點(diǎn)和帽狀，時(shí)間過長(zhǎng)，帽狀結(jié)合物可脫落或被吞飲而消失，因此染色后，觀察時(shí)間不能超過30min，或在染色時(shí)加疊氮鈉防止帽狀物形成或被吞飲。：B細(xì)胞表面有CD1CDCD2CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B細(xì)胞所共有，而有些僅活化B細(xì)胞所特有，據(jù)此可用相應(yīng)的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測(cè)。：T細(xì)胞表面有特異性綿羊紅細(xì)胞（E）受體，當(dāng)人的T細(xì)胞與綿羊紅細(xì)胞懸液按一定比例混合后，置4℃至少2小時(shí)或過夜，T細(xì)胞表面的E受體可與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合形成玫瑰花樣的花環(huán)，稱為活性E（Ea）花環(huán)。對(duì)容易發(fā)生抗利尿激素增多的疼痛、失血、休克、創(chuàng)傷和大手術(shù)者以及急性腎功能不全和慢性心功能不全的病人，應(yīng)嚴(yán)格限制人水量。病人體重明顯增加，皮膚蒼白而濕潤(rùn)。（四）治療：①盡早去除病因；②補(bǔ)充水分，不能經(jīng)口補(bǔ)充者，可以經(jīng)靜脈滴注5%%氯化鈉溶液；③因血液濃縮，體內(nèi)總鈉量仍有減少，故補(bǔ)水的同時(shí)應(yīng)適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充鈉鹽；④尿量達(dá)40ml/h后應(yīng)補(bǔ)充鉀鹽；⑤經(jīng)補(bǔ)液后酸中毒仍未能完全糾正者，應(yīng)給碳酸氫鈉。三、高滲性缺水（）病因：①攝人水不足，如食管癌吞咽困難，病危病人給水不足等；②水分喪失過多，如高熱大汗、燒傷暴露療法、糖尿病昏迷等。重度缺鈉：病人神志不清、肌痙攣性抽搐、腱反射減弱或消失，出現(xiàn)木僵，甚至昏迷。補(bǔ)液量（l）=hct上升值/hct正常值體重（kg）二、低滲性缺水（一）病因：①胃腸道消化液持續(xù)喪失，②大創(chuàng)面慢性滲液；③腎排鈉過多。（三）診斷：主要依據(jù)病史和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。水和鈉成比例的喪失，血清鈉仍在正常的沲圍，細(xì)胞外液滲透壓也保持正常。無論是藥物的治療作用還是不良反應(yīng)，從本質(zhì)上說都是通過藥物和靶位受體間的相互作用而產(chǎn)生的。（2）長(zhǎng)期保存技術(shù)：液氮深低溫（196℃）環(huán)境保存細(xì)胞，加入二甲亞砜作為保護(hù)劑。主要有三種抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。初次分離時(shí)，須置5%～10224。從患者體內(nèi)新分離的菌株可有莢膜和菌毛，經(jīng)人工培養(yǎng)后，呈卵圓形或球形，排列不規(guī)則。2012醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋病奈瑟菌的臨床意義臨床意義：淋病奈瑟菌是常見的性傳播疾病淋病的病原菌，主要通過性接觸直接侵襲感染泌尿生殖道，口咽部及肛門直腸的黏膜。此外，如血液被細(xì)菌污染，可使受血者由此引起菌血癥，嚴(yán)重者可致敗血癥。鋅在在正常成人體內(nèi)含量為2～，男性略高于女性，視網(wǎng)膜、前列腺、胰腺濃度最高；肌肉內(nèi)儲(chǔ)鋅占全身鋅的62%，骨占28%。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：鋅的吸收排泄鋅在小腸上皮細(xì)胞內(nèi)吸收，運(yùn)送至肝和全身。：根據(jù)相應(yīng)細(xì)胞的特性和不同的標(biāo)志加以選擇性純化。此法可用于檢測(cè)人類外周血中的IgG產(chǎn)生細(xì)胞，與抗體的特異性無關(guān)。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應(yīng)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，這種非紅細(xì)胞抗體溶血空斑試驗(yàn)稱為空斑形成試驗(yàn)，它的應(yīng)用范圍較大。由于脾細(xì)胞內(nèi)的抗體生成細(xì)胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補(bǔ)體參與下導(dǎo)致SRBC溶血，形成一個(gè)肉眼可見的圓形透明溶血區(qū)而成為溶血空斑（plaque）。常見的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改變而引起血紅蛋白功能或理、化性質(zhì)異常的疾病，如：引起血紅蛋白異常聚合的HbS??；不穩(wěn)定血紅蛋白癥、高鐵血紅蛋白血癥等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血紅蛋白病的定義與分類血紅蛋白病的定義與分類：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽鏈（α、β、γ、δ）的結(jié)構(gòu)異?；蚝铣呻逆溗俾实母淖儯鹧t蛋白功能異常所致的疾病。后者包括收縮蛋白、肌動(dòng)蛋白、錨蛋白和區(qū)帶（～）等，即骨架系統(tǒng)，起支架作用，對(duì)維持紅細(xì)胞的形狀、穩(wěn)定性和變形性有重要作用。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。如若兩者分子量相等，則形成直線。一般沉淀線靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線靠近抗體孔，提示抗原量大。試管法：在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴(kuò)散，在抗原、抗體濃度最適時(shí)形成沉淀線。（3）每次測(cè)定時(shí)必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控。試管法：%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測(cè)抗原在凝膠中自由擴(kuò)散，在抗原抗體比例恰當(dāng)位置形成沉淀環(huán)。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正常。（2）細(xì)胞因子可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用。（2）最后鑒定：腸桿菌科各屬細(xì)菌的最后鑒定是根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果定屬、種，或再用診斷血清做凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。臨床最常見的是大腸埃希菌。臨床特征為嚴(yán)重的腹痛、痙攣，反復(fù)出血性腹瀉，伴發(fā)熱、嘔吐等。（1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。（2）臨床意義：陽性見于鐮狀細(xì)胞貧血（HbS?。?，HbBart、HbI病可見少量鐮狀細(xì)胞。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究：由于TNF的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能，TNF療法的研究已被許多國(guó)家開展。（3）藥物的影響：如服用核黃素、呋喃唑酮、痢特靈、黃連素、牛黃、阿的平使尿呈黃色或深黃色；番瀉葉、山道年等使尿呈橙色或橙黃色；酚紅、番瀉葉、蘆薈、氨基匹林、磺胺藥等使尿呈紅色或紅褐色。尿透明度還易受某些鹽類結(jié)晶的影響。②固相酶免疫測(cè)定：如常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：肝硬化的臨床意義肝硬化代償期患者血清ALT可輕度增高或正常，失代償期ALT可持續(xù)升高。①酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)（EMIT）：了解其基本原理，反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測(cè)定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓涂片的檢查骨髓涂片的檢查（1）普通光鏡低倍鏡檢驗(yàn)：判斷骨髓增生程度；估計(jì)巨核細(xì)胞系統(tǒng)增生情況；觀察涂片邊緣、尾部、骨髓小粒周圍，有無體積較大或成堆分布的異常細(xì)胞。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本大部分采用穿刺法吸取。1935年制成第一臺(tái)火焰光譜光電直讀光度計(jì)，使得火焰光度法應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大。這是火焰光度法應(yīng)用中要選擇的關(guān)鍵條件?，F(xiàn)代的火焰分光光度計(jì)的基本框圖（見圖）示意出：試樣溶液經(jīng)霧化后噴入火焰，溶劑在火焰中蒸發(fā)，鹽粒熔融，轉(zhuǎn)化為蒸氣，離解成原子（部分電離），再由火焰高溫激發(fā)發(fā)光，發(fā)